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用于原核表达系统表达外源蛋白的复合自动诱导培养基: 本发明公开了一种用于原核表达系统表达外源蛋白的复合自动诱导培养基，每升培养基中含有以下重量的各组分：胰蛋白胨10-40g，酵母提取物5-20g，六水琥珀酸钠0-8.1g，二水柠檬酸钠0-1.5g，甘油15-50g，葡萄糖...; 王云峰童光志徐灵龙石星明王玫; 文献传递

抗菌肽CAP18在大肠杆菌中表达、纯化及活性的初步鉴定被引量：2: 2008年; 根据抗菌肽CAP18活性片段的氨基酸序列,采用SOE技术,设计合成了CAP18的编码基因,将其克隆至pMD18-T载体,进行序列测定后亚克隆至pET-32a(+)表达载体中,在E.coli BL21(DE3)中表达融合蛋白CAP18。经Ni2+亲和层析后回收CAP18融合蛋白,纯度达到了85%以上。对纯化的融合蛋白进行酶切,用液体生长抑制方法检测切割后样品的活性,结果表明重组抗菌肽CAP18对大肠杆菌具有抑制活性。; 徐灵龙石星明王云峰史春林王玫孙妍童光志; 关键词：融合基因抑菌活性

共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒部分生物学特性测定被引量：2: 2007年; 将共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒(rFPV-IFNγS1)接种4周龄SPF鸡,免疫3周后用异源病毒LSC99I株攻击,考察重组疫苗对异源病毒攻击的保护作用。结果显示,疫苗接种后,免疫鸡血清中很快出现抗体;外周血中CD4+和CD8+T淋巴细胞的百分含量略高于非免疫对照组,但这种差异并不显著。LSC99I株IB病毒攻击后的保护率结果表明,免疫组的发病率为50%(5/10),死亡率为20%(2/10),非免疫对照组的发病率为100%(10/10),死亡率为50%(5/10);另外免疫鸡的病理损伤程度与非免疫对照组相比,二者差异不明显,在排毒时间和排毒量上也没有明显变化。体重分析结果显示,攻毒前免疫组与对照组相比,体重均没有显著变化,但攻毒后免疫组鸡体重增长的幅度要高于非免疫对照组。从以上结果可以说明,重组疫苗虽然能在动物体内很好地表达,但不能对实验动物产生很好的保护作用,而鸡干扰素-γ基因能在动物体内表达并发挥其免疫调节作用,减轻了重组疫苗对体重增长的影响。; 王云峰石星明王玫刘胜旺童光志崔红玉木古丽徐灵龙何来贺笋葛俊伟李一经; 关键词：传染性支气管炎重组鸡痘病毒干扰素-Γ S1蛋白

鸡传染性支气管重组鸡痘病毒基因工程疫苗对异源LHB株病毒攻击的免疫保护: rFPV-IFNγS1是一株共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒,将其接种SPF鸡3周后,用传染性支气管管炎病毒异源毒株攻击,考察重组疫苗对异源毒株攻击的保护作用.结果显示,疫苗接种后,免疫鸡...; 石星明王云峰王玫刘胜旺童光志徐灵龙贺笋; 关键词：重组鸡痘病毒 S1蛋白基因工程疫苗; 文献传递

表达鸡新城疫病毒F、HN基因和传染性喉气管炎病毒gB基因的重组鸡痘病毒的构建及其特性研究被引量：5: 2006年; 利用同源重组将新城疫病毒(NDV)的F和HN基因、传染性喉气管炎病毒(ILTV)的gB基因以及报告基因LacZ插入鸡痘病毒(FPV)的017株的复制非必需区,其中NDV的F、HN基因、ILTV的gB基因以及报告基因LacZ是在早晚期启动子LP2EP2的控制下,大肠杆菌报告基因LacZ在晚期启动子P11的控制下。经过10轮蓝斑纯化获得了包含了NDV的F和HN基因、ILTV的gB基因以及报告基因LacZ的重组鸡痘病毒,称为rFPV-F/HN/gB/LacZ。经PCR方法证明rFPV-F/HN/gB/LacZ基因组中含有NDV的F基因、HN基因和ILTVgB基因;间接免疫荧光试验和Western-blot试验表明NDV的F、HN蛋白和ILTVgB蛋白在rFPV-F/HN/gB/LacZ感染的CEF细胞中获得表达。与亲本毒相比,重组病毒在病毒的复制和致鸡胚成纤维细胞的病变方面无显著不同。这证明了在鸡痘病毒载体的一个复制非必需区可以同时插入多个禽类病原的多个外源基因,为制备多价基因工程疫苗奠定了基础。; 孙惠玲王云峰苗得园张培君智海东徐灵龙王玫童光志汪明; 关键词：重组鸡痘病毒新城疫病毒传染性喉气管炎病毒 F基因 HN基因 GB基因

用于原核表达系统表达外源蛋白的复合自动诱导培养基: 本发明公开了一种用于原核表达系统表达外源蛋白的复合自动诱导培养基，每升培养基中含有以下重量的各组分：胰蛋白胨10－40g，酵母提取物5－20g，六水琥珀酸钠0－8.1g，二水柠檬酸钠0－1.5g，甘油15－50g，葡萄糖...; 王云峰童光志徐灵龙石星明王玫; 文献传递

表达传染性喉气管炎病毒gB基因重组鸡痘病毒与表达禽流感病毒HA和NA基因重组鸡痘病毒联合免疫对疫苗免疫效果的影响: 在中国,禽流感重组鸡痘病毒疫苗(H5N1)和传染性喉气管炎重组鸡痘病毒疫苗已经得到中华人民共和国的批准,开始进行商业化生产,用于临床H5N1亚型禽流感、传染性喉气管炎和鸡痘的免疫预防,两种疫苗同时在临床上推广应用要求制定...; 王云峰童光志石星明王玫杨春富徐灵龙; 关键词：喉气管炎病毒鸡痘病毒禽流感病毒HA; 文献传递

抗菌肽及其功能研究被引量：32: 2007年; 抗菌肽是近年来发现的广泛存在于自然界的一类阳离子抗菌活性肽,越来越多的证据表明它们在宿主先天性免疫和适应性免疫中有着重要的作用。对抗菌肽的研究正不断深入。先从抗菌肽研究的历史背景出发,简要介绍了抗菌肽的特性;然后从抗菌肽的直接抗菌活性和免疫调节功能这两个方面重点阐述其在宿主防御过程中的作用,最后对抗菌肽的临床应用及前景作了概述。; 徐灵龙王云峰石星明童光志; 关键词：抗菌活性免疫调节

规模化猪场母猪群PRV抗体血清学调查被引量：13: 2010年; 采用美国IDEXX公司生产的Herdchek PRV gI抗体检测试剂盒和HerdChek PRV gB抗体检测试剂盒对来自于20个种猪场母猪群的血清分别进行野毒抗体和免疫抗体检测。结果显示,有10个猪场的样品均为野毒阴性或野毒感染率较低,其中7个场的PRV免疫抗体合格率均在90%以上,另外有两个场的抗体合格率在80%以上。但对于野毒感染率均在10%以上另外10个场,有3个场由于高野毒阳性率(84%～100%)造成40倍稀释后免疫抗体仍然100%阳性,其余7个场样品阳性率都在20%～73%之间。从上面20个猪场的检测结果来看,管理良好的种猪群可以做到无野毒感染且免疫合格率达到90%以上。; 徐灵龙苗得园杜希珍舒翠莉徐慧斌; 关键词：规模化猪场母猪

猪繁殖与呼吸综合征病毒受体结合域的初步鉴定: 为确定猪繁殖与呼吸综合征病毒的唾液酸粘附素受体结合域,本文从全长水平、分段水平及结构域水平上将唾液酸粘附素分子进行转染PRRSV非允许细胞,结果发现第一个结构域单独可以介导病毒的吸附。在此基础上原核表达了该结构域并制备兔...; 安同庆周艳君贺云霞田志军徐灵龙仇华吉王云峰童光志; 文献传递

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徐灵龙