以脱脂马齿苋籽粕为原料,提取率为考察指标,通过单因素和正交优化试验确定碱溶酸沉法制备马齿苋籽粕蛋白的最优工艺条件;使用蛋白层析仪通过阴离子交换层析对粗蛋白进行初步分离纯化。结果表明:马齿苋籽粕蛋白最优提取工艺为,液料比25∶1、p H值12、温度50℃、时间20 min,马齿苋籽粕蛋白提取率达56.04%,蛋白含量(以蛋白质含量计)达58.53%;马齿苋籽粕蛋白等电点为4.0;最优纯化工艺为,上样量3 m L、洗脱液流速0.4 m L/min,纯化后马齿苋籽粕蛋白含量达91.02%,比纯化前提高了32.49%。