孙海
- 作品数：7 被引量：6H指数：1
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- 苯并咪唑衍生物BMT-1对Jurkat细胞增殖及凋亡的影响
- 2016年
- 目的探讨苯并咪唑衍生物BMT-1对急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞增殖及凋亡的影响。方法采用CCK-8测定BMT-1对Jurkat细胞增殖的影响,采用流式细胞术检测BMT-1对Jurkat细胞的细胞周期、细胞凋亡和线粒体膜电位的影响。结果 BMT-1可显著抑制Jurkat细胞增殖,呈剂量依赖效应,GI50为1.08μmol/L。BMT-1可诱导Jurkat细胞SubG1峰显著增强、凋亡细胞比例显著增加和线粒体膜电位显著改变。结论苯并咪唑衍生物BMT-1能显著抑制Jurkat细胞增殖,并诱导细胞凋亡。
- 樊苗孙海唐信威赵波波欧阳寒梅邹强
- 关键词：苯并咪唑衍生物JURKAT细胞
- BMT-1抑制急性B淋巴母细胞瘤细胞增殖活力及其机制研究
- 2017年
- 目的探讨苯并咪唑衍生物BMT-1对急性B淋巴母细胞瘤细胞增殖活力的影响及其相关机制。方法采用CCK-8方法测定BMT-1对Daudi、Nalm-6的细胞毒性;采用流式细胞技术方法检测BMT-1对Daudi细胞凋亡及线粒体膜电位的影响;采用Western Blot方法检测Daudi细胞凋亡相关蛋白PARP的表达情况。结果BMT-1对Daudi、Nalm-6细胞具有较强的细胞毒性;BMT-1可诱导Daudi细胞凋亡,引起Daudi细胞线粒体膜电位下降,并可使得Daudi细胞产生PARP蛋白剪切体。结论 BMT-1对B淋巴母细胞瘤具有细胞毒性作用,其关键机制为诱导细胞凋亡和引起线粒体膜电位下降,为BMT-1治疗急性淋巴细胞白血病提供了理论基础。
- 唐信威钟文英周春雨樊苗赵波波欧阳寒梅孙海刘阳邹强
- 关键词：DAUDI细胞细胞凋亡
- Poly(I:C)诱导Zbtb32表达的信号通路与作用机制
- 先天性免疫系统通过模式识别受体识别病原相关模式分子(pathogen-associated molecular patterns,PAMPs)和内源性损伤相关模式分子(damage-associated molecula...
- 孙海
- 关键词：模式识别受体滑膜成纤维细胞
- 文献传递
- 苯并噻唑衍生物BD759抗T细胞增殖的机制研究被引量：1
- 2015年
- 目的探讨新型苯并噻唑衍生物BD759抑制T细胞增殖的作用机制。方法流式细胞术检测T细胞增殖、CD25表达及细胞周期。酶联免疫吸附法测定BD759对活化T细胞分泌白细胞介素-2、白细胞介素-4、白细胞介素-6、白细胞介素-10、白细胞介素-17A及干扰素-γ等细胞因子的影响。结果 BD759抑制抗人CD3和CD28m Abs刺激的T细胞增和混合淋巴细胞反应,IC50分别为(3.5±0.7)和(3.3±0.9)μmol·L-1。BD759对人静息T细胞和外周血单个核细胞无细胞毒性。BD759不抑制活化的T细胞表达CD25和分泌细胞因子白细胞介素-2、白细胞介素-4及白细胞介素-10,但显著抑制白细胞介素-6、白细胞介素-17A和干扰素-γ的产生,并且阻滞细胞周期于G0/G1期。结论新型苯并噻唑衍生物BD759不影响T细胞的活化,但通过阻滞细胞周期于G0/G1期抑制活化的T细胞增殖,并抑制白细胞介素-6、白细胞介素-17A和干扰素-γ等促炎细胞因子的分泌。BD759有望作为先导化合物,开发用于自身免疫性疾病与器官移植的新型药物。
- 罗兴燕邹强孙海胡松唐信威何莉夏超亚王茂田刘阳赖翼
- 关键词：T细胞增殖免疫抑制剂细胞周期
- 双抗夹心法酶联免疫吸附试验影响因素探析被引量：5
- 2016年
- 目的探析双抗夹心法酶联免疫吸附试验中牛血清清蛋白封闭,吐温20及浓度,样品与检测抗体的加样方式及孵育温度对酶联免疫吸附试验检测结果的影响。方法双抗夹心法酶联免疫吸附试验检测人白细胞介素(IL)-1Ra细胞因子作为模型,检测封闭条件,吐温20及其不同浓度,样品与检测抗体分开孵育及共同孵育,酶联孵育温度对标准品浓度与OD值关系的影响。结果酶联免疫吸附试验不封闭、洗液吐温浓度为0.05%且孵育温度为37℃的R^2=0.995 7;BSA封闭的R^2=0.981 1;洗液中吐温浓度0.005%时R^2=0.991 5,0.5%时R^2=0.9868;样品和检测抗体一同孵育1h或2h的R^2分别为0.964 5和0.874 2;孵育温度为25℃的R^2=0.996 1。结论BSA封闭步骤对低浓度的样品检测灵敏度不强;样品和检测抗体及酶稀释液中必须含有吐温20且浓度在0.05%条件下最合适;样品和检测抗体共同孵育会影响对高浓度样品的检测;37℃和25℃的孵育温度条件下的酶联免疫吸附试验检测灵敏度没有差异,但25℃孵育可以降低OD值背景。
- 何莉孙海胡松莫春芬郭慧杰赖翼刘阳邹强罗兴燕
- 关键词：影响因素
- Ficoll分离法富集脐带血自然杀伤细胞的实验条件分析
- 2020年
- 目的探讨影响Ficoll分离法富集脐带血(UCB)自然杀伤细胞(NK)的实验条件。方法在不同保存温度、复温时间、Ficoll密度和抗凝剂比例条件下,Ficoll法分离临床UCB,通过流式检测NK存活率、富集前后的回收率以及粒细胞清除率,评判富集效果。结果UCB在4、25、37℃下可保存至7h,随后UCB中NK存活率和富集回收率、粒细胞清除率随时间延长明显下降。对长时间保存的4℃脐血,可在不影响NK存活率情况下,通过复温37℃1h或适度增加Ficoll密度提升回收率。此外,血袋规格应与采集血量相匹配,否则较少血量会导致预留抗凝剂在UCB中的浓度变大,也会降低NK富集回收率。结论在保持UCB与抗凝剂正常比例情况下,临床UCB 37℃保存7h内进行Ficoll分离法富集NK可达到较好富集效果。
- 曹倩冉凤萍孙海蒙露陈巧段曦郑武燕刘佳慧李华邹强
- 关键词：脐血NK细胞
- 小分子化合物BD691抑制活化T细胞增殖的机制研究被引量：1
- 2015年
- 目的 T细胞的异常增殖在自身免疫疾病的发生发展中起重要作用。文中探究小分子化合物BD691抑制T细胞增殖的机制。方法免疫磁珠纯化人外周血T细胞,anti-CD3/CD28抗体或同种异型抗原活化T细胞。流式细胞术检测BD691对活化T细胞的增殖抑制作用、静息T细胞的细胞毒性作用以及对T细胞活化标志CD25表达的影响,双抗夹心法酶联免疫吸附试验检测BD691对T细胞分化相关的细胞因子分泌的影响。结果 BD691抑制anti-CD3/CD28抗体或同种异型抗原刺激的T细胞增殖,IC50分别为(8.5±1.5)、(7.2±1.3)μmol/L,BD691对人静息初始T细胞和人静息PBMC均无显著细胞毒性。在未经anti-CD3/CD28抗体活化的T细胞中,CD25+表达的细胞仅占细胞总数的1.6%,而活化后CD25+细胞比例增加到68.0%。同时,0、3.3、10、30μmol/LBD691处理活化的T细胞,却未观察到CD25的表达有明显的改变,而免疫抑制剂FK506(0.1μmol/L)则显著降低活化T细胞中CD25的表达(14.9%)。T细胞活化后G0/G1期细胞比例为57.7%,当BD691作用于活化的T细胞后此比例升高,呈剂量依赖效应。BD691对IFN-γ、IL-6和IL-17的抑制呈剂量依赖效应。结论BD691不影响T细胞活化,但通过阻滞细胞周期于G0/G1期抑制活化T细胞的增殖。BD691对与Th1和Th17细胞分化密切相关的关键细胞因子IFN-γ、IL-6、IL-17有显著抑制作用,提示BD691有望作为先导化合物开发抑制T细胞异常增殖和分化的新型免疫抑制剂。
- 孙海莫春芬罗兴燕郭慧杰胡松唐信威樊苗赖翼刘阳邹强
- 关键词：T细胞增殖T细胞分化
