尹亚军
- 作品数：11 被引量：21H指数：3
- 供职机构：陕西理工大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金：陕西省教育厅科研计划项目国家自然科学基金陕西省科技厅农业攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 略阳乌鸡抗病毒蛋白基因Mx多态性研究被引量：1
- 2016年
- 鸡抗病毒蛋白Mx(myxovirus resistance protein)具有抵抗流感病毒等多种病毒感染的能力。Mx蛋白631位氨基酸决定其抗病毒活性。为了揭示地方特色品种略阳乌鸡Mx蛋白631位氨基酸多态性和抗病毒能力,本研究采用PCR特异性扩增Mx基因,通过引物3'末端区分编码631位氨基酸密码子的A/G多态位点,测序PCR产物鉴定Mx基因多态位点。结果显示,138只略阳乌鸡的抗病毒蛋白Mx编码基因有AA、AG和GG三种基因型,其中病毒强抗性AA型公鸡6只,母鸡15只,共21只,比例为15.2%;敏感性GG型34只,比例24.6%,其中10只公鸡和24只母鸡;杂合AG型83只,公鸡31只,母鸡52只,比例高达60.1%。研究结果解析了略阳乌鸡Mx基因多态性,从DNA水平阐释了略阳乌鸡抗病毒能力低的原因,为后续培育强抗病毒能力的乌鸡个体和种质资源保存提供参考。
- 王令郭熠洁张涛路宏朝尹亚军杜伟立
- 关键词：略阳乌鸡基因多态性
- 检测牛羊肉中掺伪分子的试剂盒及其检测方法
- 本发明公开一种检测牛羊肉中掺伪分子的试剂盒及其检测方法，所述试剂盒中包含引物组，所述引物组中各引物如下：真核对照18s rRNA的上游引物和下游引物、牛的上游引物和下游引物、羊的上游引物和下游引物、猪的上游引物和下游引物...
- 张涛路宏朝王令左甜尹亚军杜立伟杨理凯白雪
- 文献传递
- 基于抑菌杀菌的多靶点CRISPR/Cas9表达载体
- 本发明公开了一种基于抑菌杀菌的多靶点CRISPR/Cas9表达载体，该基于抑菌杀菌的多靶点CRISPR/Cas9表达载体的基因序列为SEQ ID NO1；Cas9表达载体基因序列为SEQ ID NO2；构建方法利用导向R...
- 王令张涛路宏朝杜伟立尹亚军杨理凯郭苗刘欢尹美晨李蕊清
- 文献传递
- 汉中黑稻黄烷酮3-羟化酶基因(F3H)的遗传变异分析
- 2016年
- 本实验通过PCR和测序拼接获得汉中地区8个黑稻品种黄烷酮3-羟化酶基因(F3H)编码区序列,在NCBI中用BLAST分析首次发现该基因位于水稻4号染色体。发现8种黑稻和普通籼稻F3H序列完全相同,与粳稻相比较,则存在4个突变位点,导致2个氨基酸突变。基于F3H序列信息的进化树表明黑稻与籼稻、粳稻、小麦、玉米的亲缘关系较近;遗传距离和同源性分析表明F3H基因较为保守,是一个古老的基因,可用于种属的鉴定分析。F3H蛋白理化性质分析发现,黑稻与其它禾本科植物存在一定差异,蛋白三维结构及相关位点预测发现粳稻和黑稻无明显差异,初步认为黑稻F3H序列变异可能与花青素的合成无关,需要在其表当量与花青苷和成合成与沉积的关系方面开展进一步研究。
- 张涛尹亚军路宏朝王令
- 关键词：黑稻
- CRISPR/Cas9介导鸡肌肉生长和黑色素合成相关基因敲除研究
- CRISPR/Cas9系统是第三代基因编辑技术,由Cas9蛋白和识别靶位点的导向RNA（guide RNA,gRNA）组成,因其靶向编辑靶基因的特异性、高效性和设计的简便性等诸多优点,得到更为广泛的应用。肌肉生长抑制素（...
- 尹亚军
- 关键词：肌肉生长抑制素酪氨酸酶
- 文献传递
- 汉中黑稻花青素合成酶基因克隆及生物信息学分析被引量：1
- 2017年
- 花青素合成酶(Anthocyanidin Synthase,ANS)是植物花青苷生物合成途径末端的关键酶,催化无色花色素到有色花色素的转变。为研究汉中黑稻的ANS多样性及起源,采用克隆测序的方法对汉中7种品种黑稻的ANS基因序列进行分析。采用生物信息学方法,对该基因序列进行对比,并构建系统进化树和同源树,对其编码蛋白从基本理化性质、亚细胞定位、跨膜结构域、信号肽、导肽、二级结构和三级结构等方面进行预测和分析。结果表明7种汉中黑稻存在黑稻1、黑稻2两种基因序列,开放阅读框均为1 128bp,编码375个氨基酸。进化树表明黑稻1和黑稻2与籼稻、粳稻、浦竹仔、小麦等禾本科植物较近的亲缘关系,同源性分析表明黑稻1和黑稻2与籼稻等植物的ANS具有高度的同源性。氨基酸序列比对发现黑稻1和黑稻2仅有326位氨基酸不同。黑稻1的ANS蛋白含有2OG-FeⅡ_Oxy加氧酶的保守结构域。ANS蛋白三级结构预测,发现黑稻1和籼稻存在差异,推测ANS可能是花青苷合成中起重要作用的关键酶。这些结果表明ANS基因是一个古老的基因,可以作为种属鉴定的参考基因,可能是影响黑稻花青苷生物合成的主要基因之一。
- 尹亚军张涛王令路宏朝杜伟立
- 关键词：基因克隆生物信息学分析
- 高分子聚合物对两种细胞转染效率的研究
- 2016年
- 比较纳米材料和阳离子多聚物转染试剂携带增强绿色荧光蛋白基因对C2C12细胞和DF-1细胞的转染效率,筛选适合的基因载体。采用Entranster TM-D纳米材料和3种阳离子多聚物(Superfect、Fect、Neofect)转染试剂介导p CDH-EGFP-puro质粒分别转染C2C12细胞和DF-1细胞,24 h后用实时荧光定量核酸扩增检测系统检测转染细胞中增强绿色荧光蛋白基因的mRNA表达水平,48 h后观察并计数阳性细胞率。结果发现4种试剂分别转染的两种细胞中均有增强绿色荧光蛋白基因的表达。C2C12细胞用阳离子多聚物转染的效率略高于纳米材料转染,其中Superfect的转染效率可达到30%;DF-1细胞用纳米材料和阳离子多聚物转染的效率都高,其中Fect的转染效率达到50%。因此,阳离子多聚物Superfect用于C2C12细胞的体外转染,Fect转染试剂用于DF-1细胞的体外转染。
- 尹亚军李蕊清刘欢田蕾铭张力瑞张辉路宏朝张涛
- 关键词：C2C12细胞纳米材料转染效率
- 快速构建CRISPR/Cas9基因组靶向编辑系统被引量：7
- 2015年
- CRISPR/Cas9核酸酶作为一种新的基因组靶向编辑技术,已成功应用于多种动植物基因组修饰研究.CRISPR/Cas9作用后的阳性细胞筛选和富集是该技术的关键之一.本研究以鸡EAVHP(endogenous avian retrovirus-HP)基因和MSTN(myostatin)基因为例,从靶位点的选择、表达载体构建、双基因报告载体构建和核酸酶活性验证4个方面,系统研究了CRISPR/Cas9核酸酶技术平台.结果表明,利用寡聚核苷酸直接退火方法,构建表达载体和报告载体的阳性率分别高达100%和89.5%.报告载体的PuroR(puromycin resistant gene)和e GFP(enhanced green fluorescent protein)基因的成功表达表明,构建的CRISPR/Cas9系统能有效切割靶序列,并用于后续阳性克隆的筛选和富集.本方法摒弃了传统分子克隆的PCR扩增和酶切处理目标基因的方法,而是利用寡聚核苷酸直接退火获得含有黏性末端的目标DNA,简化了载体构建过程,低成本且快速获得CRISPR/Cas9基因组靶向编辑系统.
- 王令张涛路宏朝尹亚军
- 逆转录病毒载体介导的转基因鸡研究进展被引量：3
- 2015年
- 转基因鸡作为重要的经济动物和理想的生物反应器,具有广阔的应用前景。鸡基因组测序的完成加快了转基因鸡的研究和发展。病毒载体法是转基因鸡制备的主导方法之一,具有效率高和遗传稳定性良好的优势。本文对逆转录病毒载体特征、复制缺陷型病毒载体和复制整合双缺陷型病毒载体的优缺点及其介导的转基因鸡研究进行综述,展望人工核酸酶技术结合复制整合双缺陷型逆转录病毒载体在转基因鸡研究领域的应用前景。
- 王令张涛尹亚军
- 关键词：转基因鸡逆转录病毒载体
- 略阳乌鸡内源性逆转录病毒鉴定及表达分析被引量：2
- 2018年
- 内源性禽白血病病毒等以多种逆转录病毒基因组稳定存在鸡染色体中,其致病性低或无致病性,但是内源性病毒的基因表达降低了鸡抵抗外源病毒感染的能力。本研究以略阳乌鸡为研究对象,利用多重PCR鉴定鸡基因组中禽内源性病毒EAV-HP和禽白血病病毒E亚群（ALV-E）,分析ALV-E的env基因表达情况。结果表明,30只略阳乌鸡的基因组中均携带EAV-HP病毒序列,其中28只携带ALV-E序列。通过MEGA和NETWORK软件对ALV-E的gp85基因分析表明,略阳乌鸡与江苏绿壳蛋鸡聚在同一分支,两者同源性高达99.1%。此研究也为后续略阳乌鸡遗传背景分析和选育抗病毒感染优良品种提供基础数据。
- 杨理凯郭苗苗杜伟立尹亚军王令路宏朝张涛刁乐
- 关键词：略阳乌鸡内源性逆转录病毒基因表达分析
