王文锋
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：南方医科大学更多>>
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- 成骨不全XV型WNT1基因突变影响成骨细胞分化的机制被引量：1
- 2021年
- 目的探讨成骨不全(OI)XV型患者中,WNT1 c.110T>C/p.I37T和c.505G>T/p.G169C错义突变对WNT1/β-catenin信号通路影响成骨细胞增殖分化的机制。方法构建野生型WNT1、WNT1c.110T>C突变体、WNT1 c.505G>T突变体、WNT1 c.884C>A突变体(阳性对照)和空质粒(载体,阴性对照)转染成骨前细胞(MC3T3-E1)。MTS法检测WNT1基因突变对细胞活性的影响,实时定量PCR(qPCR)和免疫印迹法(WB)分别检测BMP2和RANKL(成骨细胞和破骨细胞分化标志物)的表达。采用qPCR、WB和免疫荧光(IF)检测成骨细胞中WNT1的m RNA、蛋白表达水平与WNT1/β-catenin信号通路相关的蛋白表达水平。结果转染24 h后,WNT1野生型细胞活性显著高于空载组、c.505G>T及c.884C>A突变组,转染48 h后,c.110T>C和c.505G>T突变细胞活性较WNT1野生型细胞显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与野生型细胞株相比,c.110T>C和c.505G>T突变株中BMP2基因的表达显著水平降低,RANKL基因的表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。WNT1 mRNA在空载组,突变型组和野生型组中的表达量与空载组相比,WNT1在突变型组和野生型组中表达显著上升,差异有统计学意义(P<0.05)。与野生型细胞株相比,突变细胞株中非磷酸化β-catenin及磷酸化GSK-3β的表达水平较野生型显著下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论WNT1 c.110T>C和c.505G>T突变可能通过抑制WNT1/β-catenin信号通路影响成骨细胞增殖和成骨表型,这可能与OI有关。
- 张拔山李荣王文锋周雪明罗北京朱梓年张锡波丁爱娇
- 关键词：成骨不全成骨细胞WNT1基因突变Β-CATENIN
- 探讨外周血细胞形态学培训的重要性被引量：1
- 2015年
- 目的：探讨本科室外周血细胞形态学培训前后检验人员的素质情况和如何提高外周血细胞形态学质量的方法。方法：对本科室20名检验人员进行外周血细胞摸底考试，用多媒体对外周血细胞特征与常见血液病特征进行理论授课，分析他们对外周血细胞形态掌握情况，由经验丰富的形态学老师对他们制定围期1个星期的一对一、个体化、脱岗培训，按排血常规岗位的实践，最终以结业考试方式结束，整个培训长达6个月。结果：多数检验人员对常见的、典型的、正常的白细胞形态辨认符合率达70%以上，但是对于不典型、不正常的红细胞、血小板、幼稚细胞、浆细胞、寄生虫的辨认符合率明显减低；经过培训后检验人员形态学的辨认符合率明显提高。结论：现阶段检验人员外周血细胞形态学检查技术薄弱，加强外周血细胞形态的培训是提高检验人员专业素质的可行的办法。
- 钟玉钗郭志勤谢文锐王文锋
- 关键词：外周血细胞形态学
