姜黎明
- 作品数：14 被引量：4H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：云南省社会发展科技计划云南省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- CpG ODN佐剂序列IMB-AC5联合乙型肝炎疫苗的免疫原性分析
- 2016年
- 目的评价Cp G ODN佐剂序列IMB-AC5联合乙型肝炎疫苗的免疫原性,以评估IMB-AC5佐剂的应用前景。方法利用市售的单铝佐剂乙型肝炎疫苗,根据相同配比加入3种Cp G ODN（IMB-AC5及Coley 7909和Dynavax 1018）,作为实验组（V-AC5、V-7909和V-1018）,并以乙型肝炎疫苗为对照组,分别免疫BALB/c小鼠,于免疫后2、4、6、8周,经尾静脉采血,第10周处死小鼠采集全血,分离血清,采用乙肝表面抗体试剂盒检测anti-HBs抗体水平,ELISA法检测Ig G1/2a亚型抗体比例;ELISPOT法检测小鼠脾细胞IFNγ表达水平。结果免疫后0~4周内,各组小鼠血清抗体水平均无明显变化,第6周开始呈明显上升趋势,至第8周后趋于平缓;各实验组抗体水平均明显高于对照组（P〈0.05）,V-AC5显示出与V-7909同样良好的体液免疫效果,略优于V-1018。免疫后各实验组小鼠血清中Ig G2a/Ig G1比例明显高于对照组。各实验组小鼠脾细胞斑点数明显高于对照组（P〈0.05）;V-AC5斑点数介于其他两个实验组之间。结论 IMB-AC5佐剂能显著活化B细胞产生抗体并具有刺激细胞免疫的效果,可增强疫苗的免疫原性。
- 赵玉娇蔡路奎王晓丹席珏敏陈俊英潘玥邱丽娟姜黎明孙强明
- 关键词：CPGODN佐剂乙型肝炎疫苗免疫原性
- 一种I-IV型登革热病毒的通用检测试剂盒
- 本发明涉及一种I-IV型登革热病毒的通用检测试剂盒，属于病毒检测技术领域。该试剂盒包括酶标记板、阴性对照血清、阳性对照NS1重组蛋白、检测抗体、显色底物和终止液。所述酶标记板上的包被抗体为DV14抗体，检测抗体为连接了生...
- 孙强明李多王晓丹潘玥陈俊英席珏敏黄新伟赵玉娇邱丽娟姜黎明
- 文献传递
- Ⅲ型登革病毒在THP-1细胞上的ADE模型建立
- 2017年
- 登革热(dengue fever,DF)是由Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型登革病毒(dengue virus,DENV)引起的急性传染病,抗体依赖增强感染(antibody-dependent enhancement,ADE)是自限性的登革热以及危及生命的登革出血热(dengue hemorrhagic fever,DHF)或登革休克综合症(dengue shock syndrome,DSS)等重症的主要原因。采用不同稀释度的Ⅱ型登革病毒prM前膜抗体与分离自云南西双版纳重症病人的Ⅲ型登革病毒复合感染THP-1细胞,通过实时荧光定量PCR发现亚中和浓度prM前膜抗体诱发THP-1细胞液中更高浓度的病毒载量。在THP-1细胞系上的研究可为后续研究登革病毒ADE打下坚实的基础。
- 姜黎明杨佳佳罗佳叶超文送娇孙强明
- 关键词：THP-1细胞
- 一种I‑IV型登革病毒的NS1重组蛋白构建方法及其应用
- 本发明公开一种I‑IV型登革病毒的NS1重组蛋白构建方法，将登革病毒标准株进行RT‑PCR扩增，分别得到I‑IV型登革病毒的NS1全基因，再与pMD19T载体连接，然后进一步得到pET30a‑NS1质粒，将所得pET30...
- 孙强明王晓丹席珏敏陈俊英潘玥姜黎明罗佳杨佳佳
- 文献传递
- 植物乳杆菌YM4-3 luxS基因表达与酸和胆盐的耐受关系
- 植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)是发酵食品中一种常见的益生菌,群体感应(quorum sensing,QS)是细菌进行信号交流的一种普遍方式,Lb.plantarum是否通过QS介导其益生特性...
- 姜黎明罗义勇孙强明
- CpG ODN佐剂序列IMB-AC5的体外免疫刺激活性分析被引量：1
- 2017年
- 目的对CpG ODN候选佐剂IMB-AC5进行体外免疫刺激活性分析。方法以目前国外进入临床研究的两种CpG ODN佐剂序列(Coley 7909和Dynavax ISS1018)为对照,采用~3H-TDR法检测IMB-AC5刺激人外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocytes,PBLs)的增殖活性;流式细胞术分析CD19+B活化细胞表面CD69表达水平;ELISA法检测刺激后GEN细胞产生的IL-6和IFNα水平。结果 3种CpG ODN佐剂均能明显刺激人PBLs的增生,IMB-AC5刺激增生能力优于Dynavax ISS1018,略低于Coley 7909;IMB-AC5活化CD19+B细胞表面CD69表达水平与Coley7909相似,Dynavax ISS1018活化效果略低于前二者;3种CpG ODN佐剂体外活化树突状细胞水平差异较大,且呈明显的剂量依赖,IMB-AC5的最佳活化浓度范围为0.15~1.5μmol/L,Coley 7909的最佳活化浓度范围为<0.25μmol/L,活化效果均优于Dynavax ISS1018。结论 IMB-AC5可作为有效的疫苗候选佐剂,且不低于国外同类佐剂的体外免疫刺激活性。
- 赵玉娇蔡路奎王晓丹席珏敏陈俊英潘玥邱丽娟姜黎明孙强明
- 关键词：CPGODN佐剂
- 乙脑病毒E蛋白抗体在THP-1细胞中对增强DENV-Ⅱ感染的作用研究
- 2020年
- 目的 利用THP-1细胞研究梯度稀释的乙脑病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)E蛋白抗体对Ⅱ型登革病毒(Dengue virus,DENV-Ⅱ)复制能力的影响。方法 采用不同稀释度的JEV-E抗体与分离自云南西双版纳重症患者血清中的DENV-Ⅱ复合感染人THP-1细胞,构建DENV-Ⅱ病毒荧光定量PCR检测标准曲线,利用实时荧光定量PCR检测不同稀释度的JEV-E抗体与DENV-Ⅱ以不同MOI (Multiplicity of infection) 复合感染人THP-1细胞的病毒拷贝数。结果 实时荧光定量PCR检测发现1/4稀释度浓度的JEV-E抗体促进DENV-Ⅱ在人THP-1细胞内复制,而高浓度和低浓度JEV-E抗体对DENV-Ⅱ在人THP-1细胞内的复制无明显促进作用。结论 同为黄病毒属的JEV病毒E蛋白抗体能够诱发DENV-Ⅱ在人THP-1细胞产生抗体依赖增强感染现象,为后续研究黄病毒间的抗体依赖增强感染现象奠定了理论基础。
- 徐倩姜黎明欧阳春
- 关键词：登革病毒乙脑病毒THP-1
- Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒基因拷贝数的绝对定量检测方法
- 本发明提供一种Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒基因拷贝数的绝对定量检测方法，通过Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒的接种培养，再构建Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒标准品质粒，参照所得Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒前膜蛋白区目的基因序列设计下列Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒荧光定量PCR...
- 孙强明黄新伟席珏敏赵玉娇潘玥陈俊英王晓丹李多邱丽娟姜黎明
- 文献传递
- 登革病毒感染C6/36、Vero、BHK-21和THP-1细胞CPE的比较及病毒检测被引量：1
- 2017年
- 目的比较感染登革病毒(dengue virus,DV)的C6/36、Vero、BHK-21和THP-1细胞的CPE情况,并进行病毒检测。方法将分离自云南西双版纳的Ⅲ型DV中国株D13053和广东省疾病预防控制中心惠赠的Ⅱ型中国株D10156,以5 MOI感染C6/36、Vero、BHK-21和THP-1细胞,同时将Vero和C6/36细胞来源的DV,分别以5 MOI感染C6/36细胞,连续观察CPE至第10天,并利用DV通用引物,RT-PCR法鉴定细胞培养上清中的病毒。结果C6/36细胞对DV最敏感并有明显的病变,细胞几乎100%聚集、破碎并呈网格状;Vero、BHK-21细胞至第5天出现脱落、破碎和悬浮等病变,对DV有一定的敏感性;THP-1细胞至第10天未出现CPE。PCR核酸检测发现,感染DV的C6/36、THP-1、BHK和Vero细胞培养上清中可检测到DV,而Vero细胞来源DV感染的C6/36细胞未检测到DV。结论 DV对不同细胞系的感染能力和感染DV后CPE的表现形式存在较大差异。
- 杨佳佳姜黎明罗佳叶超文送娇孙强明
- 关键词：登革病毒C6/36细胞BHK-21细胞THP-1细胞
- Ⅱ型登革病毒前膜抗体对该病毒在THP-1细胞中复制能力的影响
- 2018年
- 目的探讨Ⅱ型登革病毒(dengue virusⅡ,DENVⅡ)前膜(presynaptic membrane,prM)抗体对DENVⅡ在THP-1细胞中复制能力的影响。方法采用不同稀释度(1/4~1/16 384)的DENVⅡanti-pr M单克隆抗体分别与不同MOI的DENVⅡ(MOI分别为3、0.75及0.19)复合感染THP-1细胞。建立DENVⅡ荧光定量PCR检测标准曲线,检测THP-1细胞培养上清液的病毒拷贝数。结果 DENVⅡ按MOI=3感染THP-1细胞,当prM稀释度为1/16和1/16 384时诱发THP-1细胞产生病毒的载量较高,prM稀释度为1/64和1/256时抑制病毒生长;DENVⅡ按MOI=0.75感染THP-1细胞,当prM稀释度1/16时可诱发更高浓度病毒载量;DENVⅡ按MOI=0.19感染THP-1细胞时,不会诱导产生高浓度的病毒载量。结论中浓度pr M抗体可抑制DENVⅡ在THP-1细胞中的复制能力,而高及低浓度prM抗体可促进DENVⅡ在THP-1细胞中的复制能力。
- 姜黎明杨佳佳罗佳叶超文送娇孙强明
- 关键词：前膜抗体THP-1细胞
