王金凤
- 作品数：7 被引量：23H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院作物科学研究所更多>>
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- 相关领域：农业科学更多>>
- 转PvPGIP2基因小麦的获得与纹枯病抗性鉴定被引量：4
- 2013年
- 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)是一种植物防卫蛋白,可阻止一些病原真菌的侵害。本研究克隆出扁豆PvP-GIP2基因编码序列,构建了受玉米泛素(ubiquitin)启动子控制的PvPGIP2基因表达载体pA25-PvPGIP2;采用基因枪法将pA25-PvPGIP2转化小麦推广品种扬麦18幼胚愈伤组织4000块,获得了203株再生植株。PCR检测出阳性植株65株,转化率为1.625%。对转PvPGIP2基因小麦T1～T2植株,进行外源基因的PCR、RT-PCR、荧光定量RT-PCR(Q-RT-PCR)分析和小麦纹枯病抗性鉴定。结果表明,转入的PvPGIP2能够在转基因小麦中遗传、转录与表达;PvPGIP2基因的表达提高了转基因植株对小麦纹枯病的抗性。
- 王金凤李钊杜丽璞黄素萍徐慧君冯斗张增艳
- 关键词：转基因小麦小麦纹枯病抗性
- 抗全蚀病的转PvPGIP2-TaLTP5双价基因小麦的创制及鉴定
- 2013年
- 【目的】全蚀病是小麦的毁灭性病害。创制转PvPGIP2和TaLTP5双价基因小麦,分析外源PvPGIP2和TaLTP5在转基因小麦中的遗传与表达情况,选育抗全蚀病的转基因小麦新种质。【方法】采用基因重组技术构建了PvPGIP2和TaLTP5双价表达转基因载体pA25-PvPGIP2-TaLTP5,利用基因枪介导法将该载体转入小麦品种扬麦18,采用PCR、RT-PCR与qRT-PCR方法分析转基因小麦T0—T4植株中目的基因及其表达量,并对T3和T4逐株进行全蚀病接种与抗性鉴定。【结果】创制并选育出稳定的抗全蚀病转PvPGIP2和TaLTP5小麦株系6个。PvPGIP2和TaLTP5能够在这6个转基因小麦株系中稳定遗传,并高水平表达。对转PvPGIP2和TaLTP5小麦的全蚀病抗性鉴定结果表明,与受体扬麦18相比,转PvPGIP2和TaLTP5小麦对全蚀病抗性明显提高。【结论】创制了转PvPGIP2和TaLTP5抗全蚀病的小麦新种质,其对全蚀病具有一定的抗性。
- 荣玮王金凤李钊王爱云杜丽璞叶兴国魏学宁张增艳
- 关键词：小麦双价基因全蚀病转基因
- 抗病转PgPGIP1基因小麦的培育方法
- 本发明公开了抗病转PgPGIP1基因小麦的培育方法。本发明提供的方法，是将PgPGIP1蛋白的编码基因导入目的植物中，得到抗病性高于所述目的植物的转基因植物；所述PgPGIP1蛋白是如下(a)或(b)：(a)由序列表中序...
- 张增艳杜丽璞徐慧君王金凤李钊杨丽华王鹏
- 植物防卫基因PvPGIP2和TaLTP4的克隆及其对小麦的转化被引量：3
- 2011年
- 多聚半乳糖酸醛酶抑制蛋白和脂质转移酶蛋白是植物产生的防卫蛋白,对植物病原真菌具有防御作用。本研究利用同源基因克隆策略和RT-PCR技术,成功克隆了1个菜豆的多聚半乳糖酸醛酶抑制蛋白(PvPGIP2)编码基因和1个小麦的脂质转移蛋白(TaLTP4)编码基因;由于它们在功能上具有协同作用,我们以pAHC25为骨架构建了PvPGIP2和TaLTP4基因双价表达载体,对该双价表达载体进行菌落PCR筛选、限制酶消化鉴定和测序分析,结果表明构建的PvPGIP2和TaLTP4双价基因表达载体是成功的,该载体包含PvPGIP2表达盒和TaLTP4表达盒,分别受玉米泛素基因(Ubiqiutin)启动子的驱动,选用来源于Ti质粒中胭脂碱合成酶基因的终止序列作为终止子(Tnos)。采用基因枪法轰击小麦品种扬麦18成熟胚愈伤组织2000枚,经过2次Bialaphos筛选,最终获得扬麦18再生植株112株,利用表达载体基因的特异引物对上述成活的转化植株进行PCR检测,获得PvPGIP2和TaLTP4均为阳性的植株12株,转化率为0.6%。
- 李钊王金凤庄洪涛蒋雯叶兴国李斯深张增艳
- 关键词：小麦菜豆基因克隆
- 抗病转PgPGIP1基因小麦的培育方法
- 本发明公开了抗病转PgPGIP1基因小麦的培育方法。本发明提供的方法，是将PgPGIP1蛋白的编码基因导入目的植物中，得到抗病性高于所述目的植物的转基因植物；所述PgPGIP1蛋白是如下(a)或(b)：(a)由序列表中序...
- 张增艳杜丽璞徐慧君王金凤李钊杨丽华王鹏
- 文献传递
- 抗纹枯病、根腐病的转SN1基因小麦的获得与鉴定被引量：13
- 2012年
- SN1是源于马铃薯的一种抗菌肽,可以抑制多种植物病原菌的生长。小麦纹枯病(主要病原菌为禾谷丝核菌Rhizoctonia cerealis)和根腐病(主要病原菌为平脐蠕孢菌Bipolaris sorokiniana)是小麦的主要土传真菌病害。本研究利用基因工程技术构建了SN1基因的单子叶植物表达载体pA25-SN1,它受玉米泛素(ubiquitin)启动子的控制;采用基因枪法将pA25-SN1转化小麦推广品种扬麦18幼胚愈伤组织4000块,获得203株再生植株,通过PCR检测出阳性植株55株,转化率为1.38%。对外源SN1转基因小麦T0～T2代植株,进行目标基因的PCR、Southern blot、RT-PCR、荧光定量RT-PCR(Q-RT-PCR)分析和小麦纹枯病菌与根腐病菌接种及其抗病性鉴定。结果表明,转入的SN1基因已经整合到转基因小麦的基因组中,能够在转基因小麦中遗传、转录与表达。SN1基因的表达提高了转基因植株对小麦纹枯病和根腐病的抗性,其抗病性可以遗传。
- 王金凤杜丽璞李钊黄素萍叶兴国冯斗张增艳
- 关键词：转基因小麦小麦纹枯病菌小麦根腐病菌抗性
- 抗全蚀病、根腐病的转PgPGIP1基因小麦的获得与鉴定被引量：4
- 2013年
- 全蚀病和根腐病是小麦(Triticum aestivum)重要的土传真菌病害。PgPGIP1是人参(Panax ginseng)的一种多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白,可以抑制部分病原真菌分泌的多聚半乳糖醛酸酶的活性。本研究人工合成了PgPGIP1基因,并构建PgPGIP1基因的单子叶植物表达载体pA25-PgPGIP1,通过基因枪介导法将其转入小麦品种扬麦18中。对转PgPGIP1基因的T0至T4代植株进行PCR、RT-PCR和Q-RT-PCR分析,并对其全蚀病和根腐病抗性进行鉴定。结果表明,PgPGIP1基因能够在4个转基因小麦株系中遗传、转录与表达。与未转基因的小麦扬麦18相比,4个转基因小麦株系对全蚀病与根腐病的抗性明显提高,说明PgPGIP1表达增强了转基因小麦对全蚀病与根腐病的抗性。
- 杨丽华王金凤杜丽璞徐惠君魏学宁李钊马翎健张增艳
- 关键词：转基因小麦全蚀病根腐病抗性
