韩金志 作品数:3 被引量:36 H指数:3 供职机构: 南京农业大学食品科技学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 生物学 轻工技术与工程 更多>>
Paenibacillus polymyxa JSa-9发酵培养基优化及其在黄瓜枯萎病中的应用研究 被引量:5 2016年 [目的]本文旨在提高菌株Paenibacillus polymyxa JSa-9的芽孢产量并研究其芽孢液对黄瓜枯萎病的生物防治作用。[方法]采用单因素试验方法筛选最适于P.polymyxa JSa-9产芽孢的碳源、氮源和无机盐,在此基础上采用Taguchi试验方法优化各组分的最佳配比;通过田间试验研究P.polymyxa JSa-9芽孢液与其他药剂对黄瓜枯萎病的相对防效及对黄瓜幼苗生长的作用。[结果]P.polymyxa JSa-9产芽孢各组分的最优配比为麦芽浸粉15 g·L^(-1)、玉米浆15 g·L^(-1)、Ca CO_35 g·L^(-1)、Mg Cl_2·6H_2O 0.5 g·L^(-1),此条件下预测得到的芽孢产量可达到7.44×10~9CFU·m L^(-1),此时培养基的信噪比为60.13;田间试验中P.polymyxa JSa-9芽孢液相对防效达69.02%,优于发酵上清液,经芽孢液处理的幼苗植株高度为7.61 cm,单株叶片数为4.79,能显著促进黄瓜幼苗生长(P<0.05)。[结论]采用单因素试验与Taguchi试验相结合的方法优化培养基,效果显著,得到的P.polymyxa JSa-9芽孢液对黄瓜枯萎病有良好的防治效果,且具有一定促生长作用。 王美英 王芳 韩金志 陆兆新 别小妹关键词:培养基优化 黄瓜枯萎病 生物防治 原生质体融合选育高产脂肽LI-F多粘类芽胞杆菌及融合菌株表达差异分析 被引量:4 2015年 本研究以多粘类芽胞杆菌JSa-9前期诱变获得的两株带有营养缺陷型标记的菌株N1-37(Phe–)和N2-27(His–)作为亲本菌株,采用聚乙二醇作为促融剂,进行原生质体融合,筛选出高产LI-F类抗菌脂肽的融合菌株。通过HPLC对融合菌株和原始菌株产LI-F类抗菌脂肽进行定量检测,并利用实时荧光定量PCR对菌株JSa-9和融合菌株中LI-F类抗菌脂肽合成酶的关键基因fus A1、fus A2、fus C1和fus C2的差异性表达进行分析。结果表明,经过原生质融合获得一株LI-F类抗菌脂肽高产菌株F5-15。菌株F5-15的LI-F类抗菌脂肽产量为原始菌株产量的3.1倍,LI-F类抗菌脂肽合成酶的4个关键基因在融合菌株F5-15中的表达量分别是其在原始菌株JSa-9中的10.48、2.48、2.1和11.8倍。 闫冬 韩金志 别小妹 陆兆新 吕凤霞 赵海珍 张充关键词:原生质体制备 原生质体融合 实时荧光定量PCR 广谱抗菌乳酸菌的分离鉴定及细菌素的提取和纯化 被引量:27 2016年 本研究从黑龙江传统自制酸菜中分离到1株产抑菌活性物质的乳酸菌HLJ-174,其发酵产物排除有机酸、H2O2等干扰因素后对大肠杆菌、荧光假单胞菌、蜡样芽孢杆菌和藤黄微球菌等食品中常见的致病菌有广谱抑菌活性。通过形态学、生理生化和16S r RNA序列分析鉴定该菌株为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),命名为Lactobacillus plantarum HLJ-174。研究了利用有机溶剂萃取的方法提取细菌素,发现正丁醇、乙酸乙酯萃取效果较好,正己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、丙酮、乙醇等没有效果。使用不同体积的正丁醇和乙酸乙酯(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0倍发酵液体积)萃取,发现1.5倍发酵液体积的正丁醇效果最好。利用Sephadex LH-20对萃取产物进行了进一步分离,得到的活性物质对大肠杆菌和蜡样芽孢杆菌等具有较强的抑菌活性。 高鹏 韩金志 陆兆新 吕凤霞 赵海珍 张充 别小妹关键词:乳酸菌 细菌素 菌株鉴定 萃取