王丽娟
- 作品数：9 被引量：24H指数：3
- 供职机构：天津科技大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程理学一般工业技术更多>>
- 卵磷脂/果胶锌复合凝胶球的制备及性能被引量：10
- 2013年
- 采用滴制法,以吲哚美辛(IDM)为模型药物,皂化高甲氧化苹果果胶为骨架材料,氯化锌为交联剂,并复合卵磷脂(PC)制成吲哚美辛卵磷脂/果胶锌复合凝胶球。针对工艺参数对复合凝胶球粒径、粒重、载药量与包封率以及体外释药性能的影响进行了讨论。凝胶球均成均匀球形,粒径1.13～1.42mm,粒重1.13～2.32mg,包封率范围70.72%～94.76%,载药量范围5.84%～13.54%。同时实验结果表明,卵磷脂的加入比例、药胶比(吲哚美辛与果胶的质量比)和皂化用NaOH浓度对复合凝胶球的形态、载药及释药性能均有明显影响。其中,卵磷脂的加入使复合凝胶球载药性能和在模拟肠液中的缓释性能明显提高,当卵磷脂与果胶的质量比为5∶4,皂化用NaOH浓度为30g/L,药胶质量比1∶4时,复合凝胶球在肠模拟液中8h累计释药率为8.93%。稳定性实验结果表明,在高温和光照的条件下放置,卵磷脂/果胶锌复合凝胶球比原药及果胶锌凝胶球具有更好的稳定性,显示出卵磷脂对果胶锌复合凝胶球在结肠定位给药系统的明显改善作用。
- 武文洁李维爽赵远航刘敏王丽娟
- 关键词：吲哚美辛果胶卵磷脂结肠定位释药
- 三种真菌对洋地黄毒苷的生物转化特性研究被引量：7
- 2008年
- 考察了新月弯孢霉(Curvularia lunata)AS3.3589、蓝色犁头霉(Absidia coerulea)CICC40302和雷斯青霉(Penicillium raistrickii)ATCC10490对洋地黄毒苷的生物转化特性.结果表明:新月弯孢霉AS3.3589转化洋地黄毒苷得到2个产物,即产物Ⅰ和产物Ⅱ,产物Ⅰ的转化率为27%,产物Ⅱ的转化率为5%;蓝色犁头霉CICC40302转化洋地黄毒苷得到1个产物,即产物Ⅲ,转化率为6%;雷斯青霉ATCC10490对洋地黄毒苷不发生转化反应.通过优化新月弯孢霉KA-91生物转化反应的工艺条件,使转化产物Ⅰ的转化率达到38%,产物Ⅱ的转化率达到10%.
- 王丽娟王敏温竹刘增兵
- 关键词：新月弯孢霉蓝色犁头霉生物转化
- 载带姜黄素的卵磷脂/果胶锌凝胶球的性能被引量：5
- 2014年
- 采用滴制法制备载带姜黄素的卵磷脂/果胶锌凝胶球，以粒径、粒质量、载药量、包封率以及体外释药性能为评价指标，讨论工艺参数对评价指标的影响．实验制备的载带姜黄素的卵磷脂/果胶锌凝胶球成球均匀，平均粒径1.34～1.59,mm，平均粒质量1.74～3.45,mg．当卵磷脂与果胶的质量比为5∶4、药胶质量比为16∶20、氯化锌质量浓度为70,g/L、果胶质量浓度40,g/L、NaOH 质量浓度为30,g/L 时，载药量为18.03%，包封率为85.81%，模拟小肠液中8,h累积释药率为1.64%，再进入模拟结肠环境36,h 累积释药率为68.72%．结果表明，卵磷脂的加入改善了果胶锌凝胶球对姜黄素的载带效果以及缓释效果．
- 刘敏赵远航王丽娟谌晨吴家全武文洁
- 关键词：姜黄素果胶卵磷脂结肠靶向给药
- 复合诱变筛选高产柠檬酸黑曲霉及其发酵研究被引量：3
- 2019年
- 采用γ射线(Co60)及亚硝基胍复合诱变的方法对产柠檬酸黑曲霉菌株进行诱变。γ射线(Co60)诱变剂量为1400Gy,亚硝基胍的浓度为1mg/mL,作用时间为4min,在此条件进行复合诱变。经多轮筛选最终获得到一株产酸为15.5g/dL且遗传稳定性高的菌株。并对黑曲霉发酵产柠檬酸的工艺进行优化。确定种子液的最适条件:氮源选取豆饼粉,糖浓度为10%;最适发酵条件:培养温度为35℃,初始pH值5~6,氮源选取豆饼粉且氮源用量为0.8%,在50L发酵罐中进行中试试验,试验结果为周期63h,产酸17.94g/100mL,转化率为99.7%,比出发菌株发酵周期缩短3h,产酸提高10%,转化率提高5%。
- 孙士健王丽娟王丽娟毕付提王德培
- 关键词：黑曲霉复合诱变发酵工艺发酵罐
- 重组大肠杆菌产Indigoidine 的发酵优化
- 2020年
- Indigoidine是一种无毒的微生物天然蓝色素。本研究利用重组大肠杆菌DH5α/pBT2-ET-idgS-sfp发酵生产Indigoidine,通过单因素实验优化发酵培养基中的复合氮源比例及含量和两阶段控制温度策略中的变温点。结果表明:优化后的发酵培养基(g·L-1):胰蛋白胨5,酵母浸粉10,氯化钠10,3-(N-吗啉)丙磺酸5。优化后的变温点为37℃培养7 h时变温至28℃,Indigoidine产量增加了3倍,从初始的0.35 g·L-1提高至1.4 g·L-1。
- 孙菁兰王华敏才恒王丽娟唐巧巧刘之毅高强
- 关键词：培养基优化大肠杆菌
- 黑曲霉菌株柠檬酸合成酶基因的敲除及功能分析被引量：2
- 2020年
- 【背景】柠檬酸合成酶是碳代谢途径的中心酶,其在三羧酸循环(tricarboxylic acid cycle,TCA)、氨基酸合成和乙醛酸循环中发挥着重要作用,是柠檬酸合成的关键酶。本论文所选用的是一株高产柠檬酸的黑曲霉菌株CGMCC10142。【目的】克隆柠檬酸合成酶关键基因,构建柠檬酸合成酶的敲除菌株并鉴定其在黑曲霉菌株高产柠檬酸过程中的功能及影响。【方法】采用根癌农杆菌转化方法并利用同源重组原理,采用抗性筛选和致死型反向筛选的双重筛选方法获得正确敲除株。对转化子在不同碳源下的生长情况进行观察并对柠檬酸发酵过程中菌丝球变化和产酸量进行分析,最后通过荧光定量PCR分析柠檬酸合成酶基因对黑曲霉积累柠檬酸的影响,及其对主要代谢途径中重要酶相关基因和其他的表达量的影响。【结果】以柠檬酸高产菌株黑曲霉CGMCC10142为出发菌,构建一株遗传稳定的柠檬酸合成酶敲除的菌株T1-2。结果发现该菌株在以葡萄糖为碳源的培养基上生长缓慢并且产生孢子量减少。通过摇瓶发酵产酸实验,结果表明敲除菌在84 h产酸量为64.3 g/L,相对于出发菌的98.7g/L降低了34.85%。通过荧光定量PCR发现柠檬酸合成酶的表达量是下降的,同时重要酶的表达量都下降。【结论】该菌株的柠檬酸合成酶基因对柠檬酸积累具有重要作用,但存在其他同工酶基因,该基因敲除仅使产酸合成降低34.85%,同时发现该柠檬酸合成酶的顺畅表达有助于主代谢途径中各关键酶的高效表达,本研究可为研究黑曲霉高产柠檬酸机理奠定基础。
- 秦郦周翔宇王丽娟王丽娟刘博雅王德培
- 关键词：柠檬酸合成酶基因敲除柠檬酸实时荧光定量PCR
- 一种有效的黑曲霉启动子捕获探针的构建及其应用
- 2024年
- 启动子对基因的表达起着关键的作用,为获得黑曲霉强启动子,该文以柠檬酸生产菌株黑曲霉(Aspergillus niger)CGMCC 10142为出发菌株,运用启动子捕获探针和基因重组技术筛选菌株高强度启动子,并确定其核心启动区域。结果显示:以红色荧光蛋白基因(Rfp)为报告基因,潮霉素抗性基因(HygR)为筛选标记,构建黑曲霉启动子捕获探针质粒pN3,借助T-DNA随机整合到黑曲霉基因组,筛选具有高潮霉素抗性和强红色荧光表型的突变株,进而通过交错热不对称链式聚合酶反应(thermal asymmetric interlaced polymerase chain reaction,Tail-PCR)获得整合位点上游核苷酸序列,测序确定该序列为糖苷水解酶基因启动子区(Pgh),通过分析其具有多个转录因子结合元件。对Pgh启动子进行5'端缺失分析,获得6个不同长度5'端缺失的启动子序列,并与强启动子PglaA对比,根据报告基因Rfp表达情况确定启动子Pgh的-1 066~-766 bp为其核心区域。
- 彭亚彬徐泽宇韩天琦王丽娟薛鲜丽王德培
- 关键词：黑曲霉启动子农杆菌侵染
- 中药皂苷类化合物生物转化的研究进展
- 通过微生物、游离酶、以及动植物细胞作为催化剂来进行生物转化技术,已广泛应用于中草药的合成以及对先导化合物的结构改造等方面,而生物转化用于皂苷类化合物的研究尚处于初级阶段,本文主要对生物转化在中药皂苷类化合物的研究及新药开...
- 王丽娟王敏温竹
- 关键词：中药生物转化皂苷
- 文献传递
- 一株分枝杆菌降解胆固醇制备AD(D)的转化条件
- 2008年
- 通过分枝杆菌(Mycobacteriumsp.)M3限制性降解胆固醇侧链获得了产物雄甾-4-烯-3,17-二酮(AD)和雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮(ADD)。优化了胆固醇的投料时间、投料方式、培养基初始pH和葡萄糖浓度等工艺参数。将羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)应用于转化反应中,确定了HP-β-CD的最佳添加时间和添加量,使AD(D)生成率由初始对照的30%提高到60%,转化至72 h时AD(D)生成率达48%,是同期对照的4.0倍,生成率与生成速率均得到显著提高。在添加HP-β-CD的最佳转化条件下,AD(D)生成率达到70%,是初始对照的2.3倍。
- 王敏温竹王丽娟申雁冰王洪臣
- 关键词：17-二酮胆固醇生物转化分枝杆菌
