杨慧敏
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
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- 促肾上腺皮质释放因子对HT-29细胞中Toll样受体4／核因子-κB信号通路的影响被引量：1
- 2011年
- 目的观察促肾上腺皮质释放因子（corticotrophin—releasing factor CRF）对结肠上皮细胞系HT-29细胞中Toll样受体（TLR）4／核因子（NF）-κB的表达调控作用。方法将HT-29细胞分为4组，正常对照组，脂多糖（LPS）组（LPS20μg／ml刺激24h），CRF组（CRF20ng／ml刺激24h），CRF＋LPS组（预先CRF孵育12h，更换细胞液后再与LPS孵育12h）。刺激结束后，RT—PCR法检测各组细胞中TLR4mRNA的表达，提取细胞总蛋白，免疫印迹法检测各组细胞中TLR4和NF-KBp65蛋白表达水平。收集上清液，ELISA法检测各组细胞上清液中IL-8的表达。结果LPS组TLR4 mRNA和蛋白表达水平为0．31±0．04和0．48±0．17，与正常对照组比较差异无统计学意义[0．28±0．02和0．45±0．12，t值分别=0．216和0．712，P值均〉0．05]，CRF组为1．05±0．06和1．08±0．21，与正常对照组相比明显增高（t值分别=3．721和3．802，P值均〈0．05），而CRF＋LPS组为1．68±0．05和1．81±0．18，更高于CRF组（t值分别=4．816和3．918，P值均〈0．05）。各组HT-29细胞中NF-κB p65蛋白表达水平和细胞上清液中IL-8表达水平，与TI。R4mRNA和蛋白表达水平结果一致。结论CRF不仅能直接刺激肠上皮细胞中TLR4／NF-κB通路活化，还可促进结肠上皮对LPS的反应增加，导致IL-8释放增多。
- 杨丽郑鹏远刘志强杨慧敏
- 关键词：促肾上腺皮质激素释放激素脂多糖类TOLL样受体4白细胞介素8
- TIM4对小鼠食物过敏模型中抗原特异性Th2细胞分化的影响被引量：2
- 2011年
- 目的:研究微生物产物对树突状细胞(dendriticcell,DC)和TIM4的作用,探讨在微生物产物参与的食物过敏(foodallergy,FA)中TIM4对CD4+T淋巴细胞分化的影响.方法:培养Balb/c小鼠骨髓来源的树突状细胞(bonemarrow-derived DC,BMDC),培养的DC分为两组:金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)刺激组和空白对照组,RT-PCR检测不同组DC的TIM4 mRNA表达;流式细胞仪检测DC表面CD11c、MHC-Ⅱ、CD86的表达.在DC和CD4+T淋巴细胞共同培养中将培养的DC分为5组:空白对照组、SEB+卵清蛋白(OVA)组、SEB组、OVA组及TIM4组,同时取过敏模型小鼠脾脏CD4+T淋巴细胞,不同组的DC与CD4+T淋巴细胞共同培养,ELISA法测定混合培养细胞上清液IL-4与IFN-γ的表达.结果:与空白对照组相比,SEB组DCTIM4 mRNA表达明显增高(0.941±0.018vs0.422±0.083,P<0.05),并具有剂量依从性.SEB组DC表面分子MHC-Ⅱ、CD86表达明显高于空白对照组(MHC-Ⅱ:76.684%±3.1803%vs52.984%±3.6026%;CD86:89.746%±2.113%vs67.558%±0.4341%,均P=0.000).DC和CD4+T淋巴细胞共同培养中,相比空白对照组,SEB+OVA组IL-4表达显著增高(295.834±20.408vs78.335±13.109,P<0.05),而IFN-γ的表达明显减少(362.109±92.271vs761.897±102.967,P<0.05);单独的SEB组或OVA组IL-4和IFN-γ与空白对照组无明显差异;TIM4组中IL-4的表达水平较SEB+OVA组明显降低,而IFN-γ的表达明显增高(90.511±15.500vs295.834±20.408;807.734±95.436vs362.109±92.271,均P<0.05).结论:微生物产物和食物抗原共同作用导致FA,TIM4参与FA的发生.消除TIM4的表达可明显抑制Th2细胞分化,有效纠正Th1/Th2细胞失衡,可阻止过敏性免疫反应.
- 杨慧敏郑鹏远刘志强李付广王新亭
- 关键词：TH2细胞食物过敏金黄色葡萄球菌肠毒素B卵清蛋白
