- 抑制SIAH-1功能对α-synuclein选择降解通路的影响
- 2015年
- 目的:探讨E3泛素连接酶(SIAH)在α-突触核蛋白(α-synuclein)降解和细胞死亡中的作用。方法:用MTT法检测雷帕霉素和SIAH-1抗体处理24 h后的细胞活性,Western blot检测LC3-Ⅱ、E1、SIAH-1、P53和α-synuclein蛋白表达,RT-PCR检测相关蛋白的m RNA水平,用免疫荧光探讨SIAH抗体处理后α-synuclein、SIAH-1和LC3在细胞的分布和共定位情况。结果:MPP+处理增加α-synuclein、E1表达和SIAH-1的活性,然而LC3-Ⅱ、P53和α-synuclein的蛋白质水平显著降低,而抗SIAH-1抗体处理扭转了这一趋势,E1水平明显增加。雷帕霉素处理在MPP+组中降低SIAH-1和α-synuclein水平。SIAH-1抗体显著降低α-synuclein的免疫阳性染色,而α-synuclein和LC3在细胞内失去共定位。结论:SIAH-1抗体降低了α-synuclein单泛素化和聚集,并有效地促进其通过泛素蛋白酶体系统通路降解。因此,SIAH功能对α-synuclein聚集性及降解通路的选择有明显的影响。
- 蔡增林刘媛媛薛寿儒徐晶张謦芝李秀明
- 关键词：E3泛素连接酶MPP+Α-突触核蛋白自噬泛素蛋白酶体系统
- 芍药苷对α-突触核蛋白降解通路的影响被引量：7
- 2015年
- 目的:探讨芍药苷对α-突触核蛋白的降解途径-自噬和泛素-蛋白酶体通路的影响。方法:PC12细胞用或不用MPP+(0.5 mmol/L)处理24 h,然后用芍药苷(50μmol/L)或雷帕霉素(0.2μg/m L)处理24h,MTT法检测细胞增殖活性,Western印迹检测α-突触核蛋白、微管相关蛋白轻链3(LC3-Ⅱ)和E1的蛋白质表达水平,共聚焦显微镜观察α-突触核蛋白和LC3-Ⅱ在细胞内的荧光强度及共定位情况。结果:(1)与MPP+组相比,雷帕霉素和芍药苷处理后细胞过氧化氢酶和超氧化物歧化酶活力均显著下降(P<0.001),细胞形态恢复正常;(2)MPP+处理导致LC3-Ⅱ和E1表达水平升高,雷帕霉素处理后LC3-Ⅱ增高而E1水平下降,芍药苷处理既显著上调LC3-Ⅱ(自噬)也上调了E1的表达(泛素-蛋白酶体途径)(P<0.001),促进了α-突触核蛋白的降解;(3)MPP+增强细胞内α-突触核蛋白和LC3-Ⅱ的荧光强度,芍药苷处理后α-突触核蛋白的荧光强度下降。结论:本研究结果表明芍药苷同时显著上调自噬和泛素蛋白酶体途径,促进了α-突触核蛋白的降解,减少细胞损伤。
- 张永进王敏徐晶张謦芝李秀明蔡增林
- 关键词：芍药苷Α-突触核蛋白泛素-蛋白酶体通路自噬
- 不同脑血管供血部位新发脑梗塞危险因素的差异性分析
- 目的：根据新发脑梗塞的不同脑血管供血部位，进一步分析其危险因素和发病机制，探讨不同脑血管危险因素相关的差异.方法：选取2014-01至2015-08确诊新发脑梗塞患者179例作为研究对象，根据影像明确诊断新发脑梗塞的不同...
- 蔡增林李秀明明敬峰张馨芝张永进王敏
- 关键词：脑梗死
- siRNA干扰SIAH对细胞活性和α-synuclein泛素化降解通路的影响
- 2015年
- 目的:研究si RNA干扰SIAH基因对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y细胞α-synuclein泛素化、降解通路的影响。方法:用荧光标记的si RNA-FAM转染SH-SY5Y细胞后,专业设计合成3条针对SIAH的si RNA,Western Blot检测蛋白水平SIAH表达的变化,筛选出其中最高效的1条si RNA,用CCK-8法检测该si RNASIAH干扰SH-SY5Y细胞活性;流式细胞技术检测该si RNA-SIAH干扰SH-SY5Y细胞凋亡的影响;Western Blot检测α-synuclein、LC3、E1、P53蛋白水平表达的变化;q RT-PCR检测SIAH、α-synuclein、LC3、E1 m RNA水平表达的变化;免疫共聚焦分别检测SIAH、α-synuclein、LC3共定位情况。结果:3条si RNA均成功转染SH-SY5Y细胞,流式细胞术检测si RNA转染SH-SY5Y细胞转染率89%,Western结果显示其中si RNA-2#使细胞中SIAH蛋白表达明显降低,选取该序列进行研究。CCK-8法结果显示该si RNA干扰SIAH后对SH-SY5Y细胞活增高,流式细胞技术检测结果显示该si RNA干扰SIAH可抑制SH-SY5Y细胞的凋亡,与空白对照组、阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。通过Western Blot检测si RNA-2#组的α-synuclein、LC3、P53蛋白水平,与空白对照组、阴性对照组比较均明显降低,E1蛋白水平增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。通过q RT-PCR检测si RNA-2#组的SIAH、α-synuclein、LC3-Ⅱm RNA水平与空白对照组、阴性对照组比较均明显降低,而E1的m RNA水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:应用si RNA干扰SIAH基因,通过促进泛素-蛋白酶体系统作用减少SH-SY5Y中α-synuclein聚集,SIAH基因有可能成为帕金森病治疗中的一个新靶点。
- 徐晶张馨芝张永进李秀明王敏蔡增林李小民
- 关键词：E3泛素连接酶Α-SYNUCLEIN
- 老年糖尿病患者神经传导速度改变危险因素相关性分析被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨糖尿病周围神经病变(DPN)的危险因素。方法:选取本院73例老年糖尿病住院患者作为研究对象,运用肌电图检测其肢体运动神经传导速度(MCV)以及感觉神经传导速度(SCV),统计神经传导速度的异常率,并对疾病相关危险因素进行分析。结果:腓总神经MCV改变与糖化血红蛋白(Hb A1c)、病程、收缩压明显相关(P<0.05),且危险程度为糖化血红蛋白>病程>收缩压;胫神经MCV与收缩压、糖化血红蛋白、空腹血糖相关(P<0.05),且危险程度为收缩压>糖化血红蛋白>空腹血糖;腓浅神经SCV的改变与收缩压、年龄、病程相关(P<0.05),且危险程度为收缩压>年龄>病程。结论:病程、年龄、收缩压、糖化血红蛋白、空腹血糖是糖尿病患者发生周围神经病变的危险因素,神经传导速度检测是早期发现糖尿病周围神经病变的有效手段。
- 张永进刘媛媛张馨芝李秀明蔡增林吴方萍
- 关键词：糖尿病周围神经病变神经传导速度糖化血红蛋白
- 1年内脑梗死复发危险因素的Logistic分析
- 2016年
- 目的:了解脑梗死的患病情况,探讨脑梗死1年内复发的危险因素,为制定脑梗死再复发的预防策略提供科学依据。方法:将确诊为脑梗死1年内复发的患者60例作为病例组,采用随机抽样的方法从1000份脑梗死人群的资料中抽取出40例1年内未复发的病例作为对照组。使用统计软件SPSS 21.0对100例患者的资料用Logistic回归模型及因子分析筛选脑梗死1年内复发的主要危险因素。结果:Logistic回归分析显示入院收缩压、收缩压分级、糖尿病、吸烟与1年内脑梗死复发有相关性,因子分析显示脑梗死1年内复发的危险因素可以分成8个因子,而关系最密切的是第一个因子,即入院收缩压及收缩压分级。结论:脑梗死1年内复发与入院收缩压、收缩压分级、糖尿病、吸烟有关,尤其与入院收缩压及收缩压分级关系密切,在一定程度上控制这些因素可以降低脑梗死复发的风险。
- 张馨芝李秀明徐晶张永进蔡增林
- 关键词：脑梗死复发LOGISTIC回归
