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刘欣洁
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
北京大学药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室
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发文基金:
国家自然科学基金
国家重点基础研究发展计划
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相关领域:
化学工程
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合作作者
张礼和
北京大学药学院天然药物及仿生药...
马元
北京大学药学院天然药物及仿生药...
杨振军
北京大学药学院天然药物及仿生药...
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2015
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茎环引物实时定量PCR技术用于检测异核苷修饰的siRNA的可行性研究
被引量:1
2015年
本文考察了茎环引物实时定量PCR技术用于定量检测D-/L-异核苷(D-/L-iso NA)修饰的siRNA的可行性.根据阈值循环数(Ct值)及异核苷修饰的siRNA模板的初始浓度的对数值(lgC)绘制了标准曲线,与siRNA的标准曲线进行对比,发现D-异尿苷(D-isodU)修饰的siRNA(D-isodU-siRNA)不影响茎环引物实时定量PCR过程,而L-isodU修饰的siRNA(L-isodU-siRNA)降低了逆转录效率,而使测得的Ct值偏高,且对逆转录效率的影响有浓度依赖性和修饰位点特异性.因此,对前者既可进行绝对定量也可进行相对定量,对于后者只能进行绝对定量.将上述方法应用于isodU-siRNA血清稳定性的检测,获得了更可靠的定量结果.运用双标准曲线法,可进行胞内isodU-siRNA的定量检测.
王雨斯
马元
刘欣洁
张礼和
杨振军
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