牛晓洁
- 作品数：10 被引量：10H指数：2
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- 运动通过IGF-1/Nrf2通路激活糜蛋白酶样活性促进成年海马神经发生
- 2021年
- 神经前体细胞(neural progenitor cells,NPCs)产生功能性神经元的过程称为神经发生。随年龄的增长NPCs增殖能力下降,是神经退行性疾病发生的关键事件。研究发现运动可促进成年海马神经发生,提高小鼠的认知功能,但其具体机制尚不清楚。因此,为了深入解析运动促进神经发生的机制,本实验以成年(3个月)小鼠运动模型为研究对象。检测运动小鼠海马糜蛋白酶样、半胱氨酸酶样及胰蛋白酶样的活性。结果显示:糜蛋白酶样活性升高最显著;同时,运动小鼠血清及海马IGF-1的含量也显著增加。运用IGF-1作用于体外培养的成年小鼠海马NPCs后,能够激活NPCs的糜蛋白酶样活性,促进NPCs增殖及分化能力。
- 牛晓洁杨娜赵云鹏赵雪纯陆利
- 关键词：神经发生糜蛋白酶神经前体细胞小鼠血清
- 18α-甘草次酸通过抗氧化作用促进成年小鼠室管膜下区神经干细胞增殖被引量：5
- 2022年
- 目的探讨18α-甘草次酸(18α-GA)对成年小鼠室管膜下区(SVZ)神经干细胞(NSCs)增殖的影响及其机制。方法100只6月龄BALB/c小鼠随机平均分为18α-GA组(腹腔注射18α-GA 40 mg/kg两个月,以DMSO为溶解介质)和DMSO对照组(腹腔注射含等体积DMSO溶解介质的PBS溶液),每组50只,其中15只用于在体实验,其余35只小鼠断头取脑,分离培养SVZ区NSCs。采用Ki-67染色、成球实验、BrdU掺入实验及CCK-8实验检测SVZ区NSCs增殖活力,二氢乙啶(DHE)染色等方法检测活性氧簇(ROS)及超氧化物歧化酶1(SOD1)水平,Real-time PCR及Western blotting检测SVZ区NSCs的核因子E2相关因子2(Nrf2)表达。结果在体实验结果显示,腹腔注射18α-GA后,小鼠SVZ区Ki-67阳性细胞数较DMSO对照组明显增多,ROS水平较DMSO对照组明显下降,而SOD1在mRNA和蛋白水平均明显升高,分别是对照组的(3.17±0.073)倍和(2.12±0.02)倍(P<0.05和P<0.001)。细胞实验结果表明,18α-GA组小鼠SVZ区的NSCs成球速度快,数量多,其中直径在40~60μm和≥60μm的神经球数量分别是DMSO对照组的2.1倍和4倍(P<0.001);18α-GA组小鼠SVZ区的NSCs活力明显提高(P<0.001),BrdU阳性率是DMSO对照组的(1.75±0.17)倍(P<0.01);18α-GA组小鼠SVZ区NSCs的ROS水平较DMSO对照组下降18.91%±4.33%(P<0.05),而SOD1在mRNA和蛋白水平均明显升高(P<0.05和P<0.01)。此外,腹腔注射18α-GA后小鼠SVZ区及其NSCs中Nrf2的mRNA和蛋白水平均高于对照组(P<0.01和P<0.05)。结论在体给予18α-GA可提高成年NSCs的SOD1活性,减少细胞内ROS堆积,维持和改善成年小鼠SVZ区NSCs的增殖潜能。
- 刘雪芹牛晓洁王必慧王婷玉杨静陆利
- 关键词：神经干细胞抗氧化免疫印迹法小鼠
- 一种裂环烯醚萜苷类复合物的制备及其提高骨髓间充质干细胞活力的应用
- 本发明属生物医学领域，为解决体外培养的骨髓间充质干细胞BMSCs出现细胞形态、代谢、增殖和分化潜能改变，为促进体外培养的BMSCs增殖，并保持其有较好的分化潜能，提供一种裂环烯醚萜苷类复合物的制备及其提高骨髓间充质干细胞...
- 陆利刘雪芹牛晓洁杨娜赵雪纯赵云鹤陈显久
- 运动通过IGF-1/Nrf2通路激活糜蛋白酶样活性促进成年海马神经发生
- 神经前体细胞(neuralprogenitor cells,NPCs)产生功能性神经元的过程称为神经发生。随年龄的增长NPCs增殖能力下降,是神经退行性疾病发生的关键事件。研究发现运动可促进成年海马神经发生,提高小鼠的认...
- 牛晓洁杨娜赵云鹏赵雪纯陆利
- 运动通过IGF-1/Nrf2通路激活糜蛋白酶样活性促进成年小鼠海马神经发生
- 目的： 神经祖细胞(Neural progenitor cells, NPCs)增殖、分化、产生新生神经元，参与神经功能活动的过程称为神经发生。成年神经发生主要存在于海马齿状回(Dentate gyrus, DG)和室...
- 牛晓洁
- 关键词：神经发生
- 文献传递
- 叔丁基对苯二酚激活蛋白酶体活性促进成年小鼠神经干细胞增殖与分化
- 2016年
- 目的:探讨叔丁基对苯二酚(tBHQ)对成年小鼠神经干细胞(aNSCs)增殖分化能力的影响,寻找维持aNSCs活力的有效手段。方法:成年BALB/c小鼠腹腔注射tBHQ(每日16.7 mg/kg)7 d,收集室管膜下区(SVZ)的脑组织,应用荧光酶标仪定量检测其蛋白酶体的活性;同时小鼠腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU),Brd U免疫荧光染色检测SVZ内a NSCs的增殖能力。分离培养SVZ aNSCs,tBHQ(20μmol/L)作用7 d,分析比较tBHQ组与DMSO组a NSCs的蛋白酶体活性、BrdU阳性率以及形成神经球的数量和直径。应用1%的胎牛血清诱导a NSCs分化,早期神经元标记物β-Ⅲ微管蛋白(Tuj1)免疫荧光染色并比较tBHQ组与DMSO组a NSCs向神经元分化的能力。结果:小鼠腹腔注射tBHQ,其SVZ蛋白酶体活性较DMSO对照组上调12.9%±4.6%(P<0.05),并且BrdU标记实验显示tBHQ组阳性细胞数为31.3±6.3,与DMSO对照组(15.4±1.3)比较,aNSCs增殖能力显著提高(P<0.05)。体外实验结果也显示tBHQ组aNSCs蛋白酶体活性较DMSO对照组上升10.1%±0.8%(P<0.01)。tBHQ组Brd U阳性率(31.3%±3.2%)是DMSO对照组(20%±1.5%)的1.6倍(P<0.05)。tBHQ组神经球的数量和直径分别是DMSO对照组的1.7倍(P<0.05)和1.4倍(P<0.05),提示tBHQ促进aNSCs的自我更新。此外,tBHQ组Tuj1阳性率为26.5%±1.6%,较DMSO对照组18.6%±2.1%显著提高(P<0.05),提示tBHQ能够促进a NSCs向神经元方向分化。结论:tBHQ能够上调蛋白酶体活性,促进aNSCs的增殖与分化。
- 牛晓洁赵雪纯崔佳彬杨桂姣成晓龙陆利
- 关键词：叔丁基对苯二酚增殖分化小鼠
- 叔丁基对苯二酚激活骨髓间充质干细胞蛋白酶体活性延缓复制性衰老被引量：2
- 2015年
- 目的:探讨叔丁基对苯二酚(tert-butylhydroquinone,t BHQ)在延缓骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)复制性衰老进程中的作用,以期为细胞移植治疗提供数量充足的种子细胞。方法:30μmol/L t BHQ持续作用于体外传代晚期BMSCs 4周,化学发光法测量蛋白酶体活性;CCK-8法检测细胞活力;Brd U掺入实验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期分布;衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-Gal)染色检测衰老细胞百分比;Western blot检测衰老相关蛋白P53表达变化。结果:30μmol/L t BHQ持续作用于传代晚期BMSCs 4周后,蛋白酶体活性较DMSO溶剂对照组上调(21.96±1.98)%(P<0.05)。CCK-8法显示随t BHQ浓度增加,细胞活力逐渐升高,至40μmol/L达到平台期,且至120μmol/L未见明显细胞毒性。Brd U掺入实验显示t BHQ组阳性细胞率与DMSO溶剂对照组比较,细胞增殖能力显著提高(P<0.05);t BHQ组细胞增殖指数也显著高于DMSO组(P<0.05)。t BHQ组SA-β-Gal阳性率较DMSO溶剂对照组显著降低(P<0.01),且衰老相关蛋白P53表达量也较对照组下降(P<0.05)。结论:t BHQ能够通过提高蛋白酶体活性延缓因蛋白酶体功能障碍引起的BMSCs复制性衰老进程。
- 宋慧芳杨佳超牛晓洁陆利
- 关键词：叔丁基对苯二酚骨髓间充质干细胞
- IGF-1激活20S蛋白酶体β5亚单位活性对N2a细胞活力的影响被引量：2
- 2020年
- 目的:探索胰岛素样生长因子(IGF-1)对蛋白酶体的作用,并观察其对小鼠神经母细胞瘤来源的N2a细胞活力的影响,寻找维持细胞活力的有效手段。方法:体外培养N2a细胞加入不同浓度的IGF-1后,分析N2a细胞肽基谷氨酰肽水解酶样(PGPH-L)、胰蛋白酶样(T-L)和糜蛋白酶样(CT-L)三种蛋白酶体活性的变化,real time RT-PCR比较分别具有PGPH-L活性、T-L活性和CT-L活性的20S蛋白酶体β1亚单位(PSMBI)、20S蛋白酶体β2亚单位(PSMB2)、205蛋白酶体β5亚单位(PSMB5)mRNA水平的变化。双荧光素酶实验检测IGF-1对PSMB5转录活性的影响。CCK8实验和Hoechst 3342/PI染色实验检测IGF-1和PSMB5对N2a细胞活性和凋亡的影响。结果:应用不同浓度的ICF-I干预N2a细胞后,PGPH-L活性和CT-L活性均显著增高,其中CT-L活性升高最显著,50 ng/ml和100 ng/ml ICF-1干预后,CT-L活性分别是对照组的1.32倍(P<0.05)和1.49倍(P<0.01),但是IGF-1干预后T-L活性无显著变化;real time RT-PCR结果显示应用100 ng/ml ICF-1作用后,PSMB5和PSMBI的mRNA表达水平显著上升(P<0.05);双荧光素酶结果显示IGF-1能够上调N2a细胞PSMB5转录活性;CCK8实验和Hoechst 3342/PI染色结果表明IGF-1干预使N2a细胞活力增强(P<0.01),调亡细胞减少;相反,敲低PSMBS后,N2a细胞活力减弱(P<0.05),调亡细胞增多;使用IGF-I干预PSMB5-siRNA组,发现PSMB5-iRNA组细胞活力较NC-siRNA组降低(P<0.05)、凋亡细胞增加。结论:ICF-1通过激活CT-L蛋白酶体活性,提高N2a细胞的活力。
- 王必慧曹静牛晓洁王婷玉陆利
- 关键词：蛋白酶体IGF-1细胞活力N2A细胞
- Atg7对小鼠神经干细胞增殖及分化能力的影响
- 目的：探究自噬相关基因Atg7对NSCs增殖及分化潜能的影响，旨在寻找影响NSCs增殖活力及分化能力的关键靶点，为治疗神经退行性疾病提供新的可行性策略。 方法：⑴设计合成靶向Atg7的siRNA序列及其对照siRNA，...
- 牛晓洁
- 关键词：神经细胞细胞分化
- 一种裂环烯醚萜苷类复合物的制备及其提高骨髓间充质干细胞活力的应用
- 本发明属生物医学领域，为解决体外培养的骨髓间充质干细胞BMSCs出现细胞形态、代谢、增殖和分化潜能改变，为促进体外培养的BMSCs增殖，并保持其有较好的分化潜能，提供一种裂环烯醚萜苷类复合物的制备及其提高骨髓间充质干细胞...
- 陆利刘雪芹牛晓洁杨娜赵雪纯赵云鹤陈显久
- 文献传递
