王建科
- 作品数：11 被引量：26H指数：2
- 供职机构：中国科学院西北高原生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金青海省科技计划项目青海省科技厅应用基础研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 柴达木枸杞离体快繁苗的移栽方法
- 本发明涉及一种柴达木枸杞离体快繁苗的移栽方法，该方法包括以下步骤：⑴将生根培养基中生长10~14天、根发育良好的柴达木枸杞再生植株从生根培养基中取出，然后用室温下的自来水清洗去根部附着的培养基，得到洁净再生植株；⑵将洁净...
- 王莉李毅任刚胡延萍王溪王建科石琳冯承彬唐楠
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- 一种离体条件下柴达木枸杞不定苗诱导的方法
- 本发明涉及一种离体条件下柴达木枸杞不定苗诱导的方法，该方法包括以下步骤：⑴每年5~7月份取柴达木枸杞优株上的当年生嫩枝，并将叶片去除，用流水冲洗干净后，将枝条剪段后漂洗、消毒即得无菌茎段；⑵将无菌茎段作为外植体接种在预培...
- 王莉李毅胡延萍石琳王溪王建科冯承彬唐楠
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- 柴达木枸杞离体快繁苗的移栽方法
- 本发明涉及一种柴达木枸杞离体快繁苗的移栽方法，该方法包括以下步骤：⑴将生根培养基中生长10~14天、根发育良好的柴达木枸杞再生植株从生根培养基中取出，然后用室温下的自来水清洗去根部附着的培养基，得到洁净再生植株；⑵将洁净...
- 王莉李毅任刚胡延萍王溪王建科石琳冯承彬唐楠
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- 柴达木枸杞优质种苗离体微扦插快速繁殖方法
- 本发明涉及一种柴达木枸杞优质种苗离体微扦插快速繁殖方法，该方法包括以下步骤：⑴将所获得的柴达木枸杞不定苗进行单株分离后，转接到一级苗生长培养基中培养，10~14天后即得一级苗；⑵将一级苗剪切成段后转接到二级苗培养基中培养...
- 王莉李毅任刚胡延萍石琳王溪王建科冯承彬唐楠
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- 水葫芦苗ISSR-PCR体系的优化与引物筛选被引量：2
- 2017年
- 以改良CTAB法提取水葫芦苗基因组DNA为模板,利用正交设计试验对影响ISSR-PCR反应体系的5个因素(TaqDNA聚合酶,dNTP,引物,模板及Mg^(2+))进行了优化筛选。经极差分析和方差分析,最终建立了水葫芦苗ISSR-PCR的最佳反应体系。结果表明,总体积20μL的反应体系中各因素浓度分别为:TaqDNA聚合酶0.025 U/μL、Mg^(2+)1.5 mmol/L、dNTP 1.0 mmol/L、引物0.5μmol/L、模板DNA 1.5 ng/μL。通过筛选得到10条扩增条带清晰的ISSR引物,并通过梯度PCR确定了各引物的最适退火温度。在此基础上对循环次数进行优化,最终确定最佳循环次数为40次。
- 王建科李毅李毅胡延萍石琳王莉
- 关键词：ISSR-PCR正交设计
- 一种离体条件下柴达木枸杞不定苗诱导的方法
- 本发明涉及一种离体条件下柴达木枸杞不定苗诱导的方法，该方法包括以下步骤：⑴每年5~7月份取柴达木枸杞优株上的当年生嫩枝，并将叶片去除，用流水冲洗干净后，将枝条剪段后漂洗、消毒即得无菌茎段；⑵将无菌茎段作为外植体接种在预培...
- 王莉李毅胡延萍石琳王溪王建科冯承彬唐楠
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- 云生毛茛ISSR-PCR体系优化与引物筛选被引量：8
- 2016年
- 旨在建立稳定可靠的云生毛茛ISSR-PCR反应体系。采用正交试验设计方法,对影响云生毛茛ISSR-PCR扩增结果的Mg2+、d NTP、Taq DNA聚合酶、引物、模板DNA五个因素进行优化筛选,对反应程序进行优化,建立适用于云生毛茛的最佳反应体系和扩增程序,并对反应体系和扩增程序进行验证;在此基础上筛选多态性好的ISSR引物,采用梯度法筛选各个引物的最适退火温度。结果表明,云生毛茛20μL ISSR-PCR的最佳反应体系为:模板DNA 30 ng,Mg2+1.95 mmol/L,Taq DNA聚合酶0.04U/μL,d NTP 0.150 mmol/L,引物0.5μmol/L;最佳反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性20 s,49.6-60.6℃复性1 min,72℃延伸100 s,38个循环;72℃下延伸6 min。在优化的反应体系和反应程序条件下,从100条ISSR引物中筛选获得16条ISSR扩增引物,并确定了引物各自的最适退火温度。经过不同居群云生毛茛的验证,证明优化后体系扩增条带清晰且重复性好,可用于后续云生毛茛遗传多样性的研究。
- 石琳胡延萍王建科王钧许小宁李毅王莉
- 关键词：ISSR-PCR正交实验设计引物筛选
- 青藏高原珍稀藏药水母雪莲药材DNA微量提取方法优化被引量：2
- 2016年
- 本研究采用改良CTAB法、改良SDS法、高盐低p H法提取自然风干的水母雪莲植株的基因组DNA,并对提取方法进行优化筛选出适合于水母雪莲药材DNA的提取方法。研究表明改良CTAB(CTAB浓度为2%,PVP浓度为1%,β-巯基乙醇浓度为2%)法所提取的基因组DNA得率较高,且使用氯仿/异戊醇抽提两次时提取出的DNA质量较好,能够满足ISSR分析要求。在此基础上对实验材料进行预处理,优化获得了完全适用于水母雪莲风干药材DNA提取的一整套提取流程。该方法能够有效去除次生代谢产物对DNA提取的影响,且对原材料消耗较少,可以应用于后续水母雪莲种质资源鉴定和遗传多样性分析。
- 王钧胡延萍王建科石琳杨文韬杨文韬李毅
- 关键词：水母雪莲改良CTAB法前处理
- 水母雪莲ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选被引量：1
- 2016年
- 目的优化并建立适合于水母雪莲的ISSR-PCR反应体系并筛选出稳定的ISSR引物。方法采用L16(45)正交设计方法,以Taq DNA聚合酶浓度、d NTP浓度、模板DNA浓度、引物浓度、Mg^(2+)浓度5种因素4个水平对水母雪莲ISSRPCR反应体系进行优化;并对反应体系进行验证。采用优化后的反应体系筛选出条带清晰且稳定的ISSR引物,通过退火温度梯度试验确定最佳退火温度。结果最终确立了水母雪莲20μl ISSR-PCR最佳反应体系,即包含Taq DNA聚合酶0.7U、d NTP 0.125mmol/L、引物0.3μmol/L、模板DNA 40ng、Mg^(2+)1.5mmol/L。在此基础上,从84条ISSR引物中筛选出条带清晰且稳定的8条引物,并通过梯度PCR反应确定最佳退火温度。结论经过11份水母雪莲种质验证,证明所建立的体系稳定可靠,可用于后续水母雪莲遗传多样性分析和种质资源鉴定。
- 王钧王建科石琳胡延萍杨文韬李毅王莉
- 关键词：水母雪莲ISSR-PCR正交设计引物筛选
- 紫花苜蓿种子萌发过程中对不同盐胁迫的响应被引量：14
- 2018年
- 本试验以6种盐溶液(NaCl,Na_2SO_4,KCl,K_2SO_4,CaCl_2,NaHCO_3)对紫花苜蓿种子进行胁迫处理,研究不同盐胁迫下紫花苜蓿种子的发芽率、发芽指数、平均发芽时间、盐害率及根长抑制率的差异。结果显示,紫花苜蓿种子的发芽率、发芽指数随盐溶液浓度增加而降低;平均发芽时间、盐害率和根长抑制率随盐浓度的升高而增加。通过分析得出紫花苜蓿种子发芽过程中对不同盐胁迫的响应浓度分别为:NaCl 25 mmol/L,K_2SO_450 mmol/L,CaCl_2100 mmol/L;耐盐极限浓度分别为:NaCl 190.97 mmol/L,Na_2SO_492.84 mmol/L,KCl353.86 mmol/L,K_2SO_4160.68 mmol/L,CaCl2260.55 mmol/L,NaHCO_3114.77 mmol/L。紫花苜蓿种子萌发过程中对不同盐分胁迫的耐受性大小依次为:NaHCO)3>Na_2SO_4>K_2SO_4>NaCl>KCl>CaCl_2。
- 王建科王钧王钧李毅胡延萍李毅
- 关键词：紫花苜蓿盐胁迫种子萌发发芽率发芽指数
