胡蕊
- 作品数：5 被引量：1H指数：1
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- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 七氟烷通过激活GluN2B－ERK1／2信号通路抑制ADDLs神经毒性被引量：1
- 2015年
- 目的：探讨七氟烷对Aβ来源的扩散性配体（Aβ－derived diffusible ligands，ADDLs）神经毒性的影响，揭示七氟烷对阿尔茨海默病（Alzheimer disease， AD）损伤神经元的保护作用及其机制。方法体外培养2周的大鼠海马神经元随机分为4组：对照组、ADDLs 组、七氟烷组以及合用组。免疫印迹方法观察七氟烷及ADDLs对p －ERK1／2、NMDA受体各亚基表达、GluN2B 亚基的第172位酪氨酸磷酸化水平的影响；细胞组分分离方法探索七氟烷及 ADDLs 影响NMDA受体各亚基在细胞膜表面表达的规律；细胞免疫荧光化学方法检测七氟烷及AD－DLs对GluN2B 亚基在突触上表达水平的影响。结果1．5％七氟烷作用2h可显著恢复ADDLs降低的ERK1／2的活化水平；1．5％七氟烷处理2 h可显著逆转ADDLs降低的GluN1和GluN2B亚基在细胞膜表面表达的水平，但是对细胞膜表面 GluN2A的表达水平无明显影响，对NMDA受体各亚基总的表达水平无影响；细胞免疫荧光化学结果显示七氟烷可以显著增加ADDLs降低的GluN2B亚基在突触上的表达量。结论七氟烷通过激活GluN2B－ERK1／2信号通路抑制ADDLs的神经毒性。
- 郝景茹胡蕊胡秋梅高灿
- 关键词：七氟烷细胞外信号调节激酶1/2阿尔茨海默病
- 基于ADDLs与EphB2受体相互作用的阿尔茨海默病神经保护机制的研究
- 目的：本文旨在根据EphB2受体与ADDLs的结合位点,采用多肽阵列筛选出干扰二者结合的小肽,并验证其能否降低ADDLs的神经毒性,由此探索ADDLs通过EphB2受体影响NMDA受体功能的分子机制,以期为靶向ADDLs...
- 孙凯胡蕊石小东郝景茹孙楠高灿
- 关键词：阿尔茨海默病学习记忆
- 甲醛交联法研究高温条件下大肠杆菌体内小分子热休克蛋白IbpB的客户蛋白
- 2015年
- 目的：研究高温条件下小分子热休克蛋白IbpB在大肠杆菌体内的客户蛋白以及在此温度下IbpB对其客户蛋白的作用。方法构建表达IbpB蛋白的重组质粒pBAD－ibpB，pBAD质粒为对照，转化到BW25113－ΔibpB菌株。转化pBAD－ibpB质粒的BW25113－ΔibpB菌株在45℃热处理之后加入甲醛进行交联，亲和层析法对交联产物进行纯化，质谱法对捕获的客户蛋白进行鉴定，过氧化氢酶活性测定和蛋白热聚集体分离的方法检测IbpB对其客户蛋白的作用。结果质谱鉴定结果表明IbpB在高温条件下互相作用的客户蛋白主要是过氧化氢酶KatG、色氨酸降解酶TnaA和延伸因子EF－Tu；在ibpB敲除株中回补IbpB可以减少过氧化氢酶在高温条件下的活性丧失，可以阻止TnaA和EF－Tu在高温条件下发生的热聚集。结论 KatG、TnaA和EF－Tu是IbpB在高温条件下相互作用的主要客户蛋白，IbpB在高温条件下对上述客户蛋白具有明显的保护作用。
- 石小东胡蕊胡秋梅
- 关键词：小分子热休克蛋白
- 小鼠受体酪氨酸激酶EphB2 FN结构域在大肠杆菌中的表达与纯化
- 2015年
- 目的：将小鼠受体酪氨酸激酶EphB2 FN结构域在大肠杆菌细胞中进行表达与纯化，以便于研究与FN结构域相互作用的蛋白质。方法以重组质粒GV287－EphB2作为模板，经PCR扩增，得到FN结构域的cDNA片段，并将其克隆至pET－28a载体中。将重组质粒pET－28a－FN转化至大肠杆菌BL21（ DE3）感受态细胞，经IPTG诱导后，利用SDS－PAGE检测FN－His6融合蛋白的表达。最后采用Ni－NTA亲和层析法对该蛋白进行纯化。结果本研究成功地构建了FN结构域的原核表达载体。经鉴定，FN－His6融合蛋白能够在大肠杆菌中表达。纯化后，得到少量可溶性FN－His6融合蛋白。结论小鼠受体酪氨酸激酶EphB2 FN结构域可以在大肠杆菌中表达并纯化，为研究与FN结构域相互作用的蛋白奠定了实验基础。
- 石小东胡蕊高灿
- 关键词：EPHB2原核表达
- 鼠伤寒沙门菌小分子热休克蛋白AgsA的N与C末端在溶液中暴露比较
- 2016年
- 目的探讨鼠伤寒沙门菌小分子热休克蛋白AgsA的N末端在其寡聚体中所处的位置,为临床治疗提供参考依据。方法通过分别在小分子热休克蛋白AgsA的N、C末端添加多聚组氨酸标签(His-tag),检测二者与镍螯合琼脂糖凝胶(Ni-NTA Agarose)的结合能力,比较目标蛋白的N、C末端在溶液中的暴露情况。结果 Histag的添加既不影响AgsA蛋白的寡聚状态,也不影响其类分子伴侣活性;通过比较分别在N、C末端添加Histag的AgsA蛋白与Ni-NTA Agarose的结合能力,发现AgsA蛋白的C末端在溶液中的暴露情况远大于其N末端。结论 AgsA-N-His6与Ni-NTA Agarose的结合能力远远小于AgsA-C-His6,暗示了AgsA蛋白的N末端被包裹在其寡聚体内部。
- 石小东胡蕊胡秋梅孙晓玉林晓天
- 关键词：寡聚体
