冯雨
- 作品数：6 被引量：13H指数：2
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- 维拉帕米通过阻断钙离子内流抑制血管平滑肌细胞钙化研究被引量：8
- 2015年
- 目的探讨维拉帕米抑制高磷诱导大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）钙化的作用及可能机制。方法2014年12月—2015年6月选取5~8周龄清洁级健康雄性SD大鼠6只,体外分离培养大鼠VSMCs,采用免疫组化法鉴定。将对数期VSMCs随机分为正常对照组〔含10%胎牛血清（FBS）培养基〕、高磷组（高磷培养基,含10 mml/Lβ-甘油磷酸）、维拉帕米干预组（在高磷培养基的基础上加入维拉帕米至浓度为20 mmol/L）。细胞接受2、4、6 d干预后,检测VSMCs内钙离子水平,采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测VSMCs内目的基因（smad1、runx2mRNA）表达水平。细胞接受14 d干预后进行钙化检测,包括钙水平测定和茜素红染色情况。结果高磷组、维拉帕米干预组2、4、6 d后VSMCs内钙离子水平均高于正常对照组（P〈0.05）;维拉帕米干预组2、4、6 d后VSMCs内钙离子水平均低于高磷组（P〈0.05）。高磷组、维拉帕米干预组4、6 d后VSMCs内钙离子水平分别高于2 d后（P〈0.05）;高磷组6 d后VSMCs内钙离子水平高于4 d后（P〈0.05）;维拉帕米干预组6 d后VSMCs内钙离子水平低于4 d后（P〈0.05）。高磷组、维拉帕米干预组2、4、6 d后VSMCs内smad1、runx2 mRNA表达水平均高于正常对照组（P〈0.05）;维拉帕米干预组2、4、6 d后VSMCs内smad1、runx2 mRNA表达水平均低于高磷组（P〈0.05）。高磷组4、6 d后VSMCs内smad1、runx2 mRNA表达水平分别高于2 d后,6 d后VSMCs内smad1、runx2 mRNA表达水平分别高于4 d后（P〈0.05）;维拉帕米干预组4 d后VSMCs内smad1 mRNA表达水平高于2 d后,runx2 mRNA表达水平低于2 d后,6 d后VSMCs内smad1、runx2 mRNA表达水平均高于2、4 d后（P〈0.05）。高磷组、维拉帕米干预组VSMCs钙水平均高于正常对照组（P〈0.05）;维拉帕米干预组VSMCs钙水平低于高磷组（P〈0.05）。高磷组、维拉帕米干预组橘红色钙化结节较正常对照组多,维拉帕米干预组橘红色�
- 李同妙徐金升冯雨张胜雷张俊霞崔立文张慧然
- 关键词：维拉帕米血管钙化钙通道
- 酸性环境对慢性肾衰竭大鼠血管钙化的影响及其机制被引量：2
- 2015年
- 目的 探讨酸性环境对慢性肾衰竭大鼠血管钙化的影响及可能机制.方法 将22只雄性SD大鼠随机分为4组：假手术组（甲基纤维素灌胃）、慢性肾衰竭组（5/6肾切除术构建慢性肾衰竭大鼠模型,甲基纤维素灌胃）、慢性肾衰竭血管钙化组（甲基纤维素加骨化三醇灌胃）、酸干预组[甲基纤维素及骨化三醇灌胃加氯化铵（0.28 mmol/L）饮水].采用von Kossa染色及邻甲酚酞络合酮比色法检测胸主动脉钙化情况;免疫组织化学方法检测胸主动脉runt相关转录因子2 （runt-related transcription factor 2,runx2）和L型钙通道（calcium channels,Ltype,LTCC） β3亚基表达.体外原代培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（VSMCs）,用β-甘油磷酸盐（β-glycerophosphate,β-GP）诱导钙化.将细胞随机分为4组：正常＋pH7.4组、高磷＋pH7.4组（10 mmol/L β-GP）、高磷＋pH7.1组（高磷培养基基础上添加盐酸调整pH值为7.1）和维拉帕米干预组[高磷培养基基础上添加维拉帕米（调整浓度为20 mmol/L）].采用茜素红染色及邻甲酚酞络合酮比色法检测细胞钙化情况;酶联免疫吸附法检测细胞碱性磷酸酶（ALP）活性;钙离子探针Fluo-3/AM检测血管平滑肌细胞胞外钙离子内流的效应变化;RT-PCR和Western印迹法检测LTCCβ3亚基、runx2的表达.结果 体内实验中,成功制备了慢性肾衰竭大鼠的血管钙化模型,与慢性肾衰竭血管钙化组相比,给予酸干预后,大鼠血管钙盐沉积明显减轻（P＜0.05）,LTCCβ3亚基和runx2表达降低（P＜0.05）.体外实验证明,酸性环境减少了VSMCs钙盐沉积,降低了ALP活性（P＜0.05）,抑制了LTCCβ3亚基表达（P＜0.05）,阻滞细胞外钙离子内流（P＜0.05）,降低runx2的表达（P＜0.05）.维拉帕米干预组VSMCs钙盐沉积和runx2表达均降低（P＜0.05）.结论 酸性环境可以抑制血管钙化,其可能机制之一是通过抑制VSMCsLTCCβ3亚基表达,阻滞钙离子内流,抑
- 张胜雷徐金升冯雨张俊霞崔立文何雷俞啟遥白亚玲
- 关键词：钙质沉着症
- 酸性环境对慢性肾衰竭大鼠血管钙化的影响及其机制
- 目的：探讨酸性环境对慢性肾衰竭大鼠血管钙化的影响及可能机制.方法：将22 只雄性SD 大鼠随机分为4 组：假手术组(甲基纤维素灌胃)、慢性肾衰竭组(5/6 肾切除术构建慢性肾衰竭大鼠模型,甲基纤维素灌胃)、慢性肾衰竭血管...
- 徐金升冯雨张俊霞崔立文何雷俞啟遥白亚玲张胜雷
- 关键词：钙质沉着症
- 维拉帕米通过阻断钙离子内流抑制血管平滑肌细胞钙化研究
- 探讨维拉帕米抑制高磷诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的作用及可能机制.维拉帕米在高磷诱导的VSMCs钙化中起抑制作用，其可能是通过抑制钙离子内流进而抑制smadl表达，进一步抑制runx2表达，进而抑制VSMCs...
- 李同妙徐金升冯雨张胜雷张俊霞崔立文张慧然
- 关键词：细胞钙化高磷诱导维拉帕米
- 酸性环境对高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化的影响及机制研究被引量：3
- 2015年
- 目的探讨酸性环境对高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的影响及可能机制。方法体外分离培养大鼠VSMCs,采用免疫细胞化学方法鉴定。将VSMCs按随机数字表法分为正常对照组、高磷+p H7.4、高磷+p H7.1和高磷+p H6.8(在高磷培养基的基础上调整p H值为6.8、7.1和7.4三个亚组)。刺激4 d后,采用RT-PCR检测L型钙通道(LTCC)α_(1C)、β_2和β_3亚基,Runt相关转录因子2(Runx2)及Smad1基因的表达;应用钙离子探针Fluo-3/AM检测VSMCs胞外钙离子内流的效应变化。刺激14 d后,对各组细胞进行钙化染色、钙含量和碱性磷酸酶(ALP)活性测定。结果与正常对照组比较,高磷+p H7.4组钙含量、ALP活性、Runx2和Smad1mRNA的表达明显增高(88.26±6.43比22.39±3.19、94.33±3.08比20.39±1.18、0.37±0.02比0.01±0.00、0.65±0.05比0.07±0.01,均为P<0.05);与高磷+p H7.4组比较,高磷+p H7.1组和高磷+p H6.8组的钙含量、ALP活性、Runx2和Smad1mRNA的表达均降低(69.95±1.72和50.74±3.29、51.11±2.05和34.62±1.13、0.25±0.02和0.09±0.01、0.44±0.04和0.23±0.01,均为P<0.05)。与正常对照组比较,高磷+p H7.4组的LTCCβ_3亚基mRNA表达水平增加(0.80±0.01比0.34±0.13,P<0.01),高磷+p H7.1组和高磷+p H6.8组的LTCCβ_3亚基mRNA表达水平均下降(0.64±0.11和0.43±0.01,均为P<0.01)。各组之间LTCCα_(1C)和β_2亚基mRNA的表达差异无统计学意义(P=0.08和0.74)。与正常对照组比较,高磷+p H7.4组的VSMCs胞内钙离子浓度增加(438.33±7.50比149.54±20.89,P<0.05);高磷+p H7.1组和高磷+p H6.8组的VSMCs胞内钙离子浓度均降低(329.66±16.64和234.00±17.43,均为P<0.01)。结论酸性环境可以抑制高磷诱导的大鼠VSMCs钙化,其可能是通过抑制LTCCβ_3亚基表达,降低VSMCs钙离子内流,阻滞VSMCs发生表型转化来实现的。
- 张俊霞徐金升冯雨白亚玲张胜雷崔立文张慧然
- 关键词：RUNX2
- 酸性环境对高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化的影响及机制研究
- 探讨酸性环境对高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的影响及可能机制.总之:酸性环境可以抑制高磷诱导的大鼠VSMCs钙化，其可能是通过抑制LTCC β3亚基表达，降低VSMCs钙离子内流，阻滞VSMCs发生表型转...
- 徐金升冯雨白亚玲张胜雷崔立文张慧然张俊霞
- 关键词：血管平滑肌细胞细胞钙化高磷诱导
