王林杰
- 作品数：7 被引量：16H指数：3
- 供职机构：广州医科大学更多>>
- 发文基金：广州市科技计划项目广州市卫生局医药卫生科技项目广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 硫化氢供体的表征及其上调Kir6.2、SUR1的表达抑制癫痫的机制研究
- 目的： 首先，观察硫化氢供体的表面体征及吸收光谱，检测硫化氢供体对急性分离海马神经元和人喉癌上皮细胞系Hep-2细胞活性的影响以及光学成像作用;其次，在细胞水平，原代培养海马神经元并鉴定，硫化氢供体与海马神经元共培养，...
- 王林杰
- 关键词：癫痫神经元保护
- TGF-β_1对人输尿管平滑肌细胞增殖和迁移及α-SMA表达的影响被引量：3
- 2015年
- 目的探讨外源性转化生长因子-β_1(transforming growth factor-β_1,TGF-β_1)对人输尿管平滑肌细胞(USMCs)生物学功能的影响。方法取正常的输尿管平滑肌细胞分为4组:1对照组;2TGF-β_1组(10μg/L TGF-β_1处理);3TGF-β_1拮抗剂组(30μmol/L SB-431542处理);4TGF-β_1+TGF-β_1拮抗剂组(10μg/L TGF-β_1+30μmol/L SB-431542处理)。MTT法检测各组输尿管平滑肌细胞在处理0、24、48、72h的增殖情况;细胞划痕实验检测各组输尿管平滑肌细胞处理24h、48h时的迁移能力;各组细胞处理48h后分别应用RT-qPCR和Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达变化。结果MTT实验显示与对照组相比,TGF-β_1处理24h后USMCs增殖率增加(P<0.05),处理48h、72h后增殖最明显(P<0.01),拮抗剂组细胞生长明显受抑制(P<0.05或P<0.01),TGF-β_1联合SB-431542共同处理细胞后其增殖活性与对照组相比无明显差异;细胞划痕实验显示TGF-β_1组与对照组相比,各时间点细胞迁移距离明显增加(P<0.01),拮抗剂组24h和48h细胞迁移距离与对照组相比明显减小(P<0.01),TGF-β_1联合拮抗剂处理组迁移距离与对照组相比差异无统计学意义;RT-qPCR和Western blot结果显示:与对照组相比,经TGF-β_1处理组α-SMA mRNA和蛋白的表达明显增加(均P<0.01),TGF-β_1拮抗剂则明显下调α-SMA mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。结论 TGF-β_1能够明显上调输尿管平滑肌细胞中α-SMA mRNA和蛋白的表达,并能增强细胞增殖和迁移的生物活性,拮抗TGF-β_1信号路径可明显对α-SMA的表达及细胞增殖和迁移产生抑制效应。
- 徐桂彬余涵陈丽罗亚楠马猛王林杰何永忠彭晔李逊朱晓琴
- 关键词：Α-平滑肌肌动蛋白迁移
- 含GDNF基因真核载体的构建及其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达
- 2015年
- 目的构建含GDNF基因真核表达载体,并分析其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达。方法从SD大鼠脑中提取总RNA,采用逆转录PCR法扩增GDNF基因,测序鉴定后将GDNF基因克隆入p CDNA3.1中,构建真核表达载体p CDNA3.1-GDNF;原代培养大鼠间充质干细胞,以脂质体介导法将构建好的真核表达载体p CDNA3.1-GDNF转染至间充质干细胞;RT-PCR、细胞免疫荧光、Western blot检测GDNF在间充质干细胞中的表达。结果扩增的大鼠GDNF基因序列与Gen Bbank的参考序列完全一致,GDNF基因已经正确克隆到真核表达载体p CDNA3.1中;转染骨髓间充质干细胞4 h后,GDNF的mRNA和蛋白能在细胞中正确表达。结论 p CDNA3.1-GDNF真核表达载体构建成功,并能在大鼠间充质干细胞中正确表达,这为下一步研究携带GDNF的骨髓间充质干细胞治疗癫痫奠定了实验基础。
- 马猛陈丽赵元淑邓镇王林杰冯雷罗亚楠雷水生朱晓琴
- 关键词：GDNF骨髓间充质干细胞癫痫
- NT-3基因修饰的MSCs脑内移植对颞叶癫痫大鼠作用的研究被引量：1
- 2017年
- 目的观察神经营养素-3(Neurotrophin 3,NT-3)基因修饰的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)脑内移植对颞叶癫痫(temporal lobe epilepsy,TLE)的作用及其对大鼠海马苔藓纤维发芽(mossy fiber sprouting,MFS)的影响。方法将构建成功的LV-GFP-NT-3转染大鼠骨髓MSCs,检测转染后MSCs内NT-3的表达;建立海人酸(Kainic acid,KA)TLE大鼠模型;将NT-3基因修饰的MSCs移植至海人酸TLE大鼠侧脑室模型后,观察其对TLE大鼠行为学、脑电图的影响,并用Timm组织化学染色法观察海马结构MFS;Western blot检测细胞移植后大鼠海马组织中NT-3的表达。结果 LV-GFP-NT-3转染细胞后,MSCs中能够正确过表达NT-3;细胞移植后NT-3-MSCs组TLE大鼠的发作次数减少,发作级别减低;脑电图结果表明TLE发作痫波减少;NT-3-MSCs组大鼠海马CA3区内分子层及始层未见到或极少见到Timm染色颗粒,Timm染色颗粒较对照组和LV-MSCs组显著减少;Western blot检测结果显示NT-3-MSCs组大鼠海马组织中NT-3含量明显增高。结论 NT-3基因修饰的MSCs脑内移植对颞叶癫痫大鼠有明显的抑制作用。
- 王林杰谢柳马猛何嫣杜展鑫潘晓佳朱晓琴雷水生
- 关键词：神经营养素-3颞叶癫痫慢病毒载体
- 乙酰唑胺对慢性癫痫大鼠海马NF-κB p65、IL-1β、IL-6及TNF-α表达的影响被引量：9
- 2015年
- 目的观察戊四氮(Pentylenetetrazole,PTZ)致慢性癫痫大鼠发作以及应用AQP4抑制剂乙酰唑胺(Acetazolamide,AZA)干预后对海马核因子-κB p65(NF-κB p65)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达影响,探讨AQP4与炎症因子表达间的关系及乙酰唑胺抑制癫痫发作的可能机制。方法将50只健康成年SD大鼠随机分为对照组(每日腹腔注射生理盐水)、致痫组(每日腹腔注射亚惊厥剂量PTZ35 mg/(kg·d)建立慢性癫痫大鼠模型)、乙酰唑胺干预组[每日先腹腔注射AZA35 mg/(kg·d)预处理,30 min后再腹腔注射亚惊厥剂量PTZ]。连续注射28 d,每天记录大鼠的发作级别。最后一次给药1 d后处死所有大鼠以备实验,RT-q PCR和ELISA检测大鼠海马中IL-1β、IL-6、TNF-α的表达;Western blot检测海马内NF-κB p65表达。结果对照组无明显癫痫发作,RT-q PCR和ELISA检测结果显示致痫组IL-1β、IL-6、TNF-α水平均显著高于对照组(P<0.001);乙酰唑胺干预组的三者水平明显低于致痫组(P<0.05),但仍高于对照组(P<0.05);Western blot结果显示致痫组海马组织NF-κB p65的表达与对照组相比显著升高(P<0.01),而乙酰唑胺干预组表达量与致痫组相比明显下降(P<0.05),但仍高于对照组(P<0.05)。结论乙酰唑胺抑制癫痫的发作的作用机制可能与乙酰唑胺抑制星形胶质细胞膜上AQP4的表达、改善星形胶质细胞水肿损伤状况、下调炎性因子表达有关。
- 余涵陈丽马猛周玉波王林杰罗亚楠朱晓琴雷水生
- 关键词：慢性癫痫乙酰唑胺水通道蛋白4NF-ΚBP65
- 乙酰唑胺对戊四氮致慢性癫痫大鼠海马水通道蛋白4表达的影响被引量：3
- 2015年
- 目的观察乙酰唑胺(acetazolamide,AZA)对戊四氮(pentylenetetrazole,PTZ)致慢性癫痫大鼠发作及海马水通道蛋白4(aquaporin-4,AQP4)表达的影响,探讨其抗癫痫的可能机制。方法将实验大鼠随机分为4组:对照组(每日腹腔注射生理盐水)、致痫组[每日腹腔注射亚惊厥剂量PTZ 35mg/(kg·d)建立慢性癫痫大鼠模型]、乙酰唑胺干预组[每日先腹腔注射AZA 35mg/(kg·d)预处理,30min后再腹腔注射亚惊厥剂量PTZ]和乙酰唑胺对照组[每日单纯腹腔注射AZA]。各组采用以上注射方式连续给药28d,每次注射后1h内记录各组大鼠癫痫发作级别,统计各组每天平均发作级别,观察乙酰唑胺对大鼠慢性癫痫发作的影响;最后1次给药1d后,脑电图记录各组大鼠脑电的改变,免疫组化观察AQP4在海马内分布,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot检测AQP4mRNA和蛋白的表达。结果对照组和乙酰唑胺对照组无明显癫痫发作,乙酰唑胺干预组潜伏期为(23.5±2.4)d,而致痫组潜伏期为(18.2±1.7)d,乙酰唑胺干预可明显延长慢性癫痫大鼠点燃的潜伏期(P<0.05);脑电图结果对照组和乙酰唑胺对照组无明显痫样波,致痫组记录到棘波、尖波等痫样波,而乙酰唑胺干预组痫样波明显减弱;免疫组化结果显示:AQP4主要分布在海马CA3区血管周围;RT-qPCR和Western blot结果显示慢性致痫组AQP4 mRNA及蛋白表达明显增加(P<0.05或P<0.01),乙酰唑胺干预组AQP4表达降低但仍高于对照组(P<0.05),乙酰唑胺对照组AQP4表达较对照组明显降低(P<0.05)。结论乙酰唑胺能够抑制癫痫的发作,延长慢性点燃潜伏期,并且抑制AQP4的表达,其作用机制可能是与乙酰唑胺抑制AQP4表达,改善慢性癫痫状态下脑内水和离子平衡有关。
- 陈丽余涵周玉波马猛王林杰胡景鑫雷水生朱晓琴
- 关键词：慢性癫痫水通道蛋白4乙酰唑胺戊四氮
- CD31、CD34和CD133蛋白在婴幼儿血管瘤组织中的表达及意义
- 2017年
- 目的观察CD31、CD34和CD133蛋白在婴幼儿血管瘤(IH)组织中的表达,并探讨其临床意义。方法收集IH患儿存档蜡块50例(增生期25例,消退期25例)、瘤旁正常皮肤组织5例,采用免疫组化SP法检测组织中内皮祖细胞(EPCs)标志物CD31、CD34和CD133蛋白,采用HPIAS-1000图文报告管理系统对CD31、CD34和CD133蛋白的表达进行定量分析。结果增生期血管瘤组织CD31、CD34和CD133蛋白的阳性面积率分别是23%±3%、19%±4%、37%±2%,积分光密度(IOD)分别是0.26±0.06、0.23±0.03、0.52±0.02,均高于消退期血管瘤组织和瘤旁正常皮肤组织(P均<0.05),而消退期血管瘤组织和瘤旁正常皮肤组织中CD31、CD34和CD133蛋白的IOD和阳性面积率比较差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 EPCs标志物CD31、CD34和CD133蛋白在增生期血管瘤组织中高表达,其在血管瘤的发生发展中起着重要作用。
- 冯雷罗亚楠贺月华王林杰朱璐雷水生
- 关键词：血管瘤内皮祖细胞CD34蛋白婴幼儿
