邵燕
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
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- 人降钙素原重组表达、单、多克隆抗体的制备及ELISA检测方法
- 本发明公开了一种人降钙素原重组表达、单、多克隆抗体的制备及ELISA检测方法，包括以下步骤：(1)引物合成；(2)目的基因的重组表达及鉴定；(3)抗体制备及鉴定。本发明通过设计4条引物应用PCR扩增特定PCT该片段，构建...
- 杨慧黄庆生唐蕊华李晶车速李冀刘亚雄叶琳洁邵燕师俊玲
- 文献传递
- 一种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a转肽酶区的原核表达及纯化方法
- 本发明公开了一种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a转肽酶区的原核表达及纯化方法，包括以下步骤：(1)引物合成；(2)目的基因的扩增；(3)重组质粒的构建；(4)重组载体在大肠杆菌中的诱导表达；(5)重组蛋白的纯化。本发明...
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- 文献传递
- 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌青霉素结合蛋白2a转肽酶区的原核表达及其纯化
- 2015年
- 目的原核表达耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)青霉素结合蛋白2a(penicillin binding protein 2a,PBP2a)转肽酶区,并进行纯化及鉴定。方法 PCR扩增编码PBP2a转肽酶区的mec Af基因片段,克隆至原核表达载体p GEX-6p-1中,构建重组表达质粒p GEX-6p-mec Af,经双酶切(Bam HⅠ和Eco RⅠ)及测序鉴定正确后,转化感受态大肠埃希菌(E.coli)BL21进行诱导表达;经蛋白亲和层析柱纯化后,进行SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果重组表达质粒p GEX-6p-mec Af经双酶切(Bam HⅠ和Eco RⅠ)及测序鉴定证明构建正确;表达产物的相对分子质量约63 000,表达量约占菌体总蛋白的14.5%,纯化后纯度达90%。结论成功构建了PBP2a转肽酶区的原核表达质粒,目的蛋白在E.coli中获得高效表达,为制备单克隆抗体及建立MRSA快速检测方法奠定了基础。
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- 关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌青霉素结合蛋白2A原核细胞
