张海月
- 作品数：16 被引量：72H指数：5
- 供职机构：吉林农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省重大科技攻关项目国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 维氏气单胞菌生物膜体外模型的建立及影响因素的研究被引量：3
- 2015年
- 为探索不同理化因素对致病性维氏气单胞菌（Aeramonasveronii,AV）‘TH0426成膜的影响,采用改良微孔板法建立致病性AV生物膜体外模型并对其进行了研究。结果表明,AVTH0426能够在聚乙烯酶标板表面形成生物膜,PH值4~6,10℃和NaCl浓度4 g/L培养18 h是形成生物膜的最适条件,黄颡鱼（Pseudobagrusfulvidraco）的肝脏提取液对AV TH0426形成生物膜有促进作用。这为进一步探讨维氏气单胞菌生物膜形成机制和致病机理提供了参考。
- 夏京津张海月许瑞张冬星龙继兵徐洋沈锦玉康元环单晓枫钱爱东
- 关键词：维氏气单胞菌生物膜影响因素
- 大肠杆菌生物被膜与耐药性的关系被引量：8
- 2015年
- 生物被膜的形成是大肠杆菌引起消化道反复难治性感染的重要因素。大肠杆菌形成生物被膜后使感染易于慢性化、控制困难,具有高度耐药性的同时还能逃避免疫系统的攻击和抗菌药物的杀伤作用。生物被膜的耐药机制主要包括营养限制、渗透障碍、表型结构学说等。现就大肠杆菌生物被膜的形成、耐药机制及其防治策略等研究现状做一综述。
- 张海月康元环王姣姣张伟刘少昆单晓枫钱爱东
- 关键词：大肠杆菌生物被膜耐药机制
- 青虾源维氏气单胞菌胞外产物生物学特性及蛋白成分分析被引量：2
- 2017年
- 为了研究维氏气单胞菌胞外产物在青虾感染中的致病作用以及维氏气单胞菌的致病机理,本试验以青虾源维氏气单胞菌QXF0711B为研究对象,提取其胞外产物,采用打孔法测定其胞外产物的酶活性,并对溶血活性进行溶血谱分析,同时分析其致病性。应用液相质谱与串联质谱相结合方法(LC-MSMS)对其胞外产物蛋白成分进行鉴定,利用Gene Ontology(GO)对已鉴定蛋白进行生物学过程、分子功能和细胞组分的分类分析。结果表明:QXF0711B菌株胞外产物具有淀粉酶活性、脂肪酶活性、蛋白酶活性和溶血活性,不具有明胶酶活性;其可溶解多种动物红细胞,尤以对鱼类红细胞溶血性更强,但对鸡、鸭红细胞无溶血活性。通过对菌株胞外产物蛋白成分分析显示有90种蛋白:共参与45种生物学过程,主要涉及碳水化合物代谢过程、运输等;共有46种分子功能,主要涉及DNA结合、ATP结合、金属离子结合等;为12种细胞组分,主要包括膜的有机组成、细胞质、细胞外膜等。
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- 关键词：维氏气单胞菌胞外产物酶活
- 维氏气单胞菌TH0426株外膜蛋白lamB基因的原核表达及其免疫原性分析被引量：5
- 2017年
- 为研究维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)的免疫原性,本试验对A.veronii的lamB基因进行了克隆,构建了原核表达质粒pET-30a(+)-lamB,并转化大肠杆菌BL21(DE3),将其表达后纯化重组蛋白Maltoporin,利用SDS-PAGE和Western blot进行分析鉴定。将灭活菌体+弗氏佐剂、纯化的Maltoporin蛋白、Maltoporin蛋白+弗氏佐剂及PBS分别免疫鲤鱼后,检测每周各试验组鱼体血清的免疫指标:酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶活力以及IgM抗体水平变化情况,并于加强免疫2周后对鲤鱼进行攻毒保护性试验。结果显示:重组蛋白Maltoporin免疫鲤鱼后能产生明显的免疫反应,保护率在84.2%以上;免疫后鲤鱼血清中IgM抗体水平、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶及超氧化物歧化酶活力较对照组有显著提高。结果表明,重组蛋白Maltoporin具有较好的免疫原性和保护作用,为进一步研究A.veronii外膜蛋白基因工程疫苗奠定一定的基础。
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- 关键词：维氏气单胞菌原核表达免疫原性
- 中草药水提取物对牛源耐左氧氟沙星大肠杆菌的抑制活性研究被引量：4
- 2016年
- 为了解一些中草药水提取物对牛源耐左氧氟沙星大肠杆菌(E.coli)的抑菌作用,本研究检测了7株牛源E.coli分离株对左氧氟沙星的敏感性,并采用打孔法和微量倍比稀释法测定了20种中草药水提取物及其与左氧氟沙星联用对7株牛源耐左氧氟沙星E.coli分离株的抑制活性,评价抗菌活性较强的几种中草药分别与左氧氟沙星联用在体外抑菌效果。结果表明,7株受试菌株对左氧氟沙星的耐药率达100%;20种中草药水提取物中只有黄连、五倍子、乌梅、黄芩、五味子、鹿衔草及地榆的抑菌活性相对较高,但与左氧氟沙星联用后,其抑菌活性大部分降低。本研究结果为抑菌中草药方剂的研制提供了相关的实验依据。
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- 关键词：左氧氟沙星耐药性
- 黄金鲫致病性维氏气单胞菌的分离鉴定及耐药性分析被引量：3
- 2018年
- 为确定吉林省黄金鲫鱼发病死亡的原因，从患病黄金鲫体内分离到致病菌JLJ-1，对该茵进行形态学观察及生理生化特性的鉴定，并对16SrDNA和管家基因gyrB、rpoD、dnaJ序列、毒力基因携带情况及耐药性进行了分析。结果表明，该菌为革兰阴性菌，结合细菌形态学特征及其生理化生化特性与维氏气单胞菌（Aerornonas veronii，A．veronii）基本相同；16srDNA与gyrB、rpoD、dnaJ序列进化比对分析显示，该病原菌与A．veronii同属一个分支，且同源性较高。将分离菌人工感染黄金鲫，7d后黄金鲫全部死亡，且临床症状与自然病例相似。通过毒力基因检测发现。JLJ-1株可扩增出6种毒力因子：气溶素（aer）、细胞毒性肠毒素（act）、黏附素（Aha）、丝氨酸蛋白酶（set）、核酸酶（exu）及脂肪酶（liP）。药敏试验显示，该菌对氟苯尼考、头咆哌酮及头炮曲松等药物比较敏感。本研究为黄金鲫感染A．veronii的鉴定及治疗药物的选取提供科学依据。
- 贾俊鹏张冬星康元环张海月孙武文单晓枫钱爱东
- 关键词：维氏气单胞菌黄金鲫毒力因子药敏试验
- CRISPR/Cas9基因编辑技术在病原微生物中的应用被引量：4
- 2017年
- 规律成簇间隔短回文重复序列(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)广泛存在于古细菌及细菌中是细菌在长期进化过程中形成的一种获得性免疫系统。近年来以该系统为基础,经过人工改造形成的一种新型基因编辑技术—CRISPR/Cas9在基因工程领域的应用越发广泛;该技术与前两代编辑技术相比,具有结构简单、成本低廉、实用价值较高等优点。自2012年在基因研究领域成功应用后,已成为当前关注度较高的基因编辑工具;该技术在多种真核生物的基因修饰中已得到成功应用,但在病原微生物上却报道较少。本文将从CRISPR/Cas9系统的结构、作用机制及其在病原微生物基因功能研究中的应用等几个方面进行综述为其深入研究奠定基础。
- 安鼎杰康元环陈龙张海月张冬星田佳鑫贾俊鹏孙武文单晓枫钱爱东
- 关键词：病原生物
- 八味中草药对维氏气单胞菌TH0426生物膜形成的影响被引量：8
- 2016年
- 为了解中药对维氏气单胞菌(Aerornomas veronii,AV)TH0426株生物膜形成的影响。采用微孔板半定量法,研究五倍子、红花、黄连、鹿衔草、地榆、射干、姜厚朴及黄芩8味中药水煎液对AV TH0426株生物膜的影响。结果显示,低浓度五倍子、红花和黄连水煎液对菌株生长及生物膜形成均无明显影响;而高浓度五倍子和黄连水煎液可通过抑制菌株的生长来影响生物膜的形成,高浓度红花水煎液对生物膜抑制作用明显,且不影响菌株的正常生长;其余五味中药鹿衔草、地榆、射干、姜厚朴和黄芩对菌株的生长及生物膜形成无明显影响。表明高浓度五倍子、红花及黄连水煎液能抑制AV TH0426株生物膜的形成,具有抗AV TH0426株生物膜的作用,这将为从抗生物膜角度防治维氏气单胞菌提供有益参考。
- 张冬星康元环李温明张海月毕建飞单晓枫钱爱东田佳鑫
- 关键词：五倍子红花维氏气单胞菌生物膜
- 狐源维氏气单胞菌体内诱导基因的筛选被引量：1
- 2017年
- 为了筛选狐源维氏气单胞菌体内诱导基因,本研究将狐源维氏气单胞菌人工感染家兔,并取不同感染时期的血清混合,分别用体外培养的维氏气单胞菌和大肠杆菌BL21全菌、二者菌体裂解物以及热变性裂解物进行吸附,用ELISA进行检测;同时构建狐源维氏气单胞菌基因组的p ET系统重组质粒表达文库。再用经吸附处理的血清对狐源维氏气单胞菌基因组文库进行菌落原位免疫杂交筛选,将筛选的阳性克隆进行测序,并用RT-PCR进一步验证。结果显示,最终获得8个狐源维氏气单胞菌的体内诱导基因,分别为GTP焦磷酸激酶基因、转录调控基因Mar R基因、氢化酶细胞膜亚基基因、外膜受体转运蛋白Ton B基因、Ⅲ型分泌系统asc V基因以及3个保守假想蛋白基因。研究结果为维氏气单胞菌保护性抗原的筛选、分子致病机制及跨物种间传播机制奠定了基础。
- 张海月康元环吴同垒孙武文陈龙张冬星单晓枫钱爱东
- 关键词：维氏气单胞菌狐狸
- 维氏气单胞菌JLL-1株外膜蛋白的原核表达及其免疫原性检测
- 2017年
- 为研究维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)的免疫原性,本试验对A.veronii的OmpAⅠ基因进行克隆,构建了原核表达质粒pET-30a(+)-OmpAⅠ,并转入大肠杆菌BL21(DE3),将其表达后纯化重组蛋白,利用SDS-PAGE和Western blot分析鉴定。将灭活苗、弗氏佐剂(OmpAⅠ)、纯化蛋白及PBS缓冲液分别免疫鲤鱼后,检测每周各试验组鱼体血清非特异性免疫指标(酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶活力)及特异性IgM抗体水平变化情况,并于加强免疫2周后对鲤鱼进行攻毒保护性试验。结果显示:重组蛋白免疫鲤鱼后能产生明显的免疫反应,保护率在77%以上;受免鲤鱼血清中IgM抗体水平、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶及超氧化物歧化酶活力活力较对照组有显著提高。结果表明,重组蛋白OmpAⅠ具有较好的免疫原性和保护作用,为进一步研究外膜蛋白基因工程疫苗的开发奠定基础。
- 张冬星康元环陈亨利张海月田佳鑫单晓枫钱爱东
- 关键词：原核表达免疫原性
