成昊
- 作品数：4 被引量：24H指数：3
- 供职机构：湖北科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金湖北省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 生物活性玻璃/壳聚糖/羟基磷灰石复合骨修复材料制备及细胞相容性研究被引量：3
- 2014年
- 目的设计一种生物活性玻璃/壳聚糖/羟基磷灰石(BG/HA/CS)复合材料的骨组织工程支架,并对其理化性能和细胞相容性进行检测。方法不同比例的BG/HA/CS混合液用冷冻干燥法制备成支架。通过计算支架孔隙率;扫描电镜、X线衍射和傅立叶红外光谱分析其微观形貌和组成;采用材料试验机进行支架的机械性能检测,并评价生物活性玻璃的加入对支架的影响。将第3代兔骨髓间充质干细胞接种于支架上,使用扫描电镜检测支架对其粘附作用,采用MTT法检测细胞在支架上增殖,并评价生物活性玻璃的加入对支架的细胞相容性影响。结果合成的BG/CS/HA支架与模具拥有同样的大小及几何形状,具有相互贯通的多孔结构,未见生物活性玻璃聚集,孔隙率最高可达86.96%,孔径大小合适(100~300um),最大压缩强度为(1.95±0.13)Mpa。X射线衍射图可以看到特征性的BG衍射峰;傅立叶变换红外光谱可见特征的BG吸收峰,这表明材料内有明确的BG;第3代兔骨髓间充质干细胞在支架上共培养1天后,细胞在支架表面粘附。部分细胞伸展,并伸出伪足。共培养5天后,可见细胞数目增多,团聚,细胞表面可见微绒毛,细胞已开始向材料内部迁移。采用MTT法测量骨髓间充质干细胞在支架上的增殖情况可以看出骨髓间充质干细胞在BG/CS/HA支架上表现出了明显的增殖。结论采用溶液共混、冷冻干燥法可以制备出BG/CS/HA支架;支架具有良好的孔隙率,较好的机械强度,良好的组织相容性,可用于骨组织工程。
- 成昊祝少博孙晨禹志宏金林
- 关键词：生物活性玻璃羟基磷灰石壳聚糖
- 甲状旁腺素相关蛋白亚基因对骨骺干细胞的调控被引量：3
- 2013年
- 背景:甲状旁腺素相关蛋白-印第安刺猬蛋白两者相互作用调节着骨骺区软骨的分化成熟及增殖,促使骨骺区细胞处于一种相对稳定的状态。目的:分析甲状旁腺相关蛋白亚基因PTHrP(1-36)、PTHrP(38-94)和PTHrP(107-139)对骨骺干细胞的调控作用以及PTHrP(107-139)与其他调控因子的影响。方法:用脂质体介导的基因转染技术将质粒pTRE-PTHrP(1-36)、pTRE-PTHrP(38-94)和pTRE-PTHrP(107-139)分别转染pTet-on骨骺干细胞株,放入诱导分化培养基中进行培养,加入1mg/L的强力霉素进行诱导,以RT-PCR的方法检测增殖细胞核抗原基因的表达变化。再次将质粒pTRE-PTHrP(107-139)转染pTet-on骨骺干细胞株,加入不同浓度的强力霉素进行诱导,应用RT-PCR的方法检测Ⅱ型胶原、X型胶原、印第安刺猬蛋白、Ptc、Sox9、骨形态发生蛋白6基因的表达变化。结果与结论:强力霉素诱导的质粒pTRE-PTHrP(107-139)转染组的增殖细胞核抗原表达明显高于质粒pTRE-PTHrP(1-36)转染组和质粒pTRE-PTHrP(38-94)转染组;在强力霉素诱导的质粒pTRE-PTHrP(107-139)转染组中Ⅱ型胶原、Sox-9表达明显增强,Ihh表达未见明显变化,而Ptc、X型胶原、骨形态发生蛋白6表达明显降低。而且其表达量与强力霉素存在剂量依赖性。提示PTHrP(107-139)可能是通过调控Sox-9、Ptc、骨形态发生蛋白6的表达来促进骨骺干细胞增殖并抑制其分化的,而PTHrP(1-36)、PTHrP(38-94)对前癌干细胞的增殖并无明显作用。pTet-on质粒系统在前癌干细胞能有效的调控外来基因的表达。
- 张树威金伟祝少博成昊金林陶圣祥
- 关键词：干细胞甲状旁腺相关蛋白骨骺干细胞增殖增殖细胞核抗原
- hTGF-β1基因修饰BMSCs复合藻酸钙凝胶三维培养构建组织工程化软骨被引量：6
- 2012年
- 目的探讨hTGF-β1 转染骨髓间充质干细胞（BMSCs）复合藻酸钙凝胶三维培养构建组织工程化软骨的可行性。方法全骨髓法获取和培养大鼠BMSCs，取第3代细胞接种于细胞培养板。实验分成3组：Ad．hTGF-β1 转染组、Ad．EGFP转染组、空白对照组，前两组分别加入含Ad-hTGF-β1 与Ad．EGFP的无血清培养基，空白对照组添加不做任何处理的完全培养基。7d后，运用实时荧光定量PCR与Westernblot检测TGF-β1 的表达情况。将Ad．hTGF-β1 成功转染组的BMSCs继续大量扩增后。按照1．0×107／ml的细胞密度制成细胞-藻酸钙凝胶复合物，将复合物置于培养箱中继续体外培养。10d后，观察凝胶材料中的细胞形态与增殖情况，并将复合物包埋、切片。进行组织学及免疫组织化学染色分析软骨分化情况。结果转染后7d，实时荧光定量PCR结果显示TGF-β1 表达量的平均相对比值Ad．hTGF-β1 转染组（0．863）明显高于Ad．EGFP转染组（0．183）、空白对照组（0．180），差异有统计学意义（P〈0．05）。Westernblot检测发现Ad．hTGF．B1转染组的细胞内TGF-β1表达呈强阳性．而Ad-EGFP转染组及空白对照组细胞内的TGF．S1表达很弱。倒置显微镜观察到细胞在藻酸钙凝胶中能够很好的维持球形生长；MTr检测显示，不同时间点细胞在藻酸钙凝胶中的数量变化差异无统计学意义（P〉O．05）。HE染色可见有大量软骨陷窝形成，甲苯胺蓝、Masson染色可见有软骨基质分泌。CollagenⅡ免疫组织化学染色呈阳性表达。结论hTGF-β1 成功转染的BMSCs，在藻酸钙凝胶材料中培养在维持细胞形态的同时能够很好的向软骨细胞分化，此种培养方法更能模拟细胞在体内的生长方式。
- 张韬祝少博喻爱喜漆白文孙晨成昊
- 关键词：转化生长因子-Β1软骨
- 中药熏洗辅助关节镜清理治疗膝骨关节炎的Meta分析被引量：12
- 2011年
- 背景:目前国内出现了许多用中药辅助关节镜清理技术治疗膝骨关节炎的临床研究,但其疗效是否要优于单用关节镜技术,尚缺乏相关的循证医学证据。目的:评估中药辅助关节镜清理技术治疗膝骨关节炎的效果。方法:通过计算机和手工系统检索Cochrane图书馆(2010年第4期)、Medline、CBM、VIP、CNKI和WANFANG DATA(均为建库至2010-12),纳入比较关节镜技术单用(或与医药联用)和与中药联用治疗膝骨关节炎疗效的临床随机对照试验,两人独立评价其方法学质量后采用RevMan5.0软件进行Meta分析。结果与结论:最终纳入11个临床随机对照试验,共1304个膝关节,方法学质量多为B级。Meta分析结果从整体上显示,采用中药辅助关节镜清理技术治疗膝骨关节炎的效果优于单独采用关节镜清理技术或采用西药辅助。上述文献均未报道不良事件,且方法学质量不高,故建议进行严格设计、大样本、随机双盲对照试验来进一步证实。
- 钱定军成昊向一鸣
- 关键词：骨关节炎膝关节META分析
