目的观察激素抵抗型支气管哮喘(简称SR哮喘)患者外周血维生素D水平,探讨维生素D对SR哮喘患者T淋巴细胞JNK/AP-1和糖皮质激素受体的影响。方法收集2014年至2015年期间门诊和住院急性发作的哮喘患者62例,其中激素敏感型支气管哮喘(简称SS哮喘)26例,SR哮喘36例;选取同期健康体检正常者25例作为对照。收集入组者临床资料,取外周静脉血检测25-羟维生素D[25-(OH)D]水平并分离T淋巴细胞。T淋巴细胞培养分组如下:健康对照组(A组),SS哮喘对照组(B组),SR哮喘对照组(C组),SR哮喘JNK抑制剂(SP600125)+1,25-(OH)2D3组(D组),SR哮喘JNK抑制剂组(SP600125)(E组),以及SR哮喘1,25-(OH)2D3组(F组)。T淋巴细胞共培养48 h,培养结束后采用Western blot方法检测T淋巴细胞中磷酸化JNK(p-JNK)和磷酸化糖皮质激素受体(p-GR)的表达,RT-PCR法检测c-Jun m RNA的表达。结果 B组和C组血清25-(OH)D水平均低于A组(P<0.05),且C组低于B组(P<0.05)。B组和C组T淋巴细胞中p-JNK蛋白水平高于A组(P<0.05),且C组高于B组(P<0.05),E组和F组均低于C组(P<0.05),D组低于F组(P<0.05)。C组T淋巴细胞中p-GR蛋白低于A组和B组(P<0.05),E组和F组均高于C组(P<0.05),D组高于F组(P<0.05)。RT-PCR法检测B组和C组T淋巴细胞中c-Jun m RNA水平高于A组(P<0.05),C组高于B组(P<0.05),E组和F组均低于C组(P<0.05),D组低于F组(P<0.05)。C组患者25-(OH)D水平与p-JNK和c-Jun m RNA水平呈负相关(r=–0.69,r=–0.65,P<0.05),与p-GR水平呈正相关(r=0.72,P<0.05)。结论维生素D缺乏在SR哮喘患者中患病率高。1,25-(OH)2D3可通过抑制SR哮喘T淋巴细胞JNK/AP-1信号通路而促进p-GR的表达,这可能是维生素D改善SR哮喘患者的糖皮质激素抵抗的机制之一。
