生长激素受体(GHR)作为GH/IGF轴的中心环节,在内分泌调控中发挥重要作用。本实验采用c DNA末端快速扩增法(RACE)技术克隆出花鲈GHR1和GHR2的c DNA全长序列。急性低盐度调控实验设为海水组、半海水组和淡水组。测定了急性低盐度调控24、48、96、144、192h后,花鲈肝脏中GHRs、IGF-1及垂体GH表达情况。结果表明,GHR1 c DNA全长序列2436bp,编码637个氨基酸;GHR2 c DNA全长序列2940bp,编码582个氨基酸。GHR1与GHR2由信号肽、胞外区、跨膜区、胞内区组成,且结构存在差异。脑、肾、鳃中GHR1表达明显高于GHR2;而在肌肉、垂体、肝脏、盲肠、胸腺、心脏中,GHR2表达明显高于GHR1。24h时,各组GHR1表达不变,GHR2、GH、IGF-1显著下降。之后,相对于海水组,淡水组和半海水组GHRs和IGF-1表达升高,而GH下降,GH与GHR负相关。据结果推测,花鲈GHR2可能为SL受体,GH/IGF轴参与低渗调控可能是通过增加GHRs,进而激活下游IGF-1表达而实现。
瘦素(Leptin,Lep)在动物摄食、生长、生殖、免疫、能量平衡等方面具有重要作用,为研究花鲈Lateolabrax maculatus Lep功能,采用c DNA末端快速扩增法(RACE)克隆花鲈Lep A c DNA全长序列。急性低盐度调控试验设置海水组(盐度32)、半海水组(盐度16)和淡水组(盐度0),盐度调控24、48、96、144、192 h后测定花鲈肝脏中Lep A mRNA的表达情况。结果表明:Lep A c DNA全长序列为643 bp,其中开放阅读框483 bp,编码161个氨基酸,其氨基酸序列由信号肽和A、B、C、D 4个α螺旋区域组成;花鲈Lep A氨基酸序列与其他物种同源性较低,但三级结构较为保守;花鲈Lep A主要在肝脏中表达,其次为脑;低盐调控48 h时,半海水组与淡水组Lep A表达无显著性差异(P>0.05),但均显著低于海水组(P<0.05),分别为海水组的33.38%和26.86%。研究表明,急性低盐度调控可降低花鲈Lep A表达水平。
