王丹 作品数:10 被引量:21 H指数:3 供职机构: 苏州大学医学部 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省高校自然科学研究项目 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
丝素蛋白纳米纤维排列走向对星形胶质细胞生长发育的影响 被引量:2 2010年 目的探讨家蚕丝素纳米纤维的排列走向对星形胶质细胞生长发育的影响。方法取新生大鼠大脑皮层,原代培养获得混合细胞培养体系,并通过反复传代对星形胶质细胞进行纯化。将纯化的星形胶质细胞以2.5×105/ml的密度接种至直径为800nm不同走向(平行、乱序)的丝素纳米纤维上,对细胞的存活、铺展以及迁移进行检测。设立多聚赖氨酸(PLL)包被组作为对照。结果成功地建立了新生SD大鼠大脑皮层原代混合细胞培养体系;传至第4代时,星形胶质细胞得到纯化,GFAP阳性率达到92%以上;接种到材料上之后,细胞和家蚕丝素纳米纤维之间表现出很高的亲和力,细胞的胞体和突起按照纤维的走向排列。家蚕丝素纳米材料上的星形胶质细胞的存活率和铺展面积与PLL对照组之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。平行材料上细胞的突起长度比乱序材料上的要长(P<0.05),3种材料(平行、乱序、PLL)上的细胞迁移效率差异具有统计学意义(P<0.05),其中平行材料上的细胞迁移效率最高。结论家蚕丝素纳米纤维能支持星形胶质细胞的存活和生长,表现出良好的生物相容性;丝素纳米材料的走向影响了细胞的排布以及迁移。 吴丹 王丹 周春雷 郑彦文 张俊克 左保齐 张焕相关键词:星形胶质细胞 相容性 迁移 三氯乙烯对人胚胎干细胞心肌分化的影响和机制 被引量:3 2015年 目的:探讨三氯乙烯(TCE)对人胚胎干细胞心肌发育分化的影响。方法:以人胚胎干细胞H9体外心肌定向分化为模型,分化培养液中添加不同剂量的TCE(分别为处理组100 ppb组,1 ppm组,10 ppm组)以及DMSO(对照组)。对诱导后形成的拟胚体以及不同发育阶段的细胞进行检测,通过MTT法测定细胞的生存能力,统计有自主节律跳动的拟胚体的数量;流式细胞仪计数分析细胞分化比例;荧光定量PCR检测心肌特异性基因表达;并应用基因芯片方法初步筛选检测三氯乙烯对心肌细胞钙离子通道相关的基因表达的影响。结果:TCE的三个浓度处理组均未显示细胞毒性,但高浓度组明显抑制向心肌细胞分化,能产生自主节律搏动的拟胚体比例显著降低,同时心肌特异性标记物c Tn T表达随剂量的增加而显著降低。在具有自主节律性的拟胚体中,钙离子通路的相关基因表达受到影响。结论:推测TCE通过降低成熟心肌的比例,以及影响心肌细胞中钙离子通道相关基因表达来共同导致心脏发育异常。 王丹 陈涛 王国卿 姜岩关键词:三氯乙烯 人胚胎干细胞 心肌分化 基因表达 钙离子通道 血小板衍生生长因子对骨髓间充质干细胞向成神经细胞分化趋化性迁移的影响 被引量:1 2010年 目的初步探讨血小板衍生生长因子(PDGF)对成神经细胞分化不同阶段骨髓间充质干细胞(BMSCs)趋化性迁移的影响。方法密度梯度离心和贴壁培养法分离培养BMSCs,并予以传代。用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和丁羟基茴香醚(BHA)相结合的方法诱导BMSCs向成神经细胞分化,并用特异性标志物进行鉴定,利用Dunn chamber建立体外迁移模型,评估PDGF对不同分化阶段BMSCs定向迁移的影响。结果通过密度梯度离心和贴壁培养法获得了纯化的大鼠BMSCs。诱导组BMSCs变为神经元样细胞,而对照组的BMSCs形态无变化。Dunn chamber分析显示,分化不同阶段的BMSCs对PDGF的趋化程度不同:和对照组相比较,未诱导的BMSCs、预诱导24h和诱导5h的分化细胞的迁移速率得到明显提高(P<0.05);而未诱导的BMSCs、维持18h和维持48h的分化细胞的迁移效率明显升高(P<0.05)。结论 BMSCs可以被诱导分化为神经样细胞;分化不同时期的细胞有不同的迁移能力。 张俊克 郑彦文 吴丹 周春雷 刘靖 王丹 徐晓静 张焕相关键词:骨髓间充质干细胞 血小板衍生生长因子 分化 迁移 肝细胞生长因子对骨髓间充质干细胞迁移的影响 被引量:5 2010年 目的研究肝细胞生长因子(HGF)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)迁移的影响。方法采用Percoll密度梯度离心法分离BMSCs,进行表面抗原表达及分化鉴定。使用Dunn chamber装置研究BMSCs的定向迁移。并且研究PI3K抑制剂LY294002对HGF诱导BMSCs迁移的影响。结果分离培养的BMSCs呈CD29、CD90、CD106阳性表达,CD34、CD45阴性表达,BMSCs可诱导分化为成骨细胞及脂肪细胞。Dunn chamber迁移实验显示,外槽加入不同浓度的HGF,BMSCs迁移速率没有变化,迁移效率随着HGF浓度的增加而增加,50ng/ml与100ng/mlHGF均显著提高了细胞迁移效率;内外槽同时加入50ng/mlHGF,迁移速率与迁移效率均没有变化;经30μmol/LLY294002预处理1h后,HGF诱导的BMSCs的定向迁移受到抑制。结论 HGF能够趋化BMSCs的定向迁移,PI3K信号通路参与介导这一过程。 郑彦文 张俊克 周春雷 刘靖 王丹 吴丹 徐晓静 张焕相关键词:骨髓间充质干细胞 肝细胞生长因子 迁移 一氧化氮对末端病中骨及韧带的影响 2013年 背景:一氧化氮是最重要调节因子,是生物体内分子之间信息传递的重要信息使,是末端病的重要影响因素之一。目的:通过查阅一氧化氮与末端病相关的文章,并综述一氧化氮对末端病的作用。方法:由第一作者通过计算机检索CNKI、HighWire数据库中关于"一氧化氮与末端病"的相关的论文报告。以"一氧化氮,末端病"或"NO,enthesiopathy"为检索词进行检索。选择的文章内容与一氧化氮对末端病的作用有关,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章。共检索到135篇文章,按纳入和排除标准对文献进行筛选,共纳入43篇文章。结果与结论:虽然关于一氧化氮是否同时参与末端病发病及其修复的过程观点不一致,但是一氧化氮与末端病的发病密切相关。末端病大鼠模型已经证明了反复的机械应力诱导了末端组织结构的炎症病变及变性,但是各个学者关于引起其变化的细胞、分子生物学机制观点不一致。这些因素彼此之间是怎样的一种关系以及与外在负荷与一氧化氮是如何相互影响、相互协同而导致了末端病的产生,目前尚不清楚。 王文军 王丹 鲍捷 李盛村 程龙 王国祥关键词:末端病 一氧化氮 韧带 跟腱 关节囊 不同直径家蚕丝素纳米纤维对星形胶质细胞生长与迁移的作用 2010年 目的通过研究3种不同直径的家蚕丝素纳米纤维对纯化的星形胶质细胞生长发育的影响,寻找理想的家蚕丝素纳米纤维的物理参数,为后期使用再生丝素纤维改变神经损伤后形成的物理屏障和化学屏障提供参考和借鉴。方法将混合培养纯化的星形胶质细胞接种在3种不同直径的家蚕丝素纳米纤维材料上,分别选取各时间段的细胞进行星形胶质酸性蛋白(GFAP)特异性免疫荧光染色和活细胞拍摄,并统计不同时间段星形胶质细胞的增殖、铺展和迁移状况。结果第6d时400nm材料上星形胶质细胞的增殖和铺展面积与1200nm相比差异有统计学意义(P<0.05),但是3种直径的材料对星形胶质细胞铺展的最大长度没有显著作用。800nm和1200nm的材料在细胞增殖、铺展面积和最大长度上的差异都不大。结论家蚕丝素纳米材料的直径能影响星形胶质细胞的增殖和铺展,尤其是直径为400nm的材料。 王丹 吴丹 郑彦文 张俊克 周春雷 左宝齐 张焕相关键词:星形胶质细胞 直径 应力刺激与骨保护蛋白、核因子κB受体活化因子及其配体骨代谢信号通路 被引量:4 2012年 背景:骨保护蛋白、核因子κB受体活化因子及其配体(osteoprote-gerin/ligand of receptor activator of NF-κB/receptor activator of NF-κB,OPG/RANKL/RANK)骨代谢信号通路是对应力敏感的通路之一。不同性质的运动会产生不同的机械应力刺激,影响骨代谢信号通路。目的:观察不同性质的运动对OPG/RANKL/RANK信号通路的影响。方法:由第一作者于2000/2011通过计算机检索CNKI,HighWire和Elsevier数据库中关于"应力刺激与OPG/RANKL/RANK"的相关的论文报告。以"应力刺激,OPG/RANKL/RANK"或"应力刺激,骨代谢"为检索词进行检索。选择的文章内容与应力刺激对信号通路的影响有关,选择相关近期发表的文献或者是发表在权威期刊的文献。共检索到215篇文章,按纳入和排除标准对文献进行筛选,共纳入31篇文章。结果与结论:运动对骨骼不断产生机械应力刺激,这种机械应力刺激可以通过影响成骨细胞和破骨细胞的OPG/RNAKL/RANK信号调节系统而调节骨组织代谢。但是相关文献中的研究结果不一致,有待进一步的研究。 王丹 鲍捷 王国祥关键词:应力刺激 信号通路 骨代谢中甲状旁腺激素对相关蛋白和核因子κB受体活化因子的调节 被引量:2 2013年 背景:甲状旁腺激素是影响骨代谢功能轴最主要的因素。同时也是调控骨保护素和核因子κB受体活化因子配基表达的重要激素。目的:通过查阅甲状旁腺激素对骨保护素、核因子κB受体活化因子配基调控作用的相关文章,并对其进行综述。方法:以"甲状旁腺激素,骨保护蛋白,核因子κB受体活化因子"或"Parathyroid hormone,osteoprotegerin,receptor activator of nuclear factor κB ligand"为检索词,由第一作者通过计算机检索CNKI、HighWire数据库中关于"甲状旁腺激素与骨保护素/核因子κB受体活化因子配基/核因子κB受体活化剂"的相关的论文报告。选择的文章内容与甲状旁腺激素对信号通路的影响有关、近期发表的文献,按纳入和排除标准对文献进行筛选,共纳入31篇文章。结果与结论:甲状旁腺激素是调节骨代谢最主要的因素,通过增强破骨细胞活动增强而实现的。核因子κB受体活化因子配基是调节骨吸收的关键因子,它通过与核因子κB受体活化剂结合发挥功能。核因子κB受体活化因子配基与核因子κB受体活化剂结合后,启动核因子κB受体活化因子配基信号转导,骨保护素则与核因子κB受体活化因子配基竞争性结合核因子κB受体活化剂,核因子κB受体活化因子配基/骨保护素比值决定破骨细胞分化、成熟及功能。长时间、大强度的运动条件下,机体内甲状旁腺激素的变化是否对于骨保护素、核因子κB受体活化因子配基有影响,进而调节骨代谢的吸收与合成?还有待进一步的研究。 王丹 鲍捷 王国祥关键词:甲状旁腺激素 骨保护蛋白 核因子ΚB受体活化因子 破骨细胞 SDF-1α对不同分化状态下NPCs迁移能力的影响 被引量:4 2009年 神经干细胞(neural progenitor/stem cells,NPCs)的迁移在神经系统发育及损伤修复中起着非常关键的作用,然而其内在作用机制及影响因素尚不明了。在本研究中,我们从新生远交群(Sprague Dawley,SD)大鼠的脑室下区(the subventricular zone,SVZ)中纯化并培养NPCs,使用含有1%胎牛血清的H-DMEM对其进行诱导分化,通过延时动态视频(time-lapsevideo)对处于不同分化状态的NPCs的迁移能力进行分析。结果表明,相对于NPCs分化末期(24-48h),基质细胞衍生因子1á(stromal cell-derived factor1α,SDF-1á)可显著提高其分化早期(0-24h)的迁移距离。与之相比,在NPCs分化的整个过程(0-48h)中,通过分析单个细胞迁移角度的变化发现SDF-1α显著促进并维持单个细胞的迁移持续性。这一现象说明NPCs的迁移特征与其不同分化状态之间有着非常紧密的内在联系。 苏军 王敏 包普花 王丹 刘孟宇 张焕相关键词:神经干细胞 迁移 分化 基质细胞衍生因子1Α 脑室下区 干细胞因子诱导神经干细胞定向迁移 2010年 神经干细胞(neural stem cells,NSCs)能够定向追踪胶质瘤,然而其内在作用机制及影响因素尚不明了。本实验运用Boyden chamber及Dunn chamber来研究干细胞因子(stem cell factor,SCF)诱导C17.2神经干细胞的趋化性迁移。Boyden chamber结果显示,下室加入SCF后迁移至膜下方的C17.2细胞数显著多于对照组;Dunn chamber结果显示,仅在外槽加入SCF的C17.2细胞迁移速率及迁移效率显著高于内外槽均加入SCF的细胞,单个细胞迁移轨迹分析表明仅在外槽加入SCF后细胞朝着浓度梯度方向迁移而内外槽均加入SCF后细胞的迁移则无规律。这些结果表明,SCF能够诱导C17.2细胞的定向迁移,为进一步了解神经干细胞定向追踪胶质瘤提供了理论依据。 周春雷 魏友华 刘靖 郑彦文 张俊克 王丹 吴丹 苏军 张焕相关键词:神经干细胞 干细胞因子 趋化性 迁移