刘巧荣
- 作品数：26 被引量：60H指数：5
- 供职机构：北京世纪元亨动物防疫技术有限公司更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 一种小反刍兽疫疫苗株和野毒株差异性合成肽及其应用
- 本发明“一种小反刍兽疫疫苗株和野毒株差异性合成肽及其应用”涉及小反刍兽疫病毒多肽合成物领域。所述小反刍Nigeria 75/1疫苗株合成肽，其包括氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的肽段I。所述小反刍野毒株合成肽，其...
- 陈西钊孙明刘巧荣田新生申屠芬琴孔汉金
- 文献传递
- 宠物犬感染布鲁菌的诊断报告被引量：1
- 2017年
- 布鲁菌病是由布鲁菌引起的一种人兽共患传染病,以侵害生殖系统为主要特征的传染性疾病。主要表现为睾丸炎、附睾炎、流产、不育等特征。犬种布鲁菌属于粗造型菌株,主要引起犬类发病,导致母犬流产、公犬睾丸炎等。流产后的母犬常表现为子宫内膜炎,出现屡配不孕。公犬感染后,以睾丸炎、附睾炎、前列腺炎、包皮炎等。潜伏期一般为两周至半年。现将1例宠物犬感染布鲁菌病的诊断情况报告如下。
- 孙明刘巧荣乔明明张谦陈西钊
- 关键词：布鲁菌宠物犬人兽共患传染病传染性疾病子宫内膜炎睾丸炎
- 猪伪狂犬病毒gB基因在大肠杆菌中的分段表达被引量：5
- 2012年
- 目的分段表达伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)gB基因,用于PRV疫苗免疫抗体评估试剂盒研究。方法分析gB抗原表位,设计4对特异性引物,从PRV新疆分离株中扩增gB基因的4个片段,分别命名为gB-1、gB-3、gB-4和gB-5基因,克隆到pGEM-T-easy载体并测序。再将4个gB基因片段融合到pGEX-6P-1原核表达载体中,表达并纯化。Western Blotting进行重组蛋白的抗原性检测。以纯化的重组蛋白为抗原建立间接ELISA方法,检测猪血清临床样品。结果构建的4种表达质粒均可在大肠杆菌中表达,经SDS-PAGE分析,表达分子量分别为75.05、53.86、49.96和49.72×103Da,其中gB-3、gB-4和gB-5表达量较高,表达产物主要存在于包涵体中。Western Bloting鉴定显示,4种融合蛋白均可被猪伪狂犬阳性血清特异识别。以gB-3、gB-4和gB-5建立的ELISA方法与IDEXX公司的gB-ELISA试剂盒符合率分别为40.9%、81.8%和81.8%。结论本研究成功表达了PRV的gB-1、gB-3、gB-4和gB-5重组蛋白,gB-3、gB-4和gB-5表达量较高;其中以gB-4和gB-5建立的间接ELISA方法与IDEXX公司的符合率较高。
- 包新奇黄绍华刘巧荣孙明杨璐申屠芬琴康立平陈西钊
- 关键词：PRVGBELISA
- 一种狂犬病病毒重组抗原和制备方法及其用途
- 本发明涉及狂犬病应用技术领域，具体涉及一种狂犬病病毒重组抗原和制备方法及其用途，包括如下(a)‑(c)中的一种：(a)、在N端到C端方向依次包括如氨基酸序列片段N、G以及P；(b)、在(a)中的氨基酸序列片段N、G和/或...
- 刘巧荣陈西钊马君
- 北京地区猪圆环病毒3型感染的检测及基因组遗传变异分析被引量：10
- 2018年
- 旨在了解北京地区猪圆环病毒3型(porcine circovirus type 3,PCV3)的流行现状、分子生物学特征和遗传变异规律,为PCV3的防控提供参考依据。采集北京地区规模化养殖场73份临床表现为繁殖障碍和呼吸系统疾病的组织样品,对其中的PCV3进行检测和测序。根据PCV3全基因组序列设计3对特异性引物,从患PDNS的断奶仔猪内脏组织中扩增PCV3全基因序列片段,克隆到pMD19-T载体中,经测序、拼接获得PCV3全长cDNA序列,利用DNAStar和DNAMAN生物软件对全基因组进行遗传变异分析。结果:北京地区PCV3感染率为30.1%(22/73),PCV3全基因组长2 000bp,GenBank序列登录号为MG546667,将该病毒命名为PCV3/CN/BJ-YH2016。其基因组有3个开放阅读框(ORF),其中两个ORF编码的蛋白与圆环病毒的复制相关蛋白(replication-associated protein,Rep)和衣壳蛋白(capsid protein,Cap)同源。PCV3/CN/BJ-YH2016与NCBI上30株PCV3基因组序列相似性为98.6%~99.3%,Rep蛋白氨基酸序列与美国毒株PCV3-US/MO2015(KX778720)的相似性最高(为100%),与中国毒株PCV3/CN/Guangdong-SG1/2016(MF589105)相似性最低(为95%),有16个氨基酸变异,全部集中在5-23位氨基酸。Cap蛋白氨基酸序列与美国毒株2164(KX458235)的相似性为100%,与其他毒株均有1~4个氨基酸发生变异,其中与PCV3-US/MO2015毒株相比变异位点分别位于24、26、56、100aa。以上试验结果表明,成功从患断奶仔猪多系统衰竭综合征仔猪体内克隆了PCV3全基因,并完成了序列分析,这些数据将为研究这种新型病毒——PCV3的遗传变异和流行病学特征提供分子生物学依据。
- 孙明马君乔明明刘巧荣田新生杨欣艳孙胜永陈西钊
- 关键词：全基因
- 一种O型口蹄疫病毒人工重组抗原及其制备与应用
- 本发明公开一种O型口蹄疫病毒人工重组抗原及其制备与应用，属于生物制剂领域。所述人工重组抗原的氨基酸序列包含如Seq ID No.4所示的肽段。所述人工重组抗原的氨基酸序列具体如Seq ID No.5所示。本发明还请求保护...
- 孙明田克恭王宏伟王传彬遇秀玲陈西钊曹振刘巧荣
- 文献传递
- 大熊猫源犬瘟热病毒基因组遗传特征分析被引量：13
- 2015年
- 【目的】对首次暴发的大熊猫源性犬瘟热病毒(panda derived-canine distemper virus,P-CDV)全基因组进行克隆测序,以了解大熊猫源CDV的全基因组遗传变异情况,进一步追踪感染源,为大熊猫犬瘟热防控提供理论依据。【方法】根据Gen Bank公布的CDV全基因组序列设计17对特异性引物,利用RT-PCR技术,从感染犬瘟热病毒的大熊猫肺渗出液中分片段扩增CDV全基因序列,并克隆到p MD19-T载体中;经测序、拼接,获得第一个P-CDV全长c DNA序列;利用DNAman生物学分析软件分别对全基因组序列、H蛋白基因序列、F蛋白基因序列、P蛋白基因序列、M蛋白基因序列等进行遗传变异分析,构建系统进化树。【结果】经序列测序和拼接,大熊猫源犬瘟热病毒全基因组长15 690 nt,Gen Bank登录号为KP677502,主要编码6种蛋白,分别是N蛋白、P蛋白、M蛋白、F蛋白、H蛋白和L蛋白,在各个基因及间隔区中未发现碱基插入和缺失。遗传进化分析显示,P-CDV全基因组与20株代表性CDV全基因组序列同源性为91.5%—98.7%,P-CDV与强毒株MKY-KM08(HM852904)、PS、HLJ1-06(JX681125)、Hebei(KC427278)以及AC96I-H358(AB753776)在一个大的分支上,与PS株(JN896331)亲缘关系最近,同源性为98.7%,与标准野毒株Strain A75-17(AF164967)同源性为95.7%,与疫苗株CDV3(EU726268)亲缘关系较远,同源性为91.5%。H蛋白氨基酸序列分析和系统进化树表明,大熊猫源犬瘟热病毒属于强毒株,基因型为Asia-I型。P-CDV各蛋白基因与20株代表性的毒株相比有9处氨基酸发生了变异,与Gen Bank上现有的CDV序列相比,其中3处是独有的,分别是:F蛋白基因的208位由N(Asn,天冬酰胺,强毒株多为N)或K(Lys,赖氨酸,弱毒株多为K)变成了S(Ser,丝氨酸),第215位由S变成了A(Ala,丙氨酸),P蛋白基因的58位由Q(Gln,谷氨酰胺)变成K(Lys,赖氨酸)。【结论】成功克隆了大熊猫源犬瘟热病毒的全基因,并完成了序列分析,发现了在F、P基因�
- 金艺鹏刘巧荣孙明乔雁超乔明明刘伯华林德贵陈西钊
- 关键词：犬瘟热病毒大熊猫全基因组测序
- 感染CDV的犬病料N、H、F基因的克隆与序列分析被引量：4
- 2011年
- 目的了解病料中犬瘟热病毒(CDV)的变异情况,为犬瘟热的预防与治疗提供理论依据。方法采用RT-PCR方法对犬病料中CDV的血凝素蛋白(H)、融合蛋白(F)和核衣壳蛋白(N)基因进行扩增,将扩增产物克隆到pGEM-T-easy载体中测序,并进行序列分析。结果测定一株CDV的H、F和N基因大小分别为1863 bp、1653 bp和2235 bp。同源性分析表明,未发现碱基的插入和缺失。该病毒的H、F和N基因分别与国内强毒株BJ080127株的H基因、GN株的F基因和HL株的N基因亲缘关系最近,氨基酸同源性分别为97.3%、97.7%和99.3%。与国外标准野毒株A75-17在核苷酸水平上同源性依次为94.4%、93.8%和97.2%,与疫苗株CDV3在核苷酸水平上同源性分别为88.5%、88.8%和93.9%。系统进化树表明该病毒与国内强毒株在同一谱系。糖基化分析显示,该病毒在F基因3～5位氨基酸处多出1个糖基化位点。结论本研究从犬病料中成功克隆了犬瘟热病毒血凝素蛋白、融合蛋白和核衣壳蛋白,在F基因中新增了一个糖基化位点,为犬瘟热的遗传变异和流行学研究提供了分子生物学依据。
- 刘巧荣包新奇孙明王芳乔明明李佳陈曦秦亚嫚陈西钊
- 关键词：犬瘟热融合蛋白基因核衣壳蛋白基因
- 一株犬细小病毒毒株CPV-YH及其应用
- 本发明提供一株犬细小病毒毒株CPV‑YH，属于微生物技术领域。所述犬细小病毒毒株CPV‑YH的保藏号为CGMCC NO.12990。本发明还提供所述的犬细小病毒毒株CPV‑YH在制备犬细小病毒疫苗方面的用途，以及在制备犬...
- 孙明邓小雨张丽马永缨刘巧荣卢会英刘伯华杨欣艳陈西钊
- 文献传递
- 用于检测禽流感病毒H7亚型的引物对、探针、试剂盒及检测方法
- 本发明属于病毒检测领域，涉及一种用于检测禽流感病毒H7亚型的引物对、探针、试剂盒及检测方法。本发明所述的引物对其中一条引物包含SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列，另一条引物包含SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列，...
- 孙明陈西钊乔明明陈南华陈曦刘巧荣
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