刘君
- 作品数：56 被引量：39H指数：4
- 供职机构：中国科学院天津工业生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国科学院“百人计划”天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程农业科学更多>>
- 一株高效利用二氧化碳电合成甲酸的希瓦氏工程菌及构建方法
- 本发明涉及一种高效利用电能驱动CO<Sub>2</Sub>合成甲酸的希瓦氏基因工程菌及其构建方法与应用。所述基因工程菌敲除基因So_3920‑So_3921，So_1776‑So_1778，同时强化表达基因基因So_45...
- 刘君王太林徐宁
- 一种代谢工程改造谷氨酸棒杆菌高产L-半胱氨酸的方法
- 本发明所提供的一种代谢工程改造谷氨酸棒杆菌高产L‑半胱氨酸的方法。首先通过敲除L‑半胱氨酸脱巯基酶基因aecD，同时过表达自身的丝氨酸乙酰转移酶基因cysE，获得L‑半胱氨酸积累菌株；然后分别过表达大肠杆菌和拟南芥的丝氨...
- 刘君魏亮徐宁
- 文献传递
- 细菌Na^+/H^+逆向转运蛋白的研究进展被引量：5
- 2015年
- Na+/H+逆向转运蛋白在维持细胞内p H稳态、Na+离子动态平衡和调控细胞体积方面发挥着重要作用。目前,细菌中许多参与高盐或高碱性环境压力应答的Na+/H+逆向转运蛋白得到了鉴定和功能阐释。继续挖掘高效的Na+/H+逆向转运蛋白,深入探究Na+/H+逆向转运蛋白的分子机理,将为工业菌株或农作物的改良提供新的研究思路。本文以4种模式菌株为例,简要概述细菌Na+/H+逆向转运蛋白的种类和特征,同时对其结构和功能等方面也进行探讨。
- 徐宁程海娇刘清岱刘君马延和
- 关键词：NA+/H+逆向转运蛋白细菌
- 利用甘油生产γ-氨基丁酸的重组菌及其构建方法
- 本发明公开了一株利用甘油生产γ‑氨基丁酸的重组谷氨酸棒杆菌及其构建方法。首先通过对甘油促进蛋白基因glpF，甘油脱氢酶基因dhaD和二羟丙酮激酶基因dhaK进行RBS随机突变，获得可以高效利用甘油的谷氨酸棒杆菌突变菌株。...
- 刘君王一然徐宁
- 文献传递
- 一种酶活提高的谷氨酸脱羧酶突变体构建及其应用
- 本发明公开了一种酶活提高的谷氨酸脱羧酶突变体及其构建方法，属于基因工程领域。本发明将源于巨大芽孢杆菌谷氨酸脱羧酶编码基因进行定点饱和突变，通过高通量筛选得到酶活力提升突变体，突变体的第467位组氨酸突变成丝氨酸。本发明得...
- 刘君李梦雅徐宁
- 半胱氨酸单细胞生物传感器的构建及应用被引量：1
- 2018年
- 半胱氨酸是一种食品添加剂,被应用于食品的增色、增香以及抗氧化。单细胞生物传感器可以用于氨基酸(如苯丙氨酸,缬氨酸等)的快速检测,但有关半胱氨酸的单细胞生物传感器还没有被报道。本研究基于转录调控因子Ccd R,构建了荧光信号与半胱氨酸浓度相偶联的单细胞生物传感器,并对其线性范围进行了检测。在0 mmol/L至32 mmol/L的半胱氨酸浓度下,荧光信号强度与半胱氨酸浓度之间具有良好的线性关系。利用构建的半胱氨酸单细胞传感器,结合等离子诱变和流式细胞分选方法,从约5万株突变菌中筛选到两株半胱氨酸高产菌,其产量分别是野生型菌株的2.1倍和3.2倍。实验结果表明构建的单细胞生物传感器可以应用于半胱氨酸的快速检测及高产菌株的筛选。
- 刘川刘清岱徐宁周威刘君
- 关键词：半胱氨酸
- 半胱氨酸转运蛋白突变体及其在生产L-半胱氨酸中的应用
- 本发明综合利用随机突变、饱和突变和组合突变方法，得到了多种L‑半胱氨酸外排能力增强的转运蛋白EamB突变体，相对于野生的EamB转运蛋白，存在I83M、G156A、N157M、G156S、N157S中一个或多个突变。在具...
- 刘君刘光辉徐宁
- 文献传递
- α-酮戊二酸分离提取工艺的优化
- 2022年
- 运用全细胞催化法生产α-酮戊二酸的过程中,α-酮戊二酸生物转化液中含有残留底物、杂蛋白、有机杂酸和色素等杂质,用单一的分离方法不易去除。该文使用钙盐沉淀法结合离子交换法对α-酮戊二酸全细胞转化液进行分离纯化,将预处理后的料液酸化至pH=2.0,用Ca(OH)_(2)做沉淀剂沉淀α-酮戊二酸得到α-酮戊二酸钙,然后使用浓H_(2)SO_(4)处理α-酮戊二酸钙得到离子交换母液,经液相色谱检测,α-酮戊二酸的纯度从78.79%上升至93.66%。通过离子交换静态试验筛选出D301型树脂作为离子交换填料。动态上样最优参数为:高径比2.5∶1、上样质量浓度30 g/L、上样流速2.4 BV/h。最佳洗脱条件为:质量分数为0.02%的HCl溶液洗脱2个柱体积,流速4 BV/h,以质量分数为5%的NaOH溶液洗脱4个柱体积,流速2 BV/h,最终分离纯化处理后的总收率为80.32%,纯度为97.32%。
- 杨雪晨付绍平王丽霞徐宁徐超刘光辉马振平刘君
- 关键词：Α-酮戊二酸离子交换大孔树脂
- 谷氨酸棒杆菌中L-半胱氨酸外排蛋白的鉴定及应用
- 2023年
- L-半胱氨酸是一种重要的含硫氨基酸,被广泛应用于食品,医药,化妆品等行业。有效的外排蛋白不仅可以降低反馈抑制和细胞毒性,还能提高菌体的生产能力。在细胞工厂的构建中发挥重要作用。该研究基于转录组测序分析,在谷氨酸棒杆菌中发现一种新的L-半胱氨酸外排蛋白Cg1298-Cg1299。当添加7.5 mmol/L L-半胱氨酸时,cg1298-cg1299缺失菌株的生长比对照菌株降低了约24.2%,而回补菌株恢复了对半胱氨酸的抗性。利用Cys-Tyr二肽进一步检测Cg1298-Cg1299对半胱氨酸的外排能力,发现cg1298-cg1299双敲菌株的L-半胱氨酸外排能力下降了26.3%。最后,在L-半胱氨酸底盘菌中过表达cg1298-cg1299使得L-半胱氨酸产量提高17.1%。综上所述,Cg1298-Cg1299是谷氨酸棒杆菌中一种新的L-半胱氨酸外排蛋白,其显著增强了谷氨酸棒杆菌对L-半胱氨酸的耐受性,并提高了L-半胱氨酸的生产能力,为将来构建高产L-半胱氨酸的细胞工厂提供了一个有效靶点。
- 乔晋芳杜焕敏刘川祁玉婷吴硕徐宁戴玉杰邵丽刘君
- 关键词：L-半胱氨酸谷氨酸棒杆菌
- 可控高突变率谷氨酸棒杆菌工程菌构建及在抗逆育种中应用
- 本发明公开了一种具有可控高突变率的谷氨酸棒杆菌及其应用。利用基因工程方法敲除或敲降了谷氨酸棒杆菌出发菌中的nucS或/和xpb或/和tagI基因，进一步过表达dinP基因，能够有效提高谷氨酸棒杆菌的自然突变频率，有助于实...
- 刘君徐宁
