薛春旭
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
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- 海洋细菌Pseudoalteromonas sp.NJ631胶原蛋白酶的克隆与表达
- 2016年
- 对交替假单胞菌Pseudoalteromonas sp.NJ631基因组中潜在的胶原蛋白酶基因进行克隆与表达,并鉴定重组蛋白PNJC的酶活力。根据NJ631基因组序列草图,利用基因组信息发掘方法获得胶原蛋白酶功能提示的编码基因,进而利用高效表达质粒p ET28a构建重组表达系统。经IPTG诱导表达、亲和层析纯化获得重组蛋白纯化产物。以不溶性Ⅰ型胶原蛋白为底物,测定胶原蛋白酶酶活力。对Pseudoalteromonas sp.NJ631基因组信息挖掘,从中发现一条疑似编码胶原蛋白酶的基因序列,命名为Pnjc。该基因全长1 359 bp,GC含量45.62%,编码由452个氨基酸残基组成的约51 000大小的胶原蛋白酶。SDS-PAGE检测表明,胶原蛋白酶PNJC在0.2 mmol/L的IPTG诱导下得到高效表达。经过亲和层析获得纯化重组蛋白PNJC,蛋白质质量浓度约为1 mg/m L。酶活检测表明,PNJC的酶活力为160.34 U/mg,为标准品的70.48%。PNJC高酶活力表明,Pseudoalteromonas sp.NJ631来源的胶原蛋白酶具有重要的研究价值与工业开发潜力。
- 薛春旭陈威周宇芳朱鹏
- 关键词：交替假单胞菌胶原蛋白酶
- 一种胶原蛋白酶高产海洋菌株
- 本发明的目的是提供一种胶原蛋白酶高产海洋菌株，保藏编号为CCTCC NO:M 2013682,并基于16S序列进行分子系统进化分析，鉴定该菌株属于Rheinheimera属,随后并采用响应面法对它的产酶条件进行了优化。首...
- 乔龙亮朱鹏党晨阳薛春旭严小军李颖宋燕燕
- 文献传递
- 一种胶原蛋白酶高产海洋菌株
- 本发明的目的是提供一种胶原蛋白酶高产海洋菌株，保藏编号为CCTCC？NO:M？2013682,并基于16S序列进行分子系统进化分析，鉴定该菌株属于Rheinheimera属,随后并采用响应面法对它的产酶条件进行了优化。首...
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- 文献传递
