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张海峰: 作品数：26 被引量：47H指数：4; 供职机构：苏州大学更多>>; 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目安徽省高校省级自然科学研究项目江苏省自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学理学轻工技术与工程更多>>

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mING基因的腺病毒载体的构建与表达被引量：5: 2006年; 目的构建鼠ING4(肿瘤生长抑制因子4)的腺病毒载体,获得鼠ING4(mING4)重组腺病毒子,为ING4进行肿瘤的基因治疗奠定基础。方法以pcDNA3.0-mING4重组质粒为模板,PCR扩增mING4,酶切连接到带有GFP标记的pAdTrack-CMV质粒上,PmeI线性化重组质粒pAdTrack-CMV-mING4,与腺病毒质粒pAdeasy-1共转化BJ5183细菌,获得重组腺病毒表达载体pAdeasy-1-pAdTrack-CMV-mING4,经PacI线性化后转染293细胞,收获腺病毒重组病毒子,RT-PCR鉴定,并用MTT法检测mING4对肝癌细胞SMMC7721的作用。结果成功构建mING4的重组腺病毒表达载体pAdeasy-1-pAdTrack-CMV-mING4,获得了mING4重组病毒子。结论mING4的重组腺病毒表达载体可抑制SMMC7721细胞的生长。; 章春花张海峰盛伟华王金志叶震敏杨吉成缪竞诚; 关键词：腺病毒载体

一种连续式牛角瓜纤维提取装置及其使用方法: 一种连续式牛角瓜纤维提取装置及其使用方法，包括风机、微波发生器、进料斗、微波箱、声控感应器、纤维收集管道、复合式纤维收集箱、废料输送带、收集箱、真空泵和控制系统；进料斗设置在微波箱顶部；微波箱底部设置支架；风机设置在微波...; 李刚李毓陵陈鹏许建初张海峰黄笛赵泽宇

(m→h)ING4腺病毒载体构建和对A549肺癌细胞体内外生长的抑制效应: 研究携带人源化改造的(m→h)ING-4(肿瘤生长抑制因子4)基因的腺病毒表达载体对A549肺癌细胞体内外生长的抑制效应,为进一步开展肿瘤临床基因治疗奠定基础.以pcDNA3.0-mING-4重组质粒为模板,通过定点突变...; 张海峰章春花盛伟华王金志谢宇锋缪竞诚杨吉成; 关键词：腺病毒载体肺癌细胞生长抑制; 文献传递

ING4基因对人胃癌细胞SGC-7901生物行为的影响被引量：11: 2008年; 目的:研究人ING4对人胃癌细胞SGC-7901的影响,探讨其作用机制。方法:将重组腺病毒质粒pAd-ING4用PacI线性化,经脂质体转染QBI-293A细胞,获得重组病毒Ad-ING4。Ad-ING4感染人SGC-7901细胞,RT-PCR及Western blot分析ING4和p21表达,MTT法检测Ad-ING4对细胞生长的影响,激光共聚焦显微镜检测细胞凋亡。结果:Ad-ING4感染后,SGC-7901细胞中有ING4 mRNA和蛋白质表达,细胞生长受到明显抑制,与野生型SGC-7901细胞相比,p21表达水平增高,细胞凋亡率明显增高,P<0.05。结论:ING4可通过上调p21表达发挥抑制SGC-7901细胞生长、诱导细胞凋亡的作用。; 黄俊琼孙万邦张海峰杨吉成; 关键词：ING4 AD-ING4 P21

rhIL-18在不同原核表达系统中的表达和活性比较被引量：2: 2006年; 目的研究rhIL-18包涵体、可溶性(His融合型)两种形式蛋白的生物学活性。方法从已构建的pBV220-IL-18重组质粒中双酶切获取IL-18基因,回收后重组至pLHis质粒构建重组载体。42℃热诱导pBV220-IL-18表达,产生rhIL-18包涵体,IPTG诱导pLHis-IL-18表达,产生可溶性rhIL-18蛋白。两者分别刺激人外周血单个核细胞,ELISA法检测上清中IFN-γ的含量。结果两种重组表达载体均表达产生了rhIL-18,且均可刺激人PMBC上清产生IFN-γ,可溶性rhIL-18刺激人外周血产生IFN-γ的能力高于包涵体形式的rhIL-18。结论可溶性rhIL-18具有比包涵体形式的rhIL-18更强的活性,这为IL-18原核表达基因工程药物的开发提供了新思路。; 张海峰李丽娥盛伟华缪竞诚谢宇锋王金志杨吉成; 关键词：IL-18 包涵体可溶性蛋白 IFN-Γ

腺病毒介导的生长抑制基因4对ECV304细胞体外生长及分泌血管内皮生长因子的影响被引量：1: 2011年; 目的:检测腺病毒介导的生长抑制基因4(adenovirus-mediated inhibitor of growth family member 4,Ad-ING4)感染后ECV304细胞体外生长及分泌血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响,探讨ING4抑制肿瘤生长的可能机制。方法:构建ING4腺病毒载体,用MTT法检测Ad-ING4感染后ECV304细胞体外生长影响,ELISA检测VEGF的分泌情况。结果:Ad-ING4感染后第3天和第4天ECV304细胞体外生长均受到抑制(P<0.01),第4天时抑制率达63.6%,VEGF分泌受到抑制。结论:ING4能抑制ECV304细胞生长及VEGF分泌。Ad-ING4能抑制血管内皮细胞生长和血管的生成,从而可抑制体内肿瘤的生长。; 张海峰盛伟华缪竞诚陈卫东杨吉成; 关键词：腺病毒感染血管内皮生长因子血管生成

雷公藤内酯醇抑制IL-1β、IL-6、TNF-α过表达对小鼠溃疡性结肠炎治疗作用的研究: 第一部分趋化因子IL-1β、IL-6在溃疡性结肠炎中的表达及其意义　　目的:探讨IL-1β、IL-6在溃疡性结肠炎中的表达及意义。　　方法:纳入2012年12月-2015年12月南通大学附属医院收治的42例活动期溃疡性结...; 张海峰; 关键词：溃疡性结肠炎雷公藤内酯醇 TNF-Α蛋白

重组人IL-18在大肠杆菌中的表达及其抗肿瘤作用被引量：2: 2006年; 目的:获取rhIL-18原核表达产物并研究其活性。方法:用本室构建的含基因重组表达载体PBV220-IL-18的大肠杆菌DH5α,经42℃热诱导表达和包涵体提取纯化后获取rhIL-18蛋白;采用ELISA试剂盒检测rhIL-18刺激PBMC分泌IFN-γ的活性及MTT法检测其对NK细胞杀伤K562细胞自然杀伤活性;同时用荷瘤小鼠模型检测其体内抗瘤功能。结果:诱导含重组表达载体PBV220-IL-18的大肠杆菌DH5α后,蛋白电泳显示出一条相对分子量(Mr)为18 000的蛋白条带;10μgrhIL-18蛋白体外刺激PBMC后,其分泌IFN-γ的能力与对照组相比提高了8倍,细胞毒性提高3倍;同时rhIL-18蛋白能明显抑制肿瘤生长和延长荷瘤鼠生存期。结论:获得了有免疫调节功能和抗肿瘤活性的rhIL-18蛋白,为今后IL-18重组产物的研制和开展肿瘤的生物治疗提供了实验依据。; 张海峰盛伟华缪竞诚谢宇锋李丽娥马丽丽庄文卓杨吉成; 关键词：白介素18 免疫调节功能抗肿瘤活性

IL-31重组腺病毒载体的构建及鉴定被引量：2: 2008年; 目的构建并鉴定人白细胞介素31(IL-31)重组腺病毒Ad-IL-31,为下一步IL-31功能研究奠定基础。方法以pGEM-T-IL-31为模板扩增IL-31基因,将其克隆到腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,PmeⅠ线性化后与腺病毒骨架质粒共转化BJ5183细菌,获得重组腺病毒质粒pAd-IL-31,经PacⅠ线性化后转染QBI-293A细胞,荧光显微镜下观察细胞内荧光,测定病毒效价,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹(westernblot)分析细胞内IL-31信使核糖核酸(mRNA)和蛋白质的表达。结果经双酶切及基因扩增仪鉴定,重组穿梭质粒和重组腺病毒质粒均见500bp插入片段,测序结果和基因库中的基因序列一致;重组病毒效价为2.6×108pfu/ml;重组病毒感染后,QBI-293A细胞中有IL-31mRNA和蛋白质表达。结论成功构建IL-31重组腺病毒载体,并在QBI-293A细胞中表达,为进一步研究IL-31的功能奠定了基础。; 黄俊琼张海峰章春花胡永林; 关键词：IL-31 重组腺病毒

人源化改造的鼠ING4基因及其腺病毒表达载体: 本发明涉及人源化改造的鼠ING4(肿瘤生长抑制因子4)基因，以及携带该基因的重组腺病毒(人腺病毒5型Ad－ING4－ΔGFP)，保藏单位：中国典型培养物保藏中心，保藏号：CCTCC－V200701)。本发明还涉及人源化改...; 杨吉成张海峰; 文献传递

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