林中青
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：甘肃省高层次人才科技创新创业扶持行动项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 2001-2012年我国北方五省H9N2禽流感病毒进化和对小鼠致病性分析
- 我国1994年从广东鸡体内分离到第一株H9N2亚型禽流感病毒,1998年从香港猪体中分离到第一株H9N2猪流感病毒,以及1999年以来世界范围内发生的H9N2亚型流感导致人类感染的事实都充分证明,H9亚型流感不仅给养禽业...
- 林中青
- 关键词：H9N2遗传进化基因型生物学特性
- 文献传递
- H7N9亚型禽流感病毒血凝素和神经氨酸酶单因子血清的制备被引量：2
- 2014年
- 为获得特异性H7N9亚型禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)单因子血清,根据GenBank中A/Chicken/Zhejiang/SD007/2013毒株的序列人工合成了HA基因和NA基因,然后将其分别克隆至真核表达载体pCAGGS,构建了重组真核表达质粒pCAGGS-HA和pCAGGS-NA,经酶切和测序鉴定后将阳性重组质粒转染COS-7细胞,利用H7N9AIV鸡血清进行Western-blot分析。结果显示,重组质粒中的目的基因均能够成功表达。将重组质粒以每只200μg的剂量免疫4周龄SPF鸡,二免后第14天采集血清并用间接免疫荧光试验和Western-blot检测抗体。结果显示,免疫鸡产生的血清均能与对应质粒经COS-7细胞表达的蛋白发生特异性反应。结果表明,成功制备的H7N9AIV HA蛋白和NA蛋白单因子血清具有良好的反应原性,为提高H7N9AIV的血清学检测方法的准确性提供了一定技术支撑。
- 林中青王俊勇李小阳刘彬郭建宏朱启运
- 关键词：禽流感病毒真核表达
- 基因Ⅶ型新城疫病毒HN蛋白茎区居间序列突变株的拯救及其生物学特性的分析被引量：1
- 2014年
- 为了探究新城疫病毒(NDV)HN蛋白茎区居间序列氨基酸突变对其蛋白及病毒生物学特性的影响,利用overlapping PCR分别扩增包含E91A和S92A突变的HN基因,并将突变引入真核表达质粒pCAGGS及NDV全长cDNA中。通过红细胞吸附试验、神经氨酸酶试验等分析突变对蛋白功能的影响;并通过反向遗传操作技术拯救突变病毒,分析突变对病毒生物学特性的影响。结果显示,E91A突变能显著增强HN蛋白的红细胞吸附活性,同时显著降低神经氨酸酶活性;而S92A突变则导致蛋白的红细胞吸附活性及促融合功能显著下降;并且2个突变均会显著削弱病毒的复制能力,在一定程度上降低病毒毒力,影响其组织嗜性。研究结果表明,HN茎区居间序列的E91和S92氨基酸突变对蛋白及病毒的生物学特性具有重要影响,可作为减毒疫苗株改造及小分子药物设计的靶标位点。
- 刘彬吉艳红林中青朱启运
- 关键词：新城疫病毒HN蛋白生物学特性
