朱灿灿
- 作品数：12 被引量：35H指数：3
- 供职机构：中国科学院合肥物质科学研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金中国科学院合肥物质科学研究院院长基金更多>>
- 相关领域：理学医药卫生自动化与计算机技术机械工程更多>>
- 多重巢式固相PCR-Array芯片用于高致病性病原微生物并行检测被引量：3
- 2019年
- 提出了一种多重巢式固相PCR的方法,以微流控芯片为载体,采用紫外交联方式将寡核苷酸序列固定在芯片上,构建了阵列式固相PCR-阵列(PCR-Array)芯片,用于细菌和病毒类高致病性病原微生物的并行检测。选择新疆出血热病毒、埃博拉病毒、炭疽杆菌和布鲁氏菌4种代表性高致病性病原微生物为研究对象,通过基因工程手段构建了包含有炭疽杆菌和布鲁氏菌特异性基因片段的重组质粒载体,利用病毒包装技术构建了包含有两种病毒特异性基因片段的逆转录病毒颗粒,完成了4种高致病性病原微生物阳性标准品的制备,并以此作为实验样本,探究了多重巢式固相PCR-Array芯片的制备方法和扩增体系。结果表明,在优化的实验条件下,多重巢式固相PCR-Array芯片检测4种高致病性病原微生物的检出限达10 copy/μL以下量级。本方法灵敏度高,特异性好,同时,引物空间上的隔离避免了相互干扰,提高了检测通量,在多种病原微生物快速并行检测方面具有良好的应用前景。
- 朱灿灿崔俊生胡安中杨柯赵俊赵俊刘勇邓国庆
- 一种检测流感病毒分型的crRNA、LAMP-CRISPR/Cas12a检测试剂盒及方法与应用
- 本发明公开了一种检测流感病毒分型的crRNA、LAMP‑CRISPR/Cas12a检测试剂盒及方法与应用，涉及生物技术领域。本发明通过LAMP与CRISPR技术结合，筛选优化用于各分型鉴定的LAMP引物及crRNA序列，...
- 朱灿灿朱灵尹雪儿刘勇邓国庆
- 基于微流控芯片的荧光定量PCR法快速检测乙肝病毒核酸被引量：16
- 2018年
- 提出了一种基于微流控荧光定量聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)的血液病毒快速检测新技术。采用3D打印技术制作了一种集气动阀和"树型"结构为一体的微流控芯片;运用Comsol软件对芯片导热性能进行了仿真;根据血站血液核酸检测工作中乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、人类免缺陷病毒(HIV)三种病毒的筛查流程,结合高温控性能的微流控荧光定量PCR分析系统,在所设计微流控芯片上开展了血液样本中HBV的检测研究。实验结果表明,该芯片具有良好的温度均匀性和导热性,芯片上可实现血液样本中HBV的快速检测,其Ct值在37左右呈弱阳性。该技术与目前血液筛查使用的大型核酸检测系统相比,具有操作过程简单、所占空间小、检测效率高且试剂消耗量少的优点,进一步优化实验条件可实现多病毒核酸的并行检测。
- 王可可杨柯赵俊赵俊朱灿灿朱灵
- 关键词：3D打印微流控芯片HBV检测荧光定量PCR
- 病原体核酸一体化并行检测微流控芯片研究
- 近年来，由于环境变化、自然灾害、物种多样性、抗生素大规模使用等因素，导致各类病原体引起的传染性疾病不断爆发，如非洲猪瘟病毒、埃博拉病毒、禽流感病毒等。在临床医学方面，病原体感染是引发肝炎、结核、肿瘤等多种疾病的重要诱因。...
- 朱灿灿
- 关键词：微流控芯片
- 基于微流控高分辨率熔解曲线的基因分型研究
- 2018年
- 目的建立一种用于人类乙醇脱氢酶2(acetaldehyde dehydrogenase 2, ALDH2)基因单核苷酸多态性位点准确快速分型的方法。方法将微流控芯片、实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)与高分辨率熔解曲线技术相结合。采用聚合物材料制作微流控芯片,在确保熔解过程中温度变化的均一性和精确性的同时,可显著改善热能传输,提高热循环速度,缩短分析时间,从而实现对单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点的快速检测与分析。结果在自主研制的微流控高分辨率熔解曲线分析系统上,以标准质粒为实验材料,测试了该系统的最低检测限可达10 copies/μL。同时,成功地实现了人类ALDH2基因三种基因分型(AA/GG/AG)的检测。结论微流控高分辨率熔解曲线分析系统为ALDH2基因分型提供了一种准确快速的检测方法,对指导临床硝酸甘油的个性化用药具有重要意义。
- 李志刚吴晓松吴晓松赵俊赵俊朱灿灿
- 关键词：光学仪器微流控芯片高分辨率熔解曲线基因分型个体化用药
- 基于3D打印技术的集成核酸提取芯片制备被引量：5
- 2015年
- 基于固相萃取原理,设计并制作了一种集成核酸提取功能的微流控芯片,用于人体全血中脱氧核糖核酸(DNA)的提纯。芯片主要包括:混合微通道、裂解腔、DNA提取腔、DNA存储腔。采用3D打印技术制作出芯片模板,通过模板注塑成型、氧等离子体键合等工艺制作出微流控芯片。利用该芯片,可以在20 min内完成血液和试剂的顺序加载、快速混合、血细胞裂解、DNA的提取等操作,且试剂消耗量少。通过对所提DNA链上稳定表达的内参基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)进行PCR扩增,并对扩增产物进行熔解曲线分析,以验证所提取DNA的质量。
- 马忠杰赵树弥朱灿灿朱灵李志刚张龙王安刘勇
- 关键词：3D打印微流控芯片顺序注射
- 基于LabVIEW的芯片PCR扩增荧光检测系统被引量：6
- 2020年
- 针对传统的传染病病原体检测需要依靠实验室内昂贵的仪器和专业的技术人员,无法实现现场快速检测的问题,设计了一种基于LabVIEW的集芯片聚合酶链式反应(PCR)扩增和荧光检测于一体的低成本便携式装置。该装置硬件由计算机、USB相机、微流控芯片、温控单元、荧光检测单元等组成。实验时,首先使用LabVIEW编写的上位机程序控制温控单元,实现微流控芯片的PCR;然后在每个PCR循环中的延伸阶段利用USB相机采集一幅荧光图像;最后使用IMAQ Vision软件包对采集的荧光图像进行图像处理分析。通过对寨卡病毒的保守区核酸片段的分析,证明该系统能够满足核酸扩增荧光检测的要求,可以在现场实现核酸扩增检测,提高核酸检测的便携性。
- 潘井宇朱欣潮朱灿灿郑贤锋朱灵杨柯
- 关键词：微流控芯片荧光检测温度控制系统
- 一种用于微量复杂性物证检材DNA提取纯化的试剂盒与提取方法
- 本发明提供一种用于微量复杂性物证检材DNA提取纯化的试剂盒与提取方法。所述试剂盒可有效进行多年陈旧布类、铁锈、泥土、色素中DNA提取纯化，由裂解液、结合液、漂洗液1、漂洗液2、纳米磁珠和洗脱液六部分组成，该试剂盒提取DN...
- 朱灿灿朱灵胡安中杨柯崔俊生邓国庆刘勇
- 文献传递
- 微流控聚合物链式反应芯片的多色荧光检测被引量：3
- 2017年
- 为了实现微流控芯片上多目标DNA片段的同时检测,建立了基于光棒匀光结构的微流控芯片多色荧光检测系统。根据微流控芯片中的聚合物链式反应(PCR)反应腔的特点,设计了基于超亮白光LED模组、光棒、二向色镜和CCD的正交型荧光检测系统。CCD可一次采集微流控芯片上所有PCR反应腔中的荧光信号,通过滤光片轮组合的变换,可实现多种荧光标记物的同时检测。采用荧光素钠溶液对激发光的均匀性进行了测试,激发产生的荧光图像均匀度达到93.99%,可满足微流控芯片上多反应腔同时检测的需求。同时,以pUC-18人工质粒DNA作为标准品,开展了微流控荧光PCR生物实验,对系统性能进行验证。实验结果表明:微流控PCR反应腔的DNA浓度变化与荧光信号的变化相一致,pUC-1 8样品的检测限达到0.05pg/uL,扩增效率为97.28%,熔解曲线显示无引物二聚体产生,特异性好,达到了商业化仪器的水平。
- 吴晓松李志刚朱灿灿赵俊刘勇朱灵
- 关键词：微流控芯片荧光检测DNA检测
- 一种制备磁性纳米氨基复合物的方法、以及核酸提取方法
- 本发明公开了一种制备磁性纳米氨基复合物的方法、以及核酸提取方法，包括如下步骤：步骤1、硅藻土纯化备用；清洗后将硅藻土放入烧瓶中，并加入去离子水；搅拌后静置，将上层清液分样离心，收集沉淀物用乙醇代替去离子水重复上述步骤，以...
- 杨柯朱灵朱灿灿段静波赵俊汪磊王贻坤邓国庆刘勇
- 文献传递
