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miRNA-140、MMP-3在OA关节滑液中的表达及相关性研究被引量：6: 2015年; 目的比较miRNA-140和MMP-3在骨性关节炎(OA)组与非OA组关节滑液中的表达,探究miRNA-140和MMP-3与OA的相关性。方法采用实时定量PCR技术检测miRNA-140、MMP-3在OA组(n=65)与非OA组(n=65)关节滑液中的表达水平,并运用Spearman相关分析分析miRNA-140与MMP-3的相关性。结果组间比较显示OA组miRNA-140的表达显著低于非OA组(P<0.05),MMP-3的表达明显高于非OA组(P<0.05)。OA组内各因子之间相关分析显示,miRNA-140和MMP-3呈显著负相关性(r=-0.693、-0.720,P<0.05)。结论相对于非OA病变,OA组关节滑液中miRNA-140低表达,MMP-3高表达,两者之间呈负相关性。; 邹磊周圆家饶峰王琰丁浩陈福宇史晨辉王维山; 关键词：骨性关节炎基质金属蛋白酶-3 小RNA 关节滑液

基于FRET技术MMP3生物传感器载体的构建及鉴定: 目的：本研究是在生理状态下动态监测活细胞中MMP3的时空信息.方法：首先是ECFP-MMP3-YPetbiosensor载体的构建及鉴定，然后转染293T细胞24小时后观察转染效率和FRET情况.在荧光显微镜下，应用Me...; 饶烽王琰崔钢华刘伟史晨辉王维山; 关键词：MMP3 生物传感器

基于FRET技术MMP3生物传感器载体的构建和鉴定: 2016年; 目的:探讨基质金属蛋白酶3(MMP3)生物传感器载体的构建,阐明MMP3在活细胞中表达的时空信息。方法:构建定位于细胞膜表面的ECFP-MMP3-YPet生物传感器载体并进行鉴定;转染293T细胞24h后观察转染效率;加尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)刺激293T细胞,运用荧光共振能量转移(FRET)技术在共聚焦显微镜下观察MMP3生物传感器载体的荧光共振能量转移情况ECFP-MMP3-YPet biosensor。结果:成功构建ECFP-MMP3-YPet biosensor;PCR和双酶切鉴定,MMP3-YPet约780bp,转染293T细胞后MMP3生物传感器在胞质较均匀分布,转染效率约40%。uPA刺激293T细胞后,胞质和胞核内FRET比值逐渐降低,约30min时达到最小值,随后恢复正常。结论:基于FRET构建的MMP3生物传感器可以敏感而准确地监测活细胞中MMP3的表达情况。; 饶烽崔钢华王琰刘伟曹薇薇史晨辉王维山; 关键词：荧光共振能量转移基质金属蛋白酶3 生物传感器

氨甲环酸与纤维蛋白胶在关节置换术后疗效比较的Meta分析被引量：3: 2016年; 目的比较氨甲环酸与纤维蛋白胶在关节置换术中应用的有效性和安全性。方法通过检索PubMed,Embase,Cochrane Library,CNKI,CBM,万方等数据库有关关节置换术应用氨甲环酸和纤维蛋白胶的文献,由2位研究者按照纳入和排除标准独立筛选文献,采用RevMan 5.2软件对提取的数据进行统计学分析。结果共纳入4个随机对照试验,2个回顾性试验,共449例患者。Meta分析结果显示:氨甲环酸与纤维蛋白胶在总失血量上差异无统计学意义[MD=-192.24,95%CI(-496.16,111.69),P=0.22],血红蛋白丢失量差异无统计学意义[MD=-0.49,95%CI(-1.19,0.20),P=0.16],输血率差异具有统计学意义[OR=0.30,95%CI(0.18,0.52),P<0.01],术后并发症差异无统计学意义[OR=1.20,95%CI(0.36,3.99),P=0.76]。结论氨甲环酸在控制关节置换术术后输血率方面比纤维蛋白胶更加有效。; 饶烽丁浩王琰陈福宇史晨辉王维山; 关键词：氨甲环酸纤维蛋白胶 META分析

鸸鹋股骨头骨坏死标本微观结构改变特征及机制研究: 目的：建立一种能够模拟人类股骨头骨坏死早期表现的鸸鹋股骨头坏死模型，研究鸸鹋股骨头坏死标本中不同区域内的骨微观结构的特征，探讨股骨头骨坏死的原因，以寻求安全有效的临床保头治疗的方案。　　方法：以成年鸸鹋为研究对象，用局部...; 王琰; 关键词：股骨头坏死保头治疗; 文献传递

基于FRET技术MMP-9生物传感器的构建及鉴定被引量：1: 2016年; 为了构建包含有增强青色荧光蛋白-MMP-9-黄色荧光蛋白(ECFP-MMP-9-YPet)融合蛋白的真核表达质粒MMP-9生物传感器,利用原有质粒Src biosensor和通用载体p MD-18T,通过基因工程的方法构建ECFP-MMP-9-YPet生物传感器并进行鉴定,转染293T细胞24 h后观察转染效率,然后加MMP-3刺激293T细胞,运用荧光共振能量转移(flurorescence resonance energy transfer,FRET)技术在荧光显微镜下观察MMP-9生物传感器的荧光共振能量转移现象。PCR和双酶切鉴定显示,ECFP-MMP-9-YPet生物传感器构建成功,293T细胞转染效率约40%。用免疫荧光法检测MMP-9生物传感器融合蛋白在293T细胞表面膜表达,用MMP-3刺激转染细胞可以检测到FRET现象。结果表明,基于FRET构建的MMP-9生物传感器可以敏感而准确地监测活细胞中MMP-9的表达情况。; 王琰饶烽崔钢华刘伟曹薇薇史晨辉王维山; 关键词：荧光共振能量转移 MMP-9 生物传感器骨关节炎

尿激酶型纤溶酶原激活物生物传感器的构建及鉴定: 2015年; 目的:构建含有增强型青色荧光蛋白-尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)作用底物(substrate)-黄色荧光蛋白变体(YPet)融合蛋白的真核表达载体(ECFP-uPA substrate-linker-YPet),即uPA的生物传感器。方法:以Src-biosensor为模板,Primer Premier 5.0软件设计YPet引物,设计时5′端引入uPA底物序列及Linker,两端连接酶切位点及保护碱基。以pMDTM-18T为中间载体,通过基因工程方法构建含有ECFP-uPA substrate-linker-YPet的真核表达载体。然后转染293T细胞,24h后观察转染效率和融合蛋白表达情况,在荧光显微镜下,应用MetaFlour FRET 4.6软件观察并测量uPA生物传感器荧光共振能量转移(FRET)。结果:经过PCR和双酶切鉴定,克隆片段和酶切片段均与uPA substrate分子大小相符。细胞转染后转染效率达40%。免疫荧光检测,uPA生物传感器在293T细胞膜表达,用重组人uPA(rhuPA)刺激转染细胞可以检测到FRET现象。结论:成功构建uPA生物传感器,该生物传感器能够作为活细胞分子探针用于研究uPA的时空变化。; 崔钢华饶烽王琰曹薇薇刘伟王维山史晨辉; 关键词：尿激酶型纤溶酶原激活物生物传感器荧光共振能量转移骨性关节炎

纤维蛋白胶对全膝关节置换术后疗效影响的Meta分析: 2017年; 目的:探讨纤维蛋白胶(fibrin glue,FG)在全膝关节置换术(total knee arthroplasty,TKA)中应用的有效性和安全性。方法:通过检索Pub Med、Embase、Cochrane Library、CNKI、CBM、万方等数据库,同时手工检索图书馆馆藏期刊,由2位研究者按照纳入和排除标准独立筛选高质量的随机对照试验(randomized controlled trials,RCTs)文献,采用Rev Man 5.2软件对提取的数据进行统计学分析。结果:共纳入11个RCTs,共973个TKA患者。Meta分析结果显示:与对照组相比,纤维蛋白胶可以减少TKA术后引流(MD=-227.36,95%CI=-359.47^-95.25,P=0.001);血红蛋白丢失量(MD=-0.63,95%CI=-0.79^-0.46,P=0.000);总失血量(MD=-235.59,95%CI=-453.31^-17.86,P=0.030);输血率(OR=0.44,95%CI=0.31~0.61,P=0.000);且不增加术后并发症的发生(OR=0.94,95%CI=0.61~1.45,P=0.790)。结论:FG可以有效减少TKA术后引流量,总失血量,血红蛋白丢失量,输血率但不增加术后并发症的发生。; 丁浩饶烽王琰陈福宇史晨辉王维山; 关键词：全膝关节置换术纤维蛋白胶 META分析

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王琰