全炎铭
- 作品数：12 被引量：17H指数：3
- 供职机构：北京三元集团有限责任公司更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项黑龙江省杰出青年科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 禽源U6启动子介导鸡马立克氏病病毒gI、gE基因特异siRNA的筛选及干扰活性鉴定
- 2011年
- 为筛选鸡马立克氏病病毒(MDV)gI、gE基因特异性siRNA,本研究以鸡胚成纤维细胞(CEF)的DNA为模板,扩增禽源cU6-3启动子序列,并合成针对gI和gE基因各5个靶位点的10条shRNA序列。通过重叠PCR将cU6-3启动子与shRNA融合扩增制备shRNA表达盒,将制备的shRNA表达盒分别与重组质粒pEGFP-gI或pEGFP-gE共转染CEF细胞,并根据荧光显微镜观察和流式细胞仪检测结果评价siRNA抑制融合荧光蛋白表达的效率。结果表明,gI和gE基因的抑制效率为10%～80%。分别将其中抑制效率最高的一条shRNA插入pGEM-T载体中构建重组表达质粒pcU6-shgI735和pcU6-shgE936,通过不同细胞系稳定干扰试验和抑制病毒复制试验评价其干扰活性。结果显示,pcU6-shgI735和pcU6-shgE936能够明显抑制融合蛋白的表达及MDV在CEF细胞中的增殖,并且禽源U6启动子构建的表达盒在禽源细胞(DF1)中的活性比在哺乳动物细胞(Vero、MDCK)的活性高1.21～1.45倍。本研究鉴定获得了gI和gE基因的特异性siRNA,筛选出能够抑制MDV复制的靶位点,为MDV基因的功能和抗MDV病毒研究奠定了基础。
- 全炎铭崔红玉赵妍赵晓岩石星明高宏博闫帅张晓艳王玫王云峰
- 关键词：鸡马立克氏病病毒SIRNA
- 我国猪伪狂犬病的最新流行动态与防控措施
- 文章重点分析了猪狂犬病的最新流行趋势和防控现状,针对该病流行新趋势、防疫存在的问题,提出了在伪狂犬病毒肆虐的情况下如何改善防治体系,如何加快对新型病毒的研究以及如何进行有效疫苗的研制。
- 全炎铭
- 关键词：猪伪狂犬病防控措施
- 靶向gI/gE基因RNAi抑制鸡马立克氏病病毒的复制的研究
- 鸡马立克氏病(Marek's disease,MD)是由马立克氏病病毒(MDV)引起的一种免疫抑制性肿瘤疾病。近年来出现很多MDV变异株且毒力有不断增强的趋势,突破了现有疫苗的免疫保护,给养禽业造成了极大的经济损失。RN...
- 全炎铭
- 关键词：鸡马立克氏病病毒体外增殖
- 口蹄疫A型-O型-AsiaⅠ型三联苗和O型-AsiaⅠ型二联苗的免疫效果的对比试验
- 本试验奶牛在相同的饲养管理条件下,分组免疫口蹄疫灭活三联苗(三联苗组)和A型口蹄疫单价苗及O型—Asial型口蹄疫二联苗(二联苗组),连续6个月监测抗体消长变化,结果表明二联苗组产生的O型抗体和三联苗组相当;而亚洲Ⅰ型和...
- 陈华林郭又春贾泽颖刘邓刘修权全炎铭刘莉如孙玉芳
- 关键词：口蹄疫
- 文献传递
- 禽网状内皮增生症病毒gp90基因真核表达及ELISA检测方法的建立被引量：3
- 2010年
- 为建立禽网状内皮增生症病毒(REV)的ELISA检测方法,本研究通过RT-PCR方法扩增gp90基因,构建杆状病毒重组质粒,转化DH10Bac后,通过转座获得重组杆粒,并将其转染Sf9昆虫细胞,SDS-PAGE及western blot分析表明,表达的重组蛋白分子量约为45 ku,具有良好的反应原性。将表达的重组蛋白纯化后包被ELISA反应板,建立检测REV抗体的rgp90-ELISA方法。特异性试验结果表明该方法具有良好的特异性;将该方法与IDEXX公司生产的试剂盒共同检测包括63份已知背景的血清在内的黑龙江省和广东省的临床血清样品共477份,符合率分别为90.5%和86.4%。该方法的建立为禽群REV抗体的监测提供了方便、快捷、准确的技术手段。
- 石星明赵妍王玫张晶魏秀英杨桂花高宏博全炎铭黄婷婷张晓艳崔红玉王云峰
- 关键词：禽网状内皮组织增生症病毒GP90基因真核表达
- 传染性喉气管炎病毒WG株糖蛋白gD基因主要抗原区的表达
- 2011年
- 为表达传染性喉气管炎病毒(ILTV)gD蛋白,根据GenBank中登录的ILTV全基因组序列(EU675324)设计了1对引物,进行gD全基因的PCR扩增,产物经纯化后连接至pGEM-T Easy载体,进行序列测定,采用DNAStar软件分析gD蛋白的抗原性,选择抗原性强的第256～405aa的编码片段设计引物并进行PCR扩增,结果获得截短的gD基因,将其克隆至原核表达载体pET-32a中,并转化E.coli BL21(DE3)。经IPTG诱导后,获得大小为43.5ku的重组蛋白,命名为r-gD。Western-blot分析结果表明,r-gD具有较强的抗原性。
- 魏秀英石星明张晶王玫赵妍胡顺磊崔红玉全炎铭闫帅陈洪岩王云峰
- 关键词：传染性喉气管炎病毒糖蛋白D
- 我国猪伪狂犬病的最新流行动态与防控措施
- 2013年
- 文章重点分析了猪狂犬病的最新流行趋势和防控现状,针对该病流行新趋势、防疫存在的问题,提出了在伪狂犬病毒肆虐的情况下如何改善防治体系,如何加快对新型病毒的研究以及如何进行有效疫苗的研制。
- 全炎铭
- 关键词：猪伪狂犬病防控措施
- 禽网状内皮增生症病毒gp90蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：3
- 2011年
- 为获得分泌抗禽网状内皮增生症病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞,通过表达pET32a-gp90重组蛋白,以纯化的gp90蛋白为抗原,免疫BALB/c鼠,筛选分泌抗REV McAb的杂交瘤细胞株。经过细胞的融合及筛选,共获得能稳定分泌抗REV gp90的McAb细胞系2株,分别命名为A9E8和B3F8。2株细胞培养上清的效价均在1∶4×102以上,腹水效价均在1∶8×103以上。亚型鉴定结果表明,2株皆为IgG型,轻链均为κ链;Western blot及间接免疫荧光结果显示,这2株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体均能识别REV全病毒抗原,与其发生特异性反应,并且不与禽类其他病毒发生反应;病毒中和试验结果表明,获得的单克隆抗体均能REV临床分离株发生中和反应,具有较好的中和活性。利用制备的单克隆抗体建立了REV的间接免疫荧光检测方法,临床病料检测结果表明,该方法与病毒分离及PCR的检测结果基本一致,阴、阳性符合率分别为100%和90%。作者制备了针对REV gp90的McAb,为REV的快速诊断及抗原表位分析与鉴定等奠定了基础。
- 石星明张晶赵妍王玫魏秀英胡顺磊全炎铭闫帅崔红玉王云峰
- 关键词：GP90基因单克隆抗体
- 口蹄疫A-O-亚洲I型三联苗和O-亚洲I型二联苗+A型单价苗的免疫效果对比试验被引量：2
- 2014年
- 本试验奶牛在相同的饲养管理条件下,分组免疫口蹄疫A-O-亚洲I型灭活三联苗(三联苗组)和O-亚洲I型灭活二联苗+A型单价苗(二联苗组),连续6个月监测抗体消长变化。结果表明,二联苗组产生的O型抗体和三联苗组相当;而亚洲I型和A型的平均抗体水平低于三联苗组,抗体持续时间也短于三联苗组;二联苗组A型、亚洲I型抗体合格率在免疫后5个月明显降低,两个试验组奶牛免疫前后产奶量变化均不显著。
- 陈华林郭又春贾泽颖刘邓刘修权全炎铭刘莉如孙玉芳
- 关键词：口蹄疫三联苗二联苗
- 重组火鸡疱疹病毒活载体插入位点US2与USlO的比较研究
- 火鸡疱疹病毒HVT是重组疫苗普遍使用的活载体，并且其基因组US2和US10基因经常被选作目标基因的插入位点。然而，这两个基因对重组HVT疫苗作用的差异仍不清楚。为了比较同一外源基因在这两个不同插入位点形成的重组疫苗的效力...
- 崔红玉王云峰高宏博崔现兰石星明赵妍赵晓岩全炎铭闫帅曾伟伟
- 关键词：火鸡疱疹病毒重组疫苗活载体HA基因
