Wnt3a蛋白诱导BMSC定向分化并促进大鼠创面修复的实验研究 被引量:3 2018年 目的在细胞水平和动物模型整体层面观察Wnt3a诱导BMSCs定向分化并促进大鼠皮肤软组织缺损创面修复的过程。方法选取清洁级SD大鼠80只,雄性,3周龄,体重40~50g。全骨髓贴壁分离法获取大鼠骨髓来源间充质干细胞,所获取细胞经免疫荧光染色鉴定为干细胞。体外扩增后分为对照组及Wnt3a组,对照组用普通DMEM培养基培养,Wnt3a组以DMEM+Wnt3a信号通路激动剂Wnt3a(终浓度为200μg/L)培养。分别通过qRT-PCR和免疫荧光检测血管内皮细胞,周细胞及平滑肌细胞相关标志物的表达,验证Wnt3a在体外对BMSCs的诱导分化作用,并利用大鼠全层皮肤缺损模型作为研究对象,观察BMSC与Wnt3a联合应用对创面修复的促进作用。结果 RT-PCR的结果显示,Wnt3a组在加入Wnt3a激动剂培养7d以后,BMSCs的干细胞相关分子Klf4,Oct4表达水平相比对照组有相应下降(0.732±0.048,0.591±0.097,倍比数,P<0.001),证实BMSCs发生了相应的分化行为。其中NG2、VEGF、CD31及α-SMA在Wnt3a组mRNA表达显著增高(P<0.001)。整体动物水平,BMSC+Wnt3a联合应用组大鼠创面愈合率、肉芽组织形成及评分、创面成熟度及再血管化程度均高于空白对照组(P<0.001)。RT-PCR结果显示代表创面修复所需关键细胞的标志物(NG2、VEGF、CD31及α-SMA)mRNA表达水平明显高于空白对照组(P<0.01)。结论本研究通过体外及体内实验证实,利用Wnt信号途径激动剂的经典蛋白Wnt3a与BMSC共培养,能够提高干细胞活性,发挥其再生特性,并能够诱导前者定向分化为皮肤修复相关的关键细胞,因而加速肉芽组织重建和再生,最终促进创面愈合,为临床上BMSCs移植修复大面积皮肤软组织缺损提供了新的思路。 曹华平 叶涛 李永忠 喻璐 闵华关键词:软组织缺损 蛋白 定向分化 创面修复 中药外洗方合康复锻炼治疗膝骨性关节炎的临床疗效观察 被引量:1 2021年 膝骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)是临床常见的老年退变性疾病,具有起病隐匿,进展缓慢特点,主要与滑膜、软骨变性,关节下骨及半月板等结构破坏有关,后期新骨甚至游离体形成,导致疼痛、畸形、关节弹响及行走障碍[1]。KOA在60岁以上的发病率约为20%[2]。原发性患者病因不明确,继发性者可能与先天性关节畸形、既往创伤、其他内科疾病等相关[3]。疼痛是促使患者就医的主要因素[4],尤其对于KOA患者来说,疼痛发作时可以显著降低其生活质量和影响患者情绪[5]。笔者临床应用发现中药外洗方合康复锻炼可以显著改善KOA患者的疼痛及膝关节功能状况,现报道如下。 叶涛 王思乐 林华 李玉莲 李永忠 喻璐 胡华明 吴煌 闵华关键词:康复锻炼 中药外洗方 关节弹响 关节畸形 退变性疾病 游离体 简易乳胶环改良造口术治疗前庭大腺囊(脓)肿的疗效分析 被引量:4 2015年 目的:探讨简易乳胶环改良造口术治疗前庭大腺囊(脓)肿的疗效。方法:对145例前庭大腺囊(脓)肿患者随机分为两组,75例行简易乳胶环改良造口术的患者为观察组,70例行传统造口术的患者为对照组,比较两种手术方式的手术时间、术中出血量、1%利多卡因用量及复发率。结果:观察组与对照组相比,手术时间短(8.3±1.3分钟vs 13.2±1.7分钟)、术中出血量少(11.9±2.0ml vs 23.7±4.6ml)、1%利多卡因用量少(8.6±1.0ml vs 12.5±1.6ml),差异均有统计学意义(P<0.01)。复发率两组相似(1.3%与2.9%)(P>0.05)。结论:简易乳胶环行改良造口术治疗前庭大腺囊(脓)肿的效果优于传统造口术。 梅泉 李晓兰 谢环 田洁 闵华关键词:前庭大腺 囊肿 脓肿 造口术