潘畅
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 供职机构：中山大学生命科学学院更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 孟氏隐唇瓢虫气味结合蛋白ComOBP1基因的克隆和时空表达被引量：4
- 2016年
- 采用RT-PCR和RACE技术,从孟氏隐唇瓢虫Cryptolaemus montrouzieri Mulsant中成功克隆出气味结合蛋白(Com OBP1)基因的全序列(Genbank登陆号:KU170686)。Com OBP1基因全长922 bp,包括5'端长为40 bp的非编码区域(UTR),及3'端长为462 bp的UTR,开放阅读框ORF长为420 bp,编码139个氨基酸,预测的分子量为15.516 k Da,等电点p I为6.57,存在AATAAA加尾信号。N-末端疏水区包含由20个氨基酸构成的信号肽,无跨膜结构,有4个保守的半胱氨酸,属于Minus-C OBP,也是在孟氏隐唇瓢虫中发现的第一个Minus-C OBP。氨基酸序列中有且仅有一个N-糖基化位点为62 NLSA,并存在2个潜在的磷酸化位点。与其它昆虫的Minus-C OBPs进行同源性比较并构建系统发育树,发现与同为鞘翅目Coleoptera昆虫的同源性较高。利用Real-time PCR、RT-PCR技术对Cmon OBP1基因在孟氏隐唇瓢虫不同发育阶段,不同组织,不同营养条件及不同食性下的表达水平进行了测定,结果显示,Cmon OBP1基因在整个发育阶段均有表达,雄性成虫期具有最高表达量,且多在成虫的头部及翅部表达。当营养条件发生变化时,表达丰度不会发生变化,当猎物由天然猎物柑橘粉蚧Planococcus citri Risso变成碗豆修尾蚜Megoura japonica Matsumura时,表达量会明显下降。该结果表明,孟氏隐唇瓢虫的不同发育阶段、不同组织及猎物种类会影响Cmon OBP1基因的表达,从而进一步影响其嗅觉行为。同时,Cmon OBP1基因可能在雄虫相关的信息素感受过程中发挥着重要作用。
- 潘畅张宇宏谢佳沁李浩森庞虹
- 关键词：气味结合蛋白基因克隆
- 孟氏隐唇瓢虫qRT-PCR分析中内参基因的筛选被引量：4
- 2016年
- 选择合适的内参基因是qRT-PCR研究的关键。本文以孟氏隐唇瓢虫Cryptolaemus montrouzieri Mulsant为研究材料,利用qRT-PCR技术,对孟氏隐唇瓢虫4个候选内参基因Actin、RPS23、GAPDH和β-tubulin的mRNA的表达量进行了分析,并用Ge Norm、Norm Finder和Best Keeper软件分析它们在孟氏隐唇瓢虫不同发育阶段及成虫不同组织中的表达稳定性。结果表明,以成虫不同组织为材料时,综合三种软件分析结果显示4个候选基因表达稳定性平均等级值排名为RPS23(rank=1)>β-tubulin(rank=2.3)>GAPDH(rank=3)>Actin(rank=3.7),以不同发育时期虫体为材料时,综合分析结果显示4个候选内参基因表达稳定性平均等级值排名为RPS23(rank=1.7)>Actin(rank=2)>GAPDH(rank=2.7)>β-tubulin(rank=3.7)。综合分析在瓢虫不同发育阶段及成虫不同组织两种处理下,三种软件的评价效果,4个候选基因表达稳定性等级值的总平均排名为RPS23(rank=1.3)>Actin(rank=2.8)=GAPDH(rank=2.8)>β-tubulin(rank=3)。RPS23在瓢虫不同发育阶段及成虫不同组织中均显示出较高的表达稳定性及与其它基因之间极大的相关性,可以确定为孟氏隐唇虫不同发育阶段及成虫不同组织基因表达分析中一个稳定表达的基因,可作为单个内参基因或者其它内参基因的协同基因,本实验为开展孟氏隐唇瓢虫功能基因表达分析奠定了方法学基础。
- 潘畅张宇宏庞虹
- 关键词：QRT-PCR内参基因
- 孟氏隐唇瓢虫气味结合蛋白CmonOBP1和CmonOBP2基因的克隆和时空表达
- 孟氏隐唇瓢虫Cryptolaemus montrouzieri（Mulsant,1983）原产于澳大利亚,作为一种有效捕食性天敌瓢虫而被广泛引种到世界各地,在生物防治中具有广阔的应用开发前景。昆虫识别挥发性气味分子的灵敏...
- 潘畅
- 关键词：气味结合蛋白基因克隆
- 文献传递
- 孟氏隐唇瓢虫气味结合蛋白CmOBP基因的克隆与序列分析
- [目的]孟氏隐唇瓢虫Cryptolaemus montrouzieri Mulsant作为高效且被广泛使用的天敌昆虫,在粉蚧类害虫的综合治理上起到重要的作用.本研究克隆孟氏隐唇瓢虫嗅觉相关蛋白中的气味结合蛋白(OBP)的...
- 张宇宏谢佳沁潘畅李浩森郑基焕毛润乾庞虹
- 关键词：气味结合蛋白基因克隆
- 一种龟纹瓢虫人工饲养、保种和繁殖生产方法
- 本发明公开了一种龟纹瓢虫人工饲养、保种和繁殖生产方法。本发明选择出高效繁殖寄主蚜虫的寄主植物种类及蚜虫大量获得技术；龟纹瓢虫按其卵、幼虫、蛹和成虫四个发育阶段分期饲养，根据其生物、生态学特性而采用适宜饲养技术；试验研制了...
- 谢佳沁吴红胜潘畅张宇宏庞虹
- 文献传递
