汪杨
- 作品数：19 被引量：78H指数：4
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划北京市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 钠-氢交换蛋白1小干扰RNA对抗霉素A诱导人肾小管上皮细胞缺血再灌注损伤的保护机制被引量：2
- 2008年
- 目的通过构建钠-氢交换蛋白1（NHE-1）小干扰RNA（siRNA）抑制肾小管上皮细胞NHE-1的表达，探讨其对细胞缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法根据人NHE-1全长基因序列设计并合成NHE-1-siRNA，转染人肾小管上皮细胞系（HKC），以无关siRNA转染组作为对照。利用10μmol／L抗霉素A诱导细胞来模拟缺血缺氧环境。用RT—PCR、Western印迹法检测NHE-1的表达。用BCECF／AM、Fluo-3／AM和SBFI-AM标记HKC，通过激光共聚焦显微镜分别检测其细胞内pHi、Ca^2＋和Na^＋浓度的变化。用Hoechst 33342染色技术及AnnexinV／PI染色结合流式细胞仪技术检测细胞凋亡情况。利用荧光探针JC-1检测细胞线粒体膜电位的变化。结果特异性NHE-1-siRNA能有效抑制HKC的NHE-1表达，与无关siRNA转染组相比，NHE-1-siRNA转染组NHE-1 mRNA和蛋白表达水平明显下调（均P〈0．05）。抗霉素A刺激后，2组细胞NHE-1 mRNA及蛋白表达水平显著上调，而NHE-1-siRNA转染组低于无关siRNA转染组；同时NHE-1-siRNA转染组细胞凋亡率（8．9％±2．9％）明显低于抗霉素A处理组（18．8％±3．2％）和抗霉素A＋无关siRNA转染组（17．4％±3．6％）（均P〈0．05）；NHE-1-siRNA转染组线粒体膜电位明显增高；与无关siRNA转染组相比较，NHE-1-siRNA转染组经抗霉素A处理后，细胞内钠离子、氢离子及钙离子增高的幅度较低（P〈0．05）。结论NHE-1-siRNA可抑制肾小管上皮细胞内NHE-1的表达，对抗霉素A诱导肾小管上皮细胞的缺血再灌性损伤有一定的保护作用。其机制可能通过抑制NHE-1表达，延缓细胞内Na^＋的积聚，减轻细胞内钙离子的超载，抑制损伤细胞的线粒体膜电位下降，减少细胞的凋亡。
- 洪权吴镝冯哲张雪光汪杨吕杨陈香美
- 关键词：缺血再灌注损伤肾小管上皮细胞
- 终末期肾病维持性血液透析患者并发肺结核与肺外结核的临床特点被引量：13
- 2021年
- 目的探讨终末期肾病维持性血液透析患者并发肺结核(PTB)和肺外结核(EPTB)的临床特点。方法选择2012年7月-2021年2月在解放军总医院第八医学中心结核科就诊并在血液净化中心行维持性血液透析治疗的终末期肾病并发结核病患者共133例,分为PTB组(n=87)与EPTB组(n=46),对比分析两组患者的临床特点及预后情况。结果PTB组及EPTB组均以男性为主(80.5%vs.58.7%),但EPTB组的女性比例(41.3%)较PTB组(19.5%)更高(P<0.05)。两组的年龄、肾脏原发病、合并疾病、透析时间、透析后结核检出时间差异无统计学意义。出现的首发症状中,PTB组咳嗽咳痰(59.8%)及发热(60.9%)比例明显高于EPTB组(分别为23.9%、28.3%,P<0.05),而病变部位疼痛比例明显低于EPTB组(8.0%vs.41.3%,P<0.05)。PTB组及EPTB组的确诊方式均以CT或MRI影像学检查为主(67.8%vs.76.1%),其次分别为痰涂片或培养(26.4%vs.6.5%)及穿刺活检(5.7%vs.17.4%),两组间差异均有统计学意义(P<0.05)。两组γ干扰素释放试验阳性率差异无统计学意义。PTB组与EPTB组中淋巴细胞、血红蛋白、白蛋白降低的比例,以及红细胞沉降率、C-反应蛋白升高的比例均较高,但组间差异无统计学意义。两组均行抗结核药物治疗,EPTB组1例在抗结核药物治疗的基础上行结核灶清除手术治疗。两组不良反应发生率差异无统计学意义,治疗好转率相似。结论终末期肾病维持性血液透析的PTB与EPTB患者在性别比例、首发症状及确诊方式方面存在明显差异,重视这些差异,进行个体化监测和诊治,将有助于降低PTB及EPTB的发病率及病死率。
- 任瑞霖张五星周伟汪杨黄巍
- 关键词：终末期肾病维持性血液透析肺结核肺外结核
- 慢性肾脏病肾性贫血的基础与临床研究现状及进展被引量：33
- 2019年
- 随着发病率和患病率的增加,慢性肾脏病(CKD)成为一种影响全球健康的疾病[1]。贫血是CKD患者的最常见的并发症之一,在肾小球滤过率较低的患者中更为常见,特别是那些需要长期透析的终末期肾病(ESRD)患者[2]。有研究表明,CKD3期时贫血发生率达到51.1%,CKD5期可高达90.2%[3],最近一项横断面研究表明,至CKD5期时贫血发生率甚至达到100%[4]。贫血患者氧分压降低,致心脏负荷增加,呈现高输出状态,久之将导致左心室肥大,乃至全心扩大和心力衰竭,增加患者病死率[3,5]。因此,在CKD早期开始重视贫血的诊断和治疗,对降低心血管并发症及死亡率有重要意义。目前临床上主要通过补充重组人促红细胞生成素(rhEPO)或红细胞生成刺激剂(ESAs)来纠正肾性贫血,但因存在很多不良反应,如增加了高血压发生率和血栓发生的风险,且时有促红素抵抗的情况发生[6],故目前对肾性贫血患者的治疗方法还存在争议,所以临床迫切需要通过深入研究肾性贫血的机制,进而研究和提前干预或延缓肾性贫血的发生提供方向和治疗方案。本文就肾性贫血的发生机制、动物模型到临床治疗进展做如下综述。
- 汪杨魏日胞
- 关键词：肾性贫血慢性肾脏病重组人促红细胞生成素心血管并发症肾小球滤过率终末期肾病
- 马兜铃酸创建C57BL/6小鼠肾性贫血动物模型的实验研究
- 目的 肾性贫血是慢性肾脏病(CKD)最常见的并发症之一，随着肾功能下降，贫血的严重程度恶化，患病率增加，肾性贫血可加速肾功能损伤、诱发心血管事件，明显降低患者的生活质量及预后。但目前基础研究方面尚缺乏理想的肾性贫血动物模...
- 汪杨
- 关键词：肾性贫血马兜铃酸腺嘌呤肾间质纤维化
- IgAN患者发生胰岛素抵抗与血压变异对疾病进展的研究被引量：1
- 2018年
- 目的:分析IgA肾病患者胰岛素抵抗与临床病理指标及昼夜血压变异之间的关系,并探讨IgA肾病患者发生胰岛素抵抗的影响因素。方法:选择2014年01月~2016年07月期间在解放军总医院肾脏病科住院,经肾活检确诊为IgA肾病并符合纳排标准的127例患者研究。收集患者的临床病理资料信息,建立研究数据库。采用相关及多因素回归分析胰岛素抵抗与IgA肾病患者临床病理指标及昼夜血压变异之间的关系。结果:根据HOMA-IR指数将127例IgA肾病患者分为胰岛素抵抗组43例和非胰岛素抵抗组84例。相关性分析:BMI(P<0.001)、三酰甘油(P<0.001)、夜间平均收缩压(P=0.001)、夜间平均舒张压(P=0.001)与IgA肾病患者HOMA-IR指数间存在正相关,而夜间收缩压下降率%(P=0.012)与IgA肾病患者HOMA-IR指数间存在负相关。多因素回归分析结果表明BMI(P=0.001)、夜间收缩压下降率%(P=0.005)及肾脏组织病理评分M1(P=0.005)均为IgA肾病患者发生胰岛素抵抗重要影响因素。结论:IgA肾病患者普遍存在HOMA-IR指数升高,而BMI、夜间收缩压下降率%及肾脏组织病理评分M1为IgA肾病患者发生胰岛素抵抗的独立影响因素。
- 苏亭予魏日胞汪杨李平杨悦黄梦杰陈香美
- 关键词：IGA肾病胰岛素抵抗
- 终末期肾病维持性血液透析患者并发病原学阳性和阴性肺结核的临床特点及预后分析被引量：11
- 2022年
- 目的探讨终末期肾病维持性血液透析患者并发病原学阳性和阴性肺结核的临床特点及预后情况。方法收集2012年7月-2022年2月在解放军总医院第八医学中心结核科就诊并在血液净化中心行维持性血液透析治疗的98例终末期肾病并发肺结核患者,根据痰涂片、痰结核分枝杆菌培养及分子生物学诊断结果分为病原学阳性组(n=34)与病原学阴性组(n=64),对比分析两组的临床特点、治疗效果及预后情况。结果肺结核病原学阳性与阴性组均以男性(分别为85.3%、76.6%)和中老年人[分别为(56.4±15.6)岁、(55.8±15.0)岁]为主。与病原学阴性组比较,病原学阳性组基础病非原发性肾小球肾炎的比例(38.2%vs.17.2%)和首发症状为咳嗽咳痰的比例(91.2%vs.50.0%)高(P<0.05)。实验室检查结果显示,病原学阳性组白细胞、中性粒细胞、单核细胞计数,中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、单核细胞/淋巴细胞比值(MLR)及C反应蛋白水平均高于病原学阴性组(P<0.05),但淋巴细胞计数低于病原学阴性组(P<0.05)。胸部CT显示,与病原学阴性组比较,病原学阳性组胸膜增厚、空洞形成比例高(P<0.05),条索影比例低(P<0.05)。两组抗结核治疗的疗效均较好(94.1%vs.95.3%)。多因素logistic回归分析结果显示,咳嗽咳痰(OR=12.572,95%CI 2.609~60.581)、MLR(OR=8.226,95%CI 2.479~27.298)、合并胸膜增厚(OR=4.740,95%CI 1.043~21.541)及空洞形成(OR=8.462,95%CI 2.423~29.555)为肺结核患者病原学阳性的独立危险因素。结论终末期肾病维持性血液透析并发病原学阳性及阴性肺结核患者的临床特点存在差异,以咳嗽咳痰为首发症状、MLR、合并胸膜增厚及空洞形成是肺结核病原学阳性的独立危险因素。
- 王妙琴任瑞霖张五星周伟汪杨黄巍
- 关键词：终末期肾病维持性血液透析
- 人SDCT2β3′-非翻译区基因表达负调控序列对mRNA稳定性的影响被引量：1
- 2008年
- 为探索人高亲和力钠离子依赖性二羧酸转运蛋白基因(high affinity sodium-dependent dicarboxylate transporter,SDCT2)3′端非翻译区是否在基因表达调控中起作用,首先通过生物信息学分析发现,在SDCT2βmRNA的3′端非翻译区内存在585nt的AU富含区(AU-rich region,AUR),其中包括3个AU富含元件(AU-rich element,ARE),然后将SDCT2β的AU富含区DNA片段插入报告基因GFP表达载体pcDNA-GFP的下游,构建pcDNA-GFP-AUR表达载体并转染HEK293、HKC和LLC-PK1细胞系,用Western blot和流式细胞仪检测细胞中GFP的表达水平.结果显示,SDCT2β的AU富含区序列可显著降低GFP的表达水平(P<0.01).利用放线菌素D阻断RNA转录后,每隔2h从稳定转染的HEK293细胞中提取总RNA,用RNA印迹分析GFP mRNA的稳定性.结果显示GFP-AURmRNA较GFP mRNA不稳定.这些结果提示,在SDCT2β3′非翻译区的AU富含区内存在基因表达负调控区,该区可降低mRNA的稳定性、促进mRNA的降解,从而在转录后水平调控基因的表达.
- 白雪源陈香美傅博汪杨
- 关键词：转录后调控MRNA稳定性
- 肾性贫血动物模型的制作被引量：2
- 2020年
- 目的:应用适量马兜铃酸(aristolochic acid,AA)探索创建肾性贫血小鼠模型。方法:6周龄雄性C57BL/6小鼠分3组,正常对照组;马兜铃酸腹腔注射组:AA/2d组(马兜铃酸3 mg·kg^(-1)·2 d^(-1))和AA/3d组(3 mg·kg^(-1)·3 d^(-1)),共给药6周。造模第6、9、12周观察肾功能、贫血指标、肾脏病理评分、肾纤维化及肾组织EPO的蛋白表达情况。结果:给药6周时,血肌酐AA/2d组(29.9±1.5)μmol/L和AA/3d组(31.0±1.9)μmol/L均明显高于对照组(8.7±1.4)μmol/L,P<0.001;Hb水平AA/2d组(88.3±3.1)g/L、AA/3d组(85.7±7.4)g/L都明显低于对照组(148.7±4.9)g/L,P<0.001;HCT值AA/2d组、AA/3d组分别为0.30±0.01、0.29±0.02还是都明显低于对照组(0.51±0.02),P<0.001;肾脏病理呈现明显的肾间质纤维化,肾组织中EPO蛋白表达水平下降,提示肾性贫血模型成功。连续观察9、12周,上述变化持续存在,但AA/2d、AA/3d组间的临床病理指标无统计学意义。结论:3 mg·kg^(-1)·3 d^(-1)马兜铃酸连续给药6周可成功建立合格稳定的肾性贫血小鼠模型,该模型临床表现为不可逆的肾衰竭和贫血,肾组织中的促红素表达下降,肾脏病理表现为慢性肾间质纤维化。
- 汪杨李菲尹忠魏日胞
- 关键词：肾性贫血马兜铃酸肾间质纤维化促红细胞生成素
- 高糖对衰老的影响及其分子机制研究现状
- 2010年
- 汪杨白雪源魏日胞陈香美
- 关键词：端粒细胞周期氧化应激衰老
- p21^(WAF1/CIP1/SDI1)在大鼠肾脏组织的增龄性变化及意义
- 2010年
- 目的研究p21野生型p53活化片段1/细胞周期蛋白依赖性激酶影响蛋白1/衰老细胞衍生抑制剂1(p21WAF1/CIP1/SDI1)在大鼠肾脏中随年龄增长的表达变化规律。方法取3月龄、12月龄及24月龄健康雄性Wistar大鼠肾组织进行衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)活性染色,TUNEL法检测细胞凋亡,采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法(Westernblotassay)分别在基因及蛋白质表达水平上检测肾脏组织中p21WAF1/CIP1/SDI1的表达变化,并用免疫组化法检测p21WAF1/CIP1/SDI1在肾脏组织中的表达与定位。结果大鼠肾脏组织SA-β-gal活性随年龄增长逐渐增强,凋亡细胞也随年龄增长逐渐增加(P<0.05);p21WAF1/CIP1/SDI1mRNA表达随年龄增长逐渐增强,不同月龄比较差异有统计学意义(P<0.05)。Western印迹亦显示p21WAF1/CIP1/SDI1蛋白表达随鼠龄增加逐渐增强(P<0.05)。免疫组化结果显示,p21WAF1/CIP1/SDI1蛋白表达于大鼠肾小球足细胞,其在肾小管与间质细胞中也有表达,且随年龄增长表达增加(P<0.05)。结论p21WAF1/CIP1/SDI1在大鼠肾脏组织中的表达随年龄增加而增强,可作为肾脏组织中重要的衰老指标。
- 卓莉刘伏友蔡广研汪杨师锁柱
- 关键词：肾脏
