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三色堇VwMYB8基因的克隆及其在月季中的瞬时表达分析被引量：2: 2016年; 三色堇花色艳丽,品种丰富,是重要的冬春季花卉。本研究采用黄底紫斑品种‘梦蝶’为研究材料,克隆花瓣中可能参与花青素累积起调控作用的MYB基因VwMYB8,结果显示:克隆得到的cDNA全长为1 078 bp,经ORF Finder分析发现其有长度为849 bp的开放阅读框,编码282个氨基酸;构建瞬时表达载体pXCS-VwMYB8,采用粒子轰击的方法作用于月季‘粉扇’花瓣细胞,经过48 h培养后观察转化材料细胞中色素的变化,转化的细胞颜色明显加深,表明基因VwMYB8可以提高月季花瓣细胞中色素的含量。; 曾媛龚胜李婧孙海燕王健杨文汉李霆格赵安瑾梅晶晶; 关键词：三色堇

三色堇花色素合成途径中部分结构基因的克隆及生物信息学分析被引量：1: 2015年; 【目的】对三色堇花色素合成的3个结构基因VwCHS、VzvCHI和VwF3H进行克隆以及生物信息学分析。【方法】利用RAcE／PcR技术克隆得到VwCHS、‰cHf和VzvF3H基因的全长序列，并通过在线分析软件对其生物信息学进行分析。【结果】获得VwCHS、VwCHI和VwF3H的cDNA全长分别是1481，975和1361bp；经多重序列比对发现这3个基因编码的氨基酸与其他植物相关氨基酸一致性较高，主要集中在62％～90％，并且在CHS氨基酸序列中有4个催化活性位点（Cys171、Phe222、His310、Asn343），在CHI氨基酸序列中有4个催化活性位点（Thr50、Tyr108、Asn115、Ser192），在VwF3H氨基酸序列中有5个催化活性位点（Asp218、His253、Arg215、Arg284、Ser286）；VwCHS、VwCHI、VwF3H的蛋白质分子量分别为9．91，5．37，4．1ku，等电点为5．02，5．16，5．44；二级结构预测发现，vwCHs和VwCHI二级结构主要是0t螺旋，分别占43．39％和41．89％，VwF3H的蛋白质二级结构主要是无规则卷曲，占42．30％；聚类分析发现VwCHS、VwCHI和VwF3H分别归属于各自的聚类簇。【结论1VwCHS、VwCHI和VwF3H是不存在信号肽的非跨膜蛋白。; 龚胜孙海燕张珂曾媛李婧王健李新国; 关键词：三色堇生物信息学

三色堇中花色苷生物合成相关调节基因的克隆与表达验证: 三色堇(Viola xwittrockiana Gams.)为堇菜科(Violaceae)堇菜属(Viola)花卉,是重要的冬春季观赏植物,本研究以黄底紫斑品种‘梦蝶’为研究对象,研究与其花瓣中花色苷生物合成相关的转录因...; 曾媛; 关键词：转录组实时荧光定量 RACE

三色堇酪氨酸脱羧酶基因的克隆及其生物信息学分析: 2016年; 本研究以三色堇(Viola×wittrockiana Gam)为研究材料,采用RT-PCR和RACE等方法克隆可能与其花色形成相关的酪氨酸脱羧酶基因(Tyrosine decarboxylase),并对基因全长进行氨基酸序列的生物信息学分析。结果从三色堇中分离克隆出c DNA全长为1 634 bp的TYDC1和1 575 bp的TYDC2两个同源基因,包含相同的且长度为1 485 bp,编码494个氨基酸的开放阅读框;氨基酸多重序列比对和聚类分析结果表明:三色堇中的TYDC基因编码氨基酸和其他植物相关基因的一致性可达到82.43%,且与麻疯树的亲缘关系较近,达到73%;对TYDC蛋白的结构进行预测发现,TYDC蛋白是一种亲水性的不稳定蛋白,也是一种存在跨膜区域且不存在信号肽的非分泌蛋白;通过亚细胞定位预测分析表明该蛋白主要在细胞核和细胞质中表达。本研究为揭示三色堇TYDC蛋白的结构功能务实了基础,为进一步研究和验证该基因在三色堇中的表达提供理论依据。; 杨文汉曾媛李霆格赵安瑾王健; 关键词：基因克隆生物信息学

大花三色堇FPNI-PCR反应体系的优化被引量：2: 2016年; 融合引物与巢式聚合酶链式反应（fusion primer and nested integrated PCR,FPNI-PCR）是一种分离并扩增已知序列旁未知序列的有效方法。以大花三色堇（Viola×wittrockiana Gams.）为材料,为提高FPNI-PCR产物特异性,增加条带清晰度,降低非特异性条带的干扰,对FPNI-PCR反应体系中第1轮的模板DNA浓度进行对比,优化了第3轮反应中引物浓度、Taq DNA聚合酶浓度、缓冲液用量,筛选了第3轮特异性引物的退火温度,进一步完善了FPNIPCR反应体系。各因素优化比对试验表明：FPNI-PCR第1轮反应体系应以稀释后的DNA为模板,20μL体系中,用量在4.5-10 ng。第3轮最优反应体系为：20μL反应体系中,特异性引物浓度0.2μmol/L,引物SP2浓度0.75μmol/L,Taq DNA酶用量1.0 U,d NTP用量2μL,10×buffer（20 mmol/L,Mg2＋plus）用量2μL,模板1μL（第2轮反应稀释100倍后取1μL为模板）,dd H2O补足。第3轮反应中,退火温度为64℃或66℃时条带最为清晰。; 李婧曾媛龚胜李霆格杨文汉王健; 关键词：大花三色堇

茶树油对2种农业致病菌的抑菌效果被引量：11: 2016年; 茶树油具有良好的抑菌能力,在果蔬天然保鲜杀菌剂的开发中具有良好的应用前景。采用滤纸扩散法测定不同浓度的茶树油对香蕉炭疽菌和芒果炭疽菌的离体抑制效果。结果显示,茶树油对这2种菌都具有良好的抑菌效果,且浓度增加,抑菌作用逐渐增强,对芒果炭疽菌和香蕉炭疽菌的EC50分别为339.13和143.10μL/L。; 张丽李霆格杨文汉曾媛李婧梅晶晶赵安瑾王健; 关键词：茶树油香蕉炭疽菌芒果炭疽菌抑菌率

一种花色调节基因VwMYB29及其应用: 本发明公开了一种花色调节基因VwMYB29，该花色调节基因VwMYB29的核苷酸序列如SEQ ID NO：1中所示；它的氨基酸序列如SEQ ID NO：2中所示。还公开了该花色调节基因VwMYB29在调节植物尤其是三色堇...; 王健龚胜孙海燕张珂曾媛李婧; 文献传递

三色堇4,5-多巴雌二醇双加氧酶基因的克隆及生物信息学分析: 2017年; 本实验以三色堇(Viola wittrockiana)的花瓣为研究材料,提取其总RNA,通过RACE(rapid-amplification of cDNA ends)技术扩增4,5-多巴雌二醇双加氧酶(4,5-DOPA dioxygenase extradiol)基因的cDNA全长,并对其进行生物信息学分析。本实验成功克隆VwDODA的cDNA全长1 055 bp,其中3'端非编码区157 bp,包含29 bp Poly(A),5'端非编码区103 bp,其开放阅读框为795 bp,编码263个氨基酸。通过NCBI的BLAST比对表明VwDODA编码的氨基酸序列与其他植物相关基因的相似性达到80.29%,与大豆(Glycine max)亲缘关系最近。通过生物信息学分析软件对VwDODA的蛋白质结构与功能进行预测,结果表明Vw D-%ODA是一种亲水稳定蛋白,不存在跨膜区域和信号肽,分子式为C1337H2026N356O384S7,等电点为6.70,分子量为29 455.37。本研究为将来三色堇中甜菜色素与花色素的互斥现象研究打下了基础。; 李霆格杨文汉曾媛李婧赵安瑾王健

一种花色调节基因VwMYB29及其应用: 本发明公开了一种花色调节基因VwMYB29，该花色调节基因VwMYB29的核苷酸序列如SEQ？ID？NO：1中所示；它的氨基酸序列如SEQ？ID？NO：2中所示。还公开了该花色调节基因VwMYB29在调节植物尤其是三色堇...; 王健龚胜孙海燕张珂曾媛李婧; 文献传递

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曾媛