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刘新: 作品数：13 被引量：31H指数：4; 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金上海市科技兴农重点攻关项目公益性行业(农业)科研专项更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生更多>>

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双组分系统rcsC基因影响禽致病性大肠杆菌的致病性及相关生物学特性被引量：2: 2019年; 【目的】双组分系统Rcs感受外界环境变化,并调控细菌的适应性及生存等。本文探讨Rcs双组分系统传感器激酶RcsC对禽致病性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli,APEC)相关生物学特性及致病性的影响。【方法】采用Red同源重组的方法构建rcsC基因缺失株,并利用互补质粒构建互补株,然后比较野生株、基因缺失株与互补株的生长特性、运动性、生物被膜、凝集沉淀能力、致病力及毒力基因转录水平的差异。【结果】rcsC基因缺失不影响APEC的生长速度,然而,缺失RcsC导致APEC的运动能力升高、生物被膜形成能力降低和凝集能力增强。凝集试验结果显示rcsC基因有助于APEC的凝集沉降。细胞黏附入侵结果表明,rcsC在APEC侵袭DF-1细胞过程中发挥作用,而对黏附能力无影响。动物感染试验结果表明rcsC基因缺失能显著降低APEC的毒力。荧光定量PCR检测结果表明,rcsC基因缺失株中ompA、aatA、fyuA和luxS基因的转录水平均显著降低,而fimC和tsh基因的转录水平显著升高。【结论】RcsC参与调控APEC的运动性、生物被膜形成、凝集沉降和致病力。; 王栋王少辉张焕容刘新许漩易正飞田明星丁铲于圣青; 关键词：禽致病性大肠杆菌双组分系统生物学特性

沙门菌毒力基因多重PCR检测方法的建立及应用被引量：3: 2015年; 通过建立沙门菌不同毒力岛基因的多重PCR,对沙门菌毒力基因进行快速、灵敏的检测。根据GenBank中的序列设计合成16对引物,优化反应条件,建立了4组多重PCR,通过倍比稀释模板检测多重PCR的敏感性。利用建立的多重PCR对124株沙门菌进行毒力基因分布检测,验证多重PCR的实用性。电泳结果显示,多重PCR体系可有效扩增出每个目的基因。4组多重PCR体系的DNA敏感性分别为50、10、50、100pg;菌液敏感性分别为1×104、1×104、1×105、1×105 CFU。多重PCR与单基因PCR检测沙门菌毒力基因的结果一致。结果表明,本研究建立的多重PCR可有效检测沙门菌毒力岛基因,特异性强,灵敏度高,耗时短;还可用于沙门菌毒力基因的鉴定及分子流行病学调查。; 杨登辉王少辉汪洋赵益超韩先干孟庆美刘新丁铲程相朝于圣青; 关键词：沙门菌毒力基因多重PCR

VI型分泌系统2核心组分VgrG对禽致病性大肠杆菌致病性的影响被引量：6: 2016年; 【目的】构建禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)VI型分泌系统2(Type VI secretion system 2,T6SS2)结构基因vgrG缺失株,研究其对APEC生物学特性及致病性的影响。【方法】通过Red同源重组方法构建DE719菌株vgrG基因缺失株,并利用低拷贝质粒pSTV28构建互补株。比较分析野生株、缺失株与互补株的生长特性、运动性、生物被膜形成能力、黏附侵袭能力、动物致病力等差异。【结果】vgr G基因缺失不影响DE719的生长速度、运动能力及生物被膜形成能力。致病性试验表明缺失vgrG导致体内定殖能力及致病力显著下降,然而对DF-1细胞的黏附能力增强。【结论】T6SS2核心组分VgrG在APEC感染过程中发挥重要作用,为了解APEC的致病作用提供参考。; 刘新王少辉孟庆美韩先干许漩杨登辉丁铲彭大新于圣青; 关键词：禽致病性大肠杆菌

禽致病性大肠杆菌Ⅲ型分泌系统2（ETT2）毒力岛ATPase EivC的功能研究: 本实验室前期研究表明,大肠杆菌Ⅲ型分泌系统2（ETT2）广泛存在于禽致病性大肠杆菌（APEC）,进一步证明APEC是人类ExPEC的毒力基因贮库,可通过禽类及其产品传播给人类,对人类健康及公共卫生造成潜在威胁。ATPas...; 王少辉刘新许漩吴晓君王栋于圣青; 文献传递

Ⅵ型分泌系统2核心组分VgrG对禽致病性大肠杆菌致病性的影响: 禽大肠杆菌病是由禽致病性大肠杆菌(Avian Pathogenic Escherichia coli,APEC)引起的以气囊炎、关节滑膜炎、输卵管炎和腹膜炎为主要特征的传染病.禽致病性大肠杆菌常与其它病原混合感染或继发感...; 刘新王少辉许漩杨登辉王栋丁铲彭大新于圣青

大肠杆菌Ⅲ型分泌系统2（ETT2）广泛存在于禽致病性大肠杆菌: 肠道外致病性大肠杆菌（Extraintestinal Pathogenic E.coli,ExPEC）包括尿道致病性大肠杆菌（Uropathogenic E.coli,UPEC）、新生儿脑膜炎大肠杆菌（Neonatal ...; 王少辉刘新许漩于圣青; 文献传递

禽致病性大肠杆菌Ⅲ型分泌系统2 EivC点突变的构建及其ATPase活性分析被引量：1: 2017年; 为了分析禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)Ⅲ型分泌系统2(E.coli TypeⅢsecretion system2,ETT2)Eiv C ATPase关键活性位点,本研究通过比对分析病原菌ATPase序列,筛选APEC ETT2 Eiv C的关键位点。然后设计点突变引物,通过PCR方法构建Eiv C点突变片段,构建Eiv C点突变重组表达质粒。经IPTG诱导表达后纯化相应蛋白,并检测其ATPase活性。结果显示,Eiv C蛋白包含F0F1 ATPase的保守序列,且具有ATPase活性。测序结果显示Eiv C第175、199、201、233位氨基酸突变成功,融合蛋白获得成功表达与纯化。然而,点突变与野生型Eiv C的ATPase活性差异不具有显著统计学意义。本研究结果表明第175、199、201、233位氨基酸不影响Eiv C的ATPase活性。; 许漩王少辉刘新王栋梁华黄彩兰吴晓君丁铲王桂军于圣青; 关键词：禽致病性大肠杆菌 ATPASE

空泡形成毒素影响禽致病性大肠杆菌的生物学特性及致病性被引量：2: 2015年; 【目的】构建禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)菌株APEC-O1空泡形成毒素(Vacuolating autotransporter toxin,Vat)基因缺失株,研究该基因对APEC-O1生物学特性及致病性的影响。【方法】采用Red同源重组的方法构建vat缺失株,并利用低拷贝质粒p STV28构建互补株,然后比较野生株、vat缺失株与互补株在生长特性、运动性、凝集沉淀能力、生物被膜、致病性等生物学特性的差异。【结果】vat基因缺失不影响APEC-O1的生长速度及抗环境压力能力,但缺失vat导致APEC-O1运动能力增强,而使生物被膜形成能力、凝集沉降能力、致病力、体内存活能力均显著性减弱。【结论】Vat缺失影响APEC-O1运动能力、凝集沉淀能力、生物被膜形成能力及致病力,为全面了解Vat的致病作用提供参考。; 赵益超王少辉杨登辉刘新韩先干田明星丁铲刘宗平于圣青; 关键词：禽致病性大肠杆菌基因缺失生物学特性

不同宿主来源H9N2亚型禽流感病毒生物学特性测定: 引言H9N2亚型禽流感病毒(AIVs)宿主谱广,除了能给家禽业造成严重的经济损失外,其还能感染猪和人等哺乳动物,是一种重要的人兽共患病。我们在对华东地区禽流感病毒监测时,从鸡和其它宿主体内分离到一种新的H9N2亚型重配病...; 朱寅彪杨洋刘新杨达孙志豪陈素娟彭大新刘秀梵

Ⅵ型分泌系统2核心组分ClpB对禽致病性大肠杆菌生物学特性及致病性的影响被引量：5: 2016年; 构建禽致病性大肠杆菌(APEC)Ⅵ型分泌系统2(T6SS2)clpB基因缺失株、互补株,研究clpB基因对APEC生物学特性及致病性的影响。采用Red同源重组系统构建APEC clpB基因缺失株,并利用低拷贝质粒pSTV28构建互补株。比较分析野生株、缺失株与互补株的生长曲线、运动性、生物被膜形成能力、黏附侵袭能力、胞内存活能力、动物致病力等生物学特性的差异。结果显示,clpB基因缺失不影响APEC的生长速度和黏附侵袭能力。然而,缺失ClpB导致APEC运动能力降低、生物被膜形成能力升高、HD-11胞内存活能力降低、体内存活能力及致病力降低。本研究分析了T6SS2核心组分Clp B的作用,为阐述APEC T6SS2致病作用提供了参考。; 王栋王少辉徐凤孟庆美刘新许漩杨登辉韩先干丁铲张焕容于圣青; 关键词：禽致病性大肠杆菌

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