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张新涛
作品数:
3
被引量:9
H指数:1
供职机构:
北京大学生命科学学院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
农业科学
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合作作者
吴鹤龄
北京大学生命科学学院
薛友纺
北京大学生命科学学院
吴立宇
北京大学生命科学学院
韩春
北京大学生命科学学院
尚克刚
北京大学生命科学学院
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灵芝原生质体的分离及其转化
被引量:8
2001年
对灵芝 (赤芝 )进行了原生质体的形成和再生实验 ,研究了渗透压稳定剂、菌龄、酶解条件对原生质体分离的影响 ,以及渗透压稳定剂、培养基对原生质体再生的影响 ;另外还尝试用电穿孔法在灵芝原生质体中进行报告基因 (reportgene) β- gal的转化 ,结果 β - gal在菌丝体中有表达。
张新涛
韩春
吴立宇
薛友纺
尚克刚
关键词:
灵芝
原生质体
小鼠胚胎干细胞中MT-Ⅱ基因的定位改变
被引量:1
1998年
构建了小鼠MT-Ⅱ基因的定位整合载体pMT-Ⅱ6.7,这是一个置换型载体,它包含了6.7kb的与MT-Ⅱ基因及其旁侧序列同源的序列。用电穿孔方法将这一载体转化入小鼠ES细胞Mespu22中,在G418R、GancR的双抗性克隆中,用PCR方法进行筛选,从104个克隆中获得26个阳性克隆;对这26个克隆进行核型分析表明,其中有2个克隆,即克隆5-2和8-4的核型(2n=40,XY)正常率很高,达到84%和88%;进一步用Southern杂交分析,结果证明,在MT-Ⅱ基因位点确实发生了定位整合事件。利用这两个克隆的细胞进行体内、体外分化实验表明,它们具有体内、体外分化能力,进一步进行了嵌合体的制作,现已获得用克隆8-4细胞制作的嵌合体小鼠。
张新涛
于冬梅
吴鹤龄
关键词:
胚胎干细胞
克隆含有MT-Ⅰ和MT-Ⅱ基因的染色体DNA片段及其内切酶图谱的鉴定
1998年
用小鼠MT-ⅠcDNA作为探针,从129小鼠的基因组库中获得含MT-Ⅰ基因的DNA片段。从6.8×105的噬菌斑中挑出4个阳性噬菌体克隆,分别命名为1-1,2-1,1-6和4-3。在这4个克隆中1-1和2-1的阳性信号更强些。应用插入片段的末端引物作为探针进行杂交结合部分酶切的方法,对这2个克隆的插入片段进行了限制性内切酶酶切图谱分析,确定了克隆1-1和2-1的酶切图谱及MT-Ⅰ基因在2个克隆DNA中的位置。并进一步发现和证明了在2个克隆中含有MT-Ⅱ基因。
张新涛
吴鹤龄
关键词:
克隆
染色体
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