鲍洁
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 供职机构：华南师范大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 利用可识别表皮生长因子受体的纳米造影剂进行肝癌细胞MRI显像被引量：1
- 2016年
- 目的探讨人肝癌Hep G2细胞中的分子显像效果及其机制。方法采用靶向表皮生长因子受体(EGFR)的单克隆抗体对超顺磁性氧化铁颗粒(SPIO)颗粒进行靶向修饰。使用EGFR单抗作为一抗,对Hep G2细胞进行EGFR蛋白的S-P免疫组化染色。制成EGFR-Ab-USPIO和对照Ig G-USPIO造影剂,与细胞共孵育后,分别作为EGFR组和对照组。2组细胞加入FITC标记的抗人-Ig G抗体和Hoechst 33258后观察造影剂的肝癌细胞内吞效果,行MRI T_2WI扫描检测造影剂的显影效果。结果免疫组化实验观察到Hep G2细胞膜上高表达EGFR。免疫荧光实验发现,EGFR组细胞中可以观察到大量被绿色荧光染色的造影剂颗粒,而对照组中仅可见蓝染的细胞核。MRI扫描观察到EGFR组细胞中的T_2信号明显低于对照组。结论通过对含有SPIO的MRI造影剂颗粒进行EGFR抗体靶向化,有望实现对肝癌细胞的高效率敏感显像,改善MRI对肝癌的分子显像效果。
- 鲍洁张娟刁竞芳
- 关键词：表皮生长因子超顺磁性氧化铁颗粒核磁共振成像
- siRNA沉默人宫颈癌基因2抑制胆管癌细胞增殖的实验研究被引量：2
- 2015年
- 目的探讨siRNA抑制人宫颈癌基因2(HCCR-2)表达对胆管癌细胞增殖能力的影响。方法分别采用Pcmv6-AC-GFP/HCCR-2-siRNA慢病毒表达载体及空载体Pcmv6-AC-GFP对照质粒感染人胆管癌RBE细胞,建立siRNA组和对照组。采用Western blot法检测HCCR-2蛋白表达。采用MTT法检测胆管癌细胞体外增殖能力,小鼠皮下移植瘤模型检测胆管癌细胞体内增殖能力。两组实验数据比较采用t检验。结果 siRNA组和对照组人胆管癌RBE细胞的HCCR-2蛋白平均相对表达量分别为0.21±0.03、0.70±0.02。与对照组相比,siRNA组的HCCR-2蛋白相对表达量明显减少(t=-8.06,P<0.05)。感染24 h和48 h后,siRNA组人胆管癌细胞测得的吸光度(A)值分别为0.05±0.01、0.16±0.01,明显小于对照组的0.11±0.02、0.39±0.06(t=-8.80,-11.31;P<0.05)。皮下成瘤模型生长至30 d时,siRNA组小鼠的肿瘤体积为(106±28)mm3,明显小于对照组的(516±24)mm3(t=-29.80,P<0.05)。结论 siRNA沉默HCCR-2基因表达可抑制胆管癌细胞的增殖能力。
- 王晶鲍洁郭朋姚娣黄浩何科
- 关键词：胆管肿瘤细胞增殖小鼠
- 利用靶向表皮生长因子受体的磁性纳米载体进行肝癌细胞基因治疗的效果观察
- 2016年
- 目的本研究采用靶向表皮生长因子受体(EGFR)的单克隆抗体对磁性纳米基因载体颗粒进行靶向修饰后进行针对肝癌的基因治疗,观察其对肝癌细胞HepG2的基因治疗效果。方法制备靶向EGFR的SPIO磁性纳米基因载体。对肝癌细胞HepG2进行EGFR免疫荧光染色证明其在细胞膜上的表达。以Lipofectamine^(TM) 2000推荐质粒用量的1/20进行分组转染,EGFR-Ab-Poly MAG100基因载体组作为(EP)组;Lipofectamine^(TM) 2000基因载体组作为(LF)组;未转染空白对照细胞作为(NC)组。荧光显微镜观察纳米造影剂的细胞内吞效果。荧光实时定量PCR检测目的基因mRNA表达。western blot法进行蛋白表达鉴定。四甲基偶氮唑盐法检测基因治疗效果。HCCR-2 mRNA、HCCR-2蛋白和Ki67蛋白表达水平数据、A值的比较采用单因素方差分析和t检验。结果免疫荧光法染色观察发现,肝癌HepG2细胞膜高表达EGFR蛋白。磁性纳米基因载体有效链接EGFR抗体。EP组细胞中质粒大量进入HepG2细胞,质粒内吞量大于LF组和NC组。EP组HCCR2 mRNA的相对表达量为(11.25±0.23)%,相对表达量明显低于NC组,差异具有统计学意义(t=23.57,P=0.00)。EP组HCCR2蛋白的相对表达量为(0.13±0.02),明显低于NC组的0.62±0.05,差异具有统计学意义(t=29.31,P=0.00)。EP组Ki67蛋白的相对表达量为(0.22±0.04),明显低于NC组的(0.83±0.07),差异具有统计学意义(t=18.88,P=0.00)。转染24 h、48 h后,EP组的A值明显低于NC组,差异具有统计学意义(t=-22.02,-34.73,P=0.00,0.00)。结论采用EGFR单克隆抗体修饰后的磁性纳米基因载体颗粒,可以实现对肝癌细胞的高效基因治疗,进而实现对肝癌细胞的增殖抑制。
- 鲍洁张娟王晶
- 关键词：基因疗法肝肿瘤
- 微小RNA-101通过USP22抑制人肝癌MHCC97H细胞的上皮-间质转化功能被引量：4
- 2017年
- 目的研究微小核糖核酸(miR)-101对人肝细胞癌(肝癌)MHCC97H细胞的上皮-间质转化功能的影响及其相关机制。方法 MHCC97H肝癌细胞株分别转染miR-101 mimics和negative control mimic,分别作为M101组、NCM组,并设立未转染对照(control)组,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组细胞miR-101含量。Transwell实验检测3组细胞迁移能力和侵袭能力。Western-blot法检测3组细胞vimentin、α-catenin、E-cadherin和USP22表达水平。双荧光素酶实验检测miR-101与USP22的关系。结果 M101组miR-101的表达水平明显上调,表达水平约为control组的761倍(P<0.05)。M101组迁移细胞数量明显低于control组的[(15.7±1.6)个比(94.1±1.8)个,P<0.05]。M101组侵袭细胞数量明显低于control组的[(9.1±0.4)个比(51.6±0.9)个,P<0.05]。M101组细胞vimentin蛋白表达量明显降低,α-catenin及E-cadherin蛋白表达量明显升高,USP22蛋白表达量明显降低。双荧光素酶检验结果显示USP22为miR-101的下游靶基因。结论 miR-101可能通过降低下游靶基因USP22水平影响EMT相关蛋白表达,抑制MHCC97H肝癌细胞的上皮-间质转化功能。
- 鲍洁张娟王晶
- 关键词：上皮-间质转化
