谢娜
- 作品数：15 被引量：53H指数：4
- 供职机构：西安医学院口腔医学系更多>>
- 发文基金：陕西省教育厅科研计划项目陕西省社会发展科技攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程生物学文化科学更多>>
- 氟在内质网应激引起原代培养成釉细胞自噬与凋亡中的作用被引量：7
- 2016年
- 目的探讨氟在内质网应激引起原代培养成釉细胞自噬与凋亡中的作用及相关机制。方法分离SD大鼠上下颌磨牙牙胚中的成釉细胞进行原代培养。待细胞生长稳定后,采用0.8 mmol/L、1.6 mmol/L NaF分别干预体外培养成釉细胞24 h和48 h,倒置显微镜及透射电镜观察细胞形态及其超微结构。1.6 mmol/L NaF作用于成釉细胞24 h和48 h,利用realtime PCR和Western blot法分别检测不同时间点下成釉细胞XBP1s mRNA、GRP78和CHOP蛋白的表达水平。结果倒置显微镜下观察,0.8 mmol/L NaF干预成釉细胞24 h和48 h,与对照组相比均未见明显差异。1.6 mmol/L NaF作用于成釉细胞48 h凋亡细胞数明显多于同浓度氟作用于细胞24 h时。透射电镜结果显示,NaF干预成釉细胞24 h,0.8 mmol/L NaF组细胞粗面内质网池样扩张,线粒体肿胀,体积增大,电子密度降低,溶酶体丰富,自噬样结构可见。1.6 mmol/L NaF组细胞内自噬样结构明显增加。1.6 mmol/L NaF作用下,成釉细胞内质网应激相关蛋白XBP1s mRNA、GRP-78及CHOP蛋白表达水平48 h时间点较24 h时间点均明显增加(P<0.01)。结论氟可导致成釉细胞内质网应激,启动自噬,随着氟处理时间延长,激活凋亡信号通路,诱导细胞凋亡。
- 王琳王丹杨王峰谢娜
- 关键词：氟成釉细胞内质网应激自噬
- 骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠下颌骨结构、血清E_2及OPG/RANKL的影响被引量：13
- 2019年
- 目的探讨骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠下颌骨结构及血清雌二醇(E_2)水平、血清骨保护素/细胞核因子κB受体活化因子配基(OPG/RANKL)平衡的影响。方法将40只3月龄雌性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、去卵巢模型组(OVX)、骨碎补总黄酮高剂量组(GB-H)、骨碎补总黄酮低剂量组(GB-L)和戊酸雌二醇组(EV)。采用摘除大鼠双侧卵巢的方法构建下颌骨骨质疏松模型,给药12周后处死大鼠。截取大鼠下颌磨牙段进行组织切片观察和形态计量学测量,放射免疫法检测血清E_2水平,ELISA法检测血清OPG、RANKL水平。结果与Sham组相比,OVX组大鼠下颌骨呈疏松样改变,E_2水平显著降低(P<0.001),OPG和OPG/RANKL比值显著降低(P<0.001,P<0.001)。与OVX组相比,EV组大鼠下颌骨结构获得良好修复,血清E_2回升(P<0.001),OPG/RANKL比值显著增加(P<0.001)。与OVX组相比,GB-H、GB-L组下颌骨骨小梁面积百分率均增加(P<0.001,P=0.029)及血清OPG/RANKL比值(P<0.001,P=0.007)均增高,GB-H组下颌骨骨小梁厚度及血清OPG水平增加(P=0.019,P<0.001),骨小梁间距减小(P=0.001),但均对血清E_2水平无影响(P=0.432,P=0.459)。结论骨碎补总黄酮能抑制去卵巢大鼠的下颌骨结构破坏,从而减缓下颌骨骨量丢失,但不能提高血清E_2水平,其途径可能是通过调节OPG/RANKL平衡实现的。
- 曾辉赵许兵唐成芳周芳左艳萍谢娜
- 关键词：骨碎补总黄酮下颌骨骨质疏松骨组织形态计量学OPG/RANKL
- PMBE稳定牙本质基质及封闭牙本质小管的双重功效研究被引量：3
- 2017年
- 目的观察马尾松树皮提取物(pinus massoniana bark extract,PMBE)稳定牙本质基质和封闭牙本质小管效果,为其防治牙本质过敏提供实验依据。方法制备牙本质块60个,随机分为6组(n=10):乙醇组,氟涂膜组,1%,2%,4%和8%PMBE组。酸蚀牙本质使牙本质小管开放,各组分别用无水乙醇,氟涂膜,1%,2%,4%和8%PMBE乙醇溶液涂刷牙本质表面。采用场发射扫描电镜观察牙本质表面及剖面的显微形貌,并测量牙本质小管口开放视野面积(ADTO)、牙本质小管口开放相对面积(PADTO)和小管封闭深度(SD)。结果 8%PMBE组ADTO及PADTO显著低于乙醇组(P<0.05),但与氟保护漆组比较差异无统计学意义(P>0.05)。4%PMBE组ADTO及PADTO显著低于1%,2%PMBE组及乙醇组,但显著高于8%PMBE组。扫描电镜见乙醇组牙本质表面牙本质小管完全开放,管壁疏松;氟保护漆组牙本质小管完全封闭;PMBE组管壁胶原基质清晰可见、致密,小管口封堵程度随PMBE浓度增高而增加,8%PMBE组小管口基本完全封堵,剖面可见封堵物。结论 PMBE乙醇溶液局部涂布使用具有稳定胶原基质和封闭牙本质小管的双重功效,8%PMBE溶液效果最佳,PMBE具备一定治疗牙本质过敏的作用。
- 唐成芳曾辉张莎王丹杨杨黎艳谢娜
- 关键词：牙本质过敏牙本质小管氟保护漆
- 人脐带间充质干细胞分离培养鉴定及诱导分化实验被引量：2
- 2015年
- 目的：建立人脐带间充质干细胞（MSCs）分离培养方法，并进行生物学鉴定及定向诱导分化研究。方法采用酶消化 Wharton 胶法体外分离培养人脐带干细胞，通过流式细胞仪分析其表面标记分子，并向成骨、成脂方向诱导分化，钙钴法染色检测 ALP，茜素红染色检测矿化结节，油红“O”染色检测脂肪滴，进行干细胞的成骨成脂活性鉴定。结果分离培养的脐带间充质干细胞 CD73，CD90和 CD105均表达阳性，阳性率为92.45％，95.45％和96.45％，CD34表达阴性，阳性率仅为1.07％。成骨诱导3周后 ALP 染色胞质内可见黑色颗粒，4周后可见大量矿化结节。成脂诱导2周后细胞内出现大量脂肪小滴，多数细胞形态变圆，油红“O”染色阳性。结论脐带来源的间充质干细胞具有成骨、成脂多向分化潜能，为临床干细胞治疗研究的种子细胞来源奠定了基础。
- 谢娜娄鸣饶国洲朱勇唐成芳王琳
- 关键词：脐带WHARTON干细胞诱导分化
- CM-DiI应用于标记大鼠牙髓干细胞的实验研究被引量：2
- 2018年
- 目的探讨荧光染料CM-DiI用于标记大鼠牙髓干细胞可行性。方法酶解组织块法体外分离培养SD大鼠牙髓细胞,有限稀释法对所培养的牙髓细胞进行纯化,获得呈克隆集落式生长的干细胞,免疫组化法鉴定培养细胞种属来源,成脂/成骨诱导液诱导细胞向脂肪、骨细胞方向分化。荧光染料CM-DiI体外标记第3代大鼠牙髓干细胞,观察标记后细胞增殖情况以及细胞乳酸脱氢酶释放率,统计学分析CM-DiI标记与未标记细胞的生物学状态。结果利用酶解组织块法可培养出大鼠牙髓细胞,经有限稀释法纯化后可获得克隆集落状生长的大鼠牙髓干细胞;免疫组化法确定大鼠牙髓细胞为间充质来源,且具有向脂肪细胞、骨细胞等多向分化的潜能。CM-DiI标记后的大鼠牙髓干细胞的胞浆、胞膜呈现红色荧光,并且细胞生长为梭形、生长状况良好。与未进行细胞标记组比较,CM-DiI标记后细胞形态、上清液乳酸脱氢酶含量及CCK-8值均无明显变化,两者差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CM-DiI可用于标记大鼠牙髓干细胞,此种标记方法操作简便、染色速度快,对所标记的细胞无毒性。
- 谢娜杨建军杨芳王丹杨唐成芳曾辉李子夏张耀超
- 关键词：牙髓干细胞细胞标记荧光染料
- 单极射频低温等离子体杀菌的实验研究
- 2015年
- 目的 探讨单极射频低温等离子体在设定最佳参数下,作用不同时间的杀菌效果及机理.方法 将金黄色葡萄球菌（ATCC25923）和大肠埃希菌（ATCC25922）标准菌株接种于营养琼脂平板,37℃进行活化培养24 h,挑取菌落以无菌生理盐水稀释成105 cfu/ml细胞悬液,取10μl均匀涂布在无菌载玻片上,设对照组（照射前）和实验组（照射后）,每个作用时间设3个复片,采用单极射频低温等离子体装置（参数设置为10 W,10 KV,10 KHz,He/O2=2％,2 L/min）对其进行照射.照射时间分别为5,10,40,60,300,600,720和900s,通过菌落计数法计算杀灭率,检测不同照射时间的杀灭效果,电镜观察照射前后的细菌形态和超微结构的变化.结果 对照组：金黄色葡萄球菌总数1 798 cfu/10 μl;大肠埃希菌总数2563 cfu/10 μl.实验组：5,10,40,60,300,600,720和900s,其存活菌数和杀灭率分别为金黄色葡萄球菌：945 cfu/10μl（47.4％）,823 cfu/10 μl（54.2％）,731 cfu/10 μl（59.3％）,586 cfu/10 μl（67.4％）,324 cfu/10 μl（81.9％）,107 cfu/10 μl（94.0％）,6 cfu/10 μl（99.7％）,0 cfu/10 μl（100％）;大肠埃希菌：1 546 cfu/10 μl（39.7％）,1 389 cfu/10 μl（45.8％）,1 282cfu/10-μl（49.9％）,1 085 cfu/10 μl（57.7％）,579 cfu/10 μl（77.4％）,228 cfu/10 μl（91.7％）,11 cfu/10 μl（99.6％）和0cfu/10 μl（100％）.结果表明不同照射时间其存活菌数和杀灭效果有所不同,其中照射900s时杀灭率达100％.电镜下观察可见金黄色葡萄球菌细胞壁破裂、模糊、溶解、胞浆内容物外流,失去完整性,胞内染色变浅,核质疏松;大肠埃希菌长度缩短、边缘粗糙、胞壁溶解、胞内出现空泡样改变.结论 单极射频低温等离子体能有效地杀灭革兰氏阳性球菌和革兰氏阴性杆菌,其杀灭率随照射时间的延长而增加,其机理与电离产生的带电粒子破坏细菌胞壁、脂蛋白、脂多糖及DNA的作用有关.
- 谢娜饶国洲朱勇李子夏唐成芳娄鸣王丹杨
- 关键词：低温等离子体杀菌作用金黄色葡萄球菌大肠埃希菌超微结构
- 论虚拟仿真实训系统在口腔实验教学中的应用被引量：8
- 2016年
- 口腔实验教学在口腔临床教学中有着非常重要的作用。虚拟仿真实训系统有效地解决了传统口腔实验教学中存在的问题,减少了实验材料的重复消耗,提供了安全、节能的实验环境,有利于学生更加扎实地掌握口腔基本操作技能,建立缜密的临床诊疗思路。
- 王琳李子夏王峰曾辉谢娜
- 关键词：仿真口腔实验教学
- 氟对原代培养大鼠成釉细胞TNF-α、TNFR1表达的影响被引量：1
- 2016年
- 目的研究氟干预下肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、肿瘤坏死因子受体1(tumor necrosis factor receptor 1,TNFR1)在体外培养原代大鼠成釉细胞中的表达及生物学作用。方法分离SD大鼠上下颌磨牙牙胚中的成釉细胞进行原代培养。待细胞生长稳定后,3.2 mmol/L Na F分别干预体外培养原代成釉细胞12 h,24 h,倒置显微镜观察细胞形态及增殖情况。同浓度Na F作用不同时间,免疫细胞化学法分别检测细胞内TNF-α和TNFR1的表达,采用Image-Pro Plus专业图像软件系统,用积分光密度值(integrated optical density,IOD)对成釉细胞内TNF-α和TNFR1蛋白表达进行定量分析。对照组为无氟干预成釉细胞。结果倒置显微镜观察,3.2 mmol/L Na F作用于成釉细胞12 h,细胞增长减缓,体积缩小,突触变短;作用时长至24 h,细胞体积进一步缩小,形态变圆,细胞或聚集成团或相互离散,细胞间失去通联,其间可见凋亡小体。3.2 mmol/L Na F作用于成釉细胞12 h和24 h,免疫细胞化学染色细胞内TNF-α和TNFR1的表达均呈阳性,IOD值均显著高于对照组(P<0.01)。与12 h相较,24 h细胞内TNF-α和TNFR1表达IOD值均显著升高(P<0.01)。结论氟会损伤成釉细胞,引起成釉细胞凋亡,TNF-α/TNFR1是调节成釉细胞凋亡的重要细胞因子和信号转导途径之一。
- 王琳王丹杨王峰谢娜
- 关键词：氟成釉细胞肿瘤坏死因子肿瘤坏死因子受体
- 氟对原代培养大鼠成釉细胞增殖、凋亡的影响被引量：2
- 2017年
- 目的探讨不同浓度氟对体外培养的原代大鼠成釉细胞增殖、凋亡的影响。方法分离出生4d的SD大鼠上下颌磨牙牙胚成釉细胞进行原代培养。采用0．0（对照组）、0．4、0．8、1．6、3．2、6．4mmol／L氟化钠（NaF）作用24、48、72h，倒置显微镜下观察细胞形态，免疫组织化学法鉴定成釉细胞，3-（4，5．二甲基噻唑．2）．2，5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）法检测各时间点细胞增殖情况。细胞经1．6mmol／LNaF处理24、48h或经50ixmoL／Lcaspase泛抑制剂Z．VAD．FMK预处理1h后给予1．6mmol／LNaF处理48h。流式细胞术检测细胞凋亡。蛋白免疫印迹法（Westernblot）检测caspase．3及多聚（ADP核糖）聚合酶（PARP）表达。采用统计软件SigmaStatV3．5对数据进行统计学分析。结果①细胞形态：成釉细胞密度较低时呈多角形，密度较大时呈铺路石样，细胞核明显，具有上皮来源细胞的典型形态特征。②免疫组织化学染色：培养的细胞细胞角蛋白14（CKl4）和成釉蛋白（AMBN）表达呈阳性，符合成釉细胞细胞免疫学特征。@MTr检测：NaF对成釉细胞增殖效应呈剂量和时间依赖性。低浓度NaF（0．4、0．8mmol／L）组经24h处理，细胞增殖指数（1．38±0．11、1．29±0．13）均显著高于对照组（1．00±O．00，P均〈0．05）；经48h处理，各处理组间细胞增殖比较差异无统计学意义（对照组、0．4、0．8mmol／L组增殖指数分别为l｜00±0．00、1．16±0．14、0．94±0．07，P均〉0．05）；经72h处理，0．4、0．8mmol／L组细胞增殖指数（0．87±0．03、0．80±0．04）均显著低于对照组（1.00±0．00，P均〈0．05）。中等浓度（1．6mmol／L）组经24h处理，细胞增殖指数（0．90±0．08）与对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；经48、72h处理，细胞增殖指数（0．38±0．03、0．26±0．04）均低于对照组（P均〈0．01）。高浓度（3�
- 王琳王峰谢娜王丹杨
- 关键词：氟成釉细胞细胞凋亡CASPASE-3
- 马尾松针提取物抑制根面牙本质脱矿的理化性能研究被引量：1
- 2017年
- 目的研究不同浓度马尾松针提取物(PMNE)对牙本质脱矿的理化性能影响,为PMNE抑制根面龋的研究提供实验依据。方法将离体牙根部牙体组织块分别放到去离子水(DDW)、氟化钠(Na F)、4%PMNE、8%PMNE及12%PMNE等5个组,每组10个试件(n=10)。在37℃条件下,各组试件经实验溶液、酸性缓冲液(p H5.0)和中性缓冲液(p H7.0)组成的p H循环,一天3次,共8天。用显微硬度计测定脱矿前后的牙体表面显微硬度差值(△SMH),电感耦合等离子体原子发射光谱仪测定并计算酸性缓冲液中的钙离子释出率(CDR)。结果 PMNE组CDR均显著低于DDW组,显著高于Na F组(P<0.05),且8%PMNE组CDR显著低于4%PMNE组(P<0.05);各PMNE组△SMH均显著低于DDW组(P<0.05),且8%PMNE组△SMH略高于Na F组,但无统计学意义(P>0.05),两者均显著低于4%和8%PMNE组。结论 PMNE溶液可抑制根面牙本质脱矿,减缓其表面硬度的降低,且8%浓度组效果较佳。
- 唐成芳阮建平石明娟徐红艳王峰谢娜
- 关键词：根面龋牙本质脱矿
