李京京
- 作品数：10 被引量：5H指数：2
- 供职机构：中国科学院过程工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程农业科学医药卫生更多>>
- 甘油介导的疏水色谱复性重组人α-干扰素
- ＜正＞ 蛋白质的折叠复性是生物工程下游技术的瓶颈问题,传统的复性方法由于聚集沉淀而活性蛋白收率很低。采用色谱方法复性蛋白质具有独特的优点,近年来倍受蛋白质工作者的关注。凝胶过滤色谱、离子交换色谱和金属螯和色谱都曾被成功地...
- 李京京王芳薇刘永东罗天乐闭静秀苏志国
- 关键词：复性Α-干扰素疏水色谱甘油
- 文献传递
- 疏水层析分离正确折叠与错误折叠的复合干扰素被引量：2
- 2005年
- 采用疏水层析纯化重组复合干扰素,成功去除了复性过程中产生的错误折叠体、聚集体及杂蛋白,并考察了配基类型、盐浓度、pH值和流速对疏水层析纯化效果的影响,结果表明采用ButylSepharose 4FastFlow、硫酸铵初始浓度0 8mol L、缓冲液pH值8 3、线流速为90cm h时疏水层析纯化效果最佳,最终目标蛋白反相高效液相色谱检测纯度达到99 6 % ,还原及非还原型SDS PAGE电泳均呈单一条带,其比活为2 3×10 9IU mg,回收率为36 7%。
- 赵荣志刘永东王芳薇李京京夏新苏志国
- 疏水作用层析及其相关技术辅助蛋白质折叠复性的探索
- 本文对疏水层析及其相关技术辅助蛋白质重新折叠复性进行了探索。
实验发现，直接采用蛋白质纯化用的商业疏水作用介质不能有效地辅助蛋白质正确折叠，导致较低的活性收率和不可逆吸附;然而在层析流动相中加入甘油则能够克服上...
- 李京京
- 关键词：蛋白质复性疏水作用溶菌酶蛋白质纯化蛋白质折叠
- 文献传递
- 一种复合干扰素的纯化方法
- 本发明提供一种复合干扰素的纯化方法，包括如下步骤：将经常规方法发酵并收集的包涵体变性得到的复合干扰素，边搅拌边加入缓冲液D，然后在可以透过分子量50000以下的透析袋中，于缓冲液E中透析，进行复合干扰素蛋白质的复性；分出...
- 刘永东李京京王芳薇苏志国
- 文献传递
- 一种复合干扰素的纯化方法
- 本发明提供一种复合干扰素的纯化方法，包括如下步骤：将经常规方法发酵并收集的包涵体变性得到的复合干扰素，边搅拌边加入缓冲液D，然后在可以透过分子量50000以下的透析袋中，于缓冲液E中透析，进行复合干扰素蛋白质的复性；分出...
- 刘永东李京京王芳薇苏志国
- 文献传递
- 一种复性蛋白质的方法
- 本发明涉及一种采用渗透质和疏水层析的组合系统复性蛋白质的方法。基本过程为将变性蛋白质采用高浓度盐和变性剂梯度吸附到疏水层析柱上，然后用一定浓度的渗透质洗脱，使蛋白质在洗脱过程中逐渐复性，正确折叠而形成天然活性蛋白质。本发...
- 苏志国李京京
- 文献传递
- 一种复性蛋白质的方法
- 本发明涉及一种采用渗透质和疏水层析的组合系统复性蛋白质的方法。基本过程为将变性蛋白质采用高浓度盐和变性剂梯度吸附到疏水层析柱上，然后用一定浓度的渗透质洗脱，使蛋白质在洗脱过程中逐渐复性，正确折叠而形成天然活性蛋白质。本发...
- 苏志国李京京
- 文献传递
- 肝癌膜相关抗原HAb18G胞外区片段的纯化和复性研究
- 本文研究了大肠杆菌表达的重组蛋白HAb18G 胞外区片段形成的包含体的特性，并利用这一特性确立了HAb18G 胞外区片段的纯化和复性方法。其过程为：首先将包含体溶解在含有2M 脲的缓冲液中，1.6M (NH4)2SO4 ...
- 陈净李京京刘永东苏志国
- 关键词：HAB18GCD147复性
- 文献传递
- 反相色谱法研究人粒细胞集落刺激因子的离子交换色谱复性和稀释复性被引量：2
- 2005年
- 以反相色谱分析为主要手段,结合活性测定,研究了以包含体形式表达的重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)的稀释复性和离子交换色谱复性. 建立了L-精氨酸离子交换复性蛋白质的方法,将变性、还原的rhG-CSF吸附到高浓度变性剂平衡的离子交换色谱柱上,用L-精氨酸作洗脱剂进行梯度洗脱并同时脱除变性剂,实现了rhG-CSF的复性. 与稀释复性相比,色谱复性的rhG-CSF处于一种中间状态,呈现快速而不同步的动力学特点,这与色谱复性的梯度洗脱及固定相的吸附有关. 同时发现了对复性峰进一步稀释并且温育则可以提高其活性的新现象.
- 罗天乐丁虹李京京苏志国
- 关键词：包含体复性反相色谱离子交换色谱
- 液固层析辅助蛋白质从变性态恢复到活性态被引量：1
- 2006年
- 层析是化工中分离纯化一些价格昂贵的精细化工产品的常用手段,而液固层析因其温和、快捷、高效等优点已经成为蛋白质纯化过程中必不可少的工具.近年来层析技术的一个拓展是用于辅助蛋白质从变性态恢复到活性态,即所谓的复性,取得了令人瞩目的进展.液固层析辅助蛋白质复性可在高蛋白浓度下操作,适用于大规模生产,同时还能使目标蛋白得到部分纯化.对近年来发展的利用液固层析辅助蛋白质复性的方法做了归纳,包括凝胶过滤层析、离子交换层析、疏水相互作用层析、亲和层析和固定化的折叠催化剂及人工分子伴侣辅助蛋白质复性的方法,并对各自的优缺点和适用范围进行了比较分析.
- 陈净刘永东李京京苏志国
- 关键词：蛋白质再折叠复性
