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夏南松

作品数:1 被引量:0H指数:0
供职机构:上海交通大学医学院生物化学与分子细胞生物学系更多>>
相关领域:生物学更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇周期
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞周期
  • 1篇SUMO化修...

机构

  • 1篇上海交通大学

作者

  • 1篇左勇
  • 1篇李艳
  • 1篇夏南松

传媒

  • 1篇徐州医学院学...

年份

  • 1篇2015
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
Kif18A的SUMO化修饰及其调控机制
2015年
目的:探讨Kif18A的 SUMO化修饰及其调控机制。方法在 HEK293T 细胞中共转染Flag-Kif18A、HA -SUMO1或 His -SUMO1质粒,免疫沉淀富集Flag -Kif18A,免疫印迹检测HA -SUMO;用 TALON 树脂富集His-SUMO1蛋白,免疫印迹检测Flag -Kif18A考察Kif18A的 SUMO化水平。利用 SUMOsp 2.0软件预测Kif18A可能发生 SUMO化的潜在位点,将 Flag-Kif18A 质粒中的相应位点上的编码序列由Lys突变成 Arg,在HEK293T 细胞中表达突变体后再检测Kif18A的SUMO化水平的变化来确定Kif18A的 SUMO化位点。通过在HEK293T 细胞中共染转Flag -Kif18A、HA -SUMO1以及 SENP1野生型(WT)或SENP1酶活位点突变型(Mut)质粒,再采用免疫沉淀和免疫印迹检测Kif18A的SUMO化水平,来证明 SENP1是 Kif18A 的去 SUMO化蛋白酶。最后,用Nocodazole处理 HeLa 细胞,使其同步化在G2/M阶段,再考察G2/M期HeLa细胞中Kif18A的SUMO化水平。结果Kif18A 能被SUMO1或者 SUMO2修饰,K47和K148是Kif18A发生SUMO化的两个主要位点,SENP1催化Kif18A的去 SUMO化修饰。 HeLa细胞同步化在 G2/M期后,Kif18A的 SUMO化水平显著下降。结论Kif18A能发生SUMO化修饰,且其SUMO化受到细胞有丝分裂进程的调控。
李艳夏南松左勇
关键词:SUMO化修饰细胞周期
共1页<1>
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