金龙
- 作品数：11 被引量：6H指数：1
- 供职机构：四川农业大学更多>>
- 发文基金：四川省科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- miR-181a和miR-181d-5p对猪前体脂肪细胞成脂分化调控的研究
- 2022年
- 【目的】探究miR-181a和miR-181d-5p在荣昌猪原代前体脂肪细胞分化中的作用及机制。【方法】通过比对种子序列差异分析miR-181a和miR-181d-5p在猪、人、大鼠和小鼠不同物种间的序列保守性;实时荧光定量PCR检测miR-181a和miR-181d-5p在猪肌肉和背部皮下脂肪组织中表达;利用miRandn和TargetScan在线软件预测miR-181a和miR-181d-5p的靶基因,并进行GO和KEGG富集分析;使用RNAhybrid在线软件预测miR-181a和miR-181d-5p与其靶基因的结合自由能。取7日龄雄性荣昌猪背部皮下脂肪组织分离原代前体脂肪细胞。分别设计miR-181a和miR-181d-5p的靶基因野生型和突变型载体,并与对应的miRNA共转染前体脂肪细胞,进行双荧光素酶报告基因试验验证miRNA与靶基因的靶标关系,测定miR-181a和miR-181d-5p与其靶基因的结合情况。构建miR-181a和miR-181d-5p的模拟物(miR-181a mimics、miR-181d-5p mimics)、抑制物(miR-181a inhibitor、miR-181d-5p inhibitor)、阴性对照(NC)及其靶基因的干扰siRNA(Gene-siRNA),转染细胞6 h后进行诱导分化。6 d后,分别对不同处理的细胞通过实时荧光定量PCR检测基因表达情况,油红O染色鉴定甘油三酯生成情况。【结果】保守性分析结果表明,miR-181a和miR-181d-5p在猪、人、大鼠和小鼠间具有高度序列保守性;miR-181a与miR-181d-5p在猪不同组织中定量结果显示,miR-181a与miR-181d-5p在猪脂肪组织中特异性高表达;靶基因预测结果表明,miR-181a与miR-181d-5p的靶基因分别为线粒体甘油3-磷酸脱氢酶(GPD2)和环腺苷酸反应元件(CREB1);GO和KEGG功能富集分析发现,miR-181a和miR-181d-5p的靶基因可以抑制甘油三酯生成,调节脂肪细胞分化,且miR-181a和miR-181d-5p与其靶基因的自由结合能均<-87.8 kJ/mol;双荧光素酶报告基因试验结果表明,转染miR-181a与miR-181d-5p的mimics可以极显著抑制靶基因3′-UTR野生型双荧光素酶报告载体中的荧光素酶活性(P<0.01),但不影响靶�
- 王梽名王宇豪顾以韧龙科任李明洲金龙
- 关键词：荣昌猪脂肪细胞
- 探究自然选择和人工选择作用于藏猪与家猪线粒体基因组的痕迹
- 藏猪主要分布于中国西藏自治区的山南、昌都地区和拉萨市,四川省的阿坝和甘孜藏族自治州,云南省的迪庆和甘肃省的甘南藏族自治州等平均海拔达3000米以上的高海拔地区,能够很好的适应低氧、低温、强紫外线等恶劣环境.本实验采用35...
- 金龙李明洲马继登田仕林李瑞强李学伟
- 关键词：线粒体基因组自然选择
- 文献传递
- Klrb1基因完全敲除的抗多杀性巴氏杆菌猪模型的构建方法
- 本发明公开了一种Klrb1基因完全敲除的抗多杀性巴氏杆菌猪模型的构建方法，猪Klrb1基因完全敲除动物模型的打靶位点sgRNA核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明利用高效精准的CRISPR/Cas9技术，通过电...
- 龙科任曹三杰李明洲袁建林张宇赵勤陆路黄小波金龙杜森焱
- 一种猪骨髓间充质干细胞分离培养的优化方法
- 本发明属于细胞培养技术领域，公开了一种猪骨髓间充质干细胞分离培养的优化方法，利用PBS冲洗腿骨外部，利用全骨髓干细胞培养液采集骨髓；将冲洗后的全骨髓干细胞培养液液移至离心管中进行离心；加红细胞裂解液，吹打，静置；将静置后...
- 王宁金龙张宇贺力李明洲
- 猪不同年龄段骨骼肌的甲基化组比较分析
- 大量研究报道哺乳动物中年龄相关的生理变化主要开始于动物的中年时期.但对于该特殊时期动物骨骼肌表观层面变化的研究未见报道.本实验以猪为研究模型,采集了180天(青年)和7年(中年)两个年龄阶段猪的典型骨骼肌组织-背最长肌,...
- 金龙李伟钟邦胜沈俊芳蒋岸岸朱砺王金勇李学伟李明洲蒋智夏渝东楼平儿陈磊王红梅白露谢燕梅刘一辉
- 关键词：背最长肌衰老机制
- 文献传递
- 一种实验用老鼠快速称重装置
- 本实用新型公开了一种实验用老鼠快速称重装置，涉及活体动物称重技术领域，包括杯状的容器本体和设置在容器本体底部的底座；所述容器本体包括圆形漏斗状的漏斗部和设置在漏斗状下方的狭窄部，所述狭窄部固定设置在底座上，所述漏斗部的内...
- 王宇豪金龙周璇李明洲
- 文献传递
- 高繁美系种猪选育研究与应用
- 朱砺李强唐国庆姜延志曾仰双张顺华朱淋王金江马继登金龙姜冬梅
- （一）主要技术内容： 针对四川美系猪体型好、产肉性能高，但繁殖性能低下、肉质较差的实际，在省畜禽育种攻关项目“优质瘦肉型猪配套系选育”等项目资助下，确定了保持产肉优势基础上，提高综合繁殖效率，兼顾肉质不劣变选育高繁美系种...
- 关键词：
- 关键词：养猪遗传选育饲养管理
- 猪不同部位脂肪组织交感神经免疫组织化学染色优化方法
- 本发明属于免疫组织化学技术领域，公开了一种猪不同部位脂肪组织交感神经免疫组织化学染色优化方法，石蜡切片脱蜡水化后，进行抗原修复；利用丙酮固定后，血清封闭，一抗孵育；利用过氧化氢阻断后，进行二抗孵育；进行DAB显色，核复染...
- 张林珍金龙柴琎伍玉洁李明洲
- 一种评价公猪精液精子活性的分子标记及应用
- 本发明公开了一种评价公猪精液精子活性的分子标记及应用，属于家畜分子标记制备技术领域。其分子标记为ssc‑miR‑26a‑5p，所述ssc‑miR‑26a‑5p的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明发现ssc‑m...
- 李正杰范宇刘灿马继登龙科任金龙李明洲
- 藏猪高原适应性相关基因的鉴定及其DNA甲基化调控规律
- 藏猪是青藏高原地区驯化起源的较为古老的地方猪种，为我国唯一的高原猪种，也是世界少有的微型猪种之一。目前对藏猪的相关研究大多停留在表型特征、地理分布和生活习性等方面，而对藏猪高原适应性和重要经济性状的分子机理研究报道不多，...
- 金龙
- 关键词：藏猪脱氧核糖核酸基因调控
- 文献传递
