葛璐
- 作品数：10 被引量：67H指数：4
- 供职机构：江苏大学附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金镇江市科技支撑计划江苏省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 二甲双胍对人胰腺癌细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响及机制被引量：11
- 2018年
- 目的探索不同浓度二甲双胍对人胰腺癌Panc-1细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响及其可能的分子机制。方法用不同浓度的二甲双胍处理人胰腺癌Panc-1细胞后,采用MTT法检测其对癌细胞增殖能力的影响,流式细胞术检测其对细胞凋亡和细胞周期的影响,Western blot观察PTEN、p-Akt(Ser473)、mTOR蛋白表达水平的变化。结果干预48 h时,不同浓度二甲双胍(0.5、2.0和8.0 mmol)对细胞生长的抑制率依次为(7.20±5.92)%、(18.35±4.77)%和(33.45±4.10)%;72 h时对细胞生长的抑制率分别为(24.81±4.04)%、(53.42±4.18)%和(61.36±2.00)%。该抑制作用随着药物浓度增加和干预时间延长而增强,呈药物浓度依赖性和时间依赖性。流式细胞术检测结果显示,二甲双胍干预48 h时,8.0 mmol组G_1期细胞比例与对照组和0.5 mmol组比较,差异有统计学意义(P<0.05),8.0 mmol组低于对照组和0.5 mmol组;G_2/M期细胞比例与对照组和0.5 mmol组比较,差异有统计学意义(P<0.05),8.0 mmol组高于对照组和0.5 mmol组。二甲双胍作用48 h时8.0 mmol组细胞的中晚期凋亡率为(12.64±2.74)%,与对照组(7.01±1.14)%和0.5 mmol组(6.19±0.32)%比较,差异有统计学意义(P<0.05),8.0 mmol组高于对照组和0.5 mmol组。Western blot检测结果显示二甲双胍作用48 h时,2.0 mmol组和8.0 mmol组与对照组和0.5 mmol组比较,PTEN蛋白表达量差异有统计学意义(P<0.05),2.0 mmol组和8.0 mmol组升高,而p-Akt(Ser473)和mTOR的表达水平降低。结论二甲双胍能抑制人胰腺癌Panc-1细胞的增殖能力,引起G_2/M细胞周期阻滞,同时诱导胰腺癌细胞的凋亡,其可能的机制是通过激活PTEN的表达,抑制PI3K/Akt/mTOR通路。
- 徐萍蒋小猛葛璐黄红梅周朦张尤历徐岷
- 关键词：二甲双胍胰腺肿瘤细胞周期PTENPI3K/AKT/MTOR
- 下调长链非编码RNA PVT1表达对胰腺癌BxPC-3细胞凋亡、侵袭及转移的影响被引量：4
- 2016年
- 目的研究下调长链非编码RNA PVT1的表达对胰腺癌细胞增殖、凋亡及侵袭转移能力的影响。方法体外转染PVT1干扰序列si PVT1-1和si PVT1-2降低胰腺癌细胞系Bx PC-3 PVT1表达,同时转染阴性对照si PVT1-NC作为对照组。CCK-8实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞侵袭转移;qRT-PCR检测E-cadherin、N-cadherin、β-catenin、vimentin和PVT1 mRNA表达;Western blot检测凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、caspase-3)和上皮间质转化相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、β-catenin、vimentin)表达。结果下调胰腺癌细胞Bx PC-3 PVT1表达能明显抑制细胞增殖、促进细胞凋亡和减少细胞侵袭转移数目(P<0.05);E-cadherin蛋白和分子水平升高,N-cadherin、β-catenin、vimentin蛋白和分子水平降低(P<0.05);Bax和caspase-3蛋白水平升高,而Bcl-2蛋白水平降低(P<0.05)。结论下调长链非编码RNA PVT1表达能抑制胰腺癌细胞增殖和侵袭转移能力,促进胰腺癌细胞凋亡,且能够逆转胰腺癌细胞上皮间质转化。
- 张行行赵义王珏倪鑫刘鑫葛璐徐岷
- 关键词：长链非编码RNA胰腺癌上皮间质转化
- 精氨酸甲基转移酶5通过Hippo通路促进胰腺癌细胞的增殖、迁移和转移能力
- 徐岷葛璐张行行倪鑫黄红梅龚爱华彭婉昕张尤历
- PRMT5对肝癌细胞增殖及凋亡的影响被引量：6
- 2015年
- 该文目的为探讨蛋白质精氨酸甲基转移酶5(protein arginine methyltranserase 5,PRMT5)对肝癌细胞增殖、凋亡的影响。设计PRMT5短发夹核糖核酸(sh RNA)序列,装入p LKO.1-TRC vector质粒,进行慢病毒包装,感染肝癌细胞SMMC-7721和BEL-7402,嘌呤霉素筛选并培养稳定低表达PRMT5细胞株。Western blot、q PCR检测sh RNA干扰效率;CCK-8检测细胞增殖活性;平板克隆法检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测细胞增殖、凋亡相关蛋白的影响。结果显示,成功构建慢病毒重组质粒sh-PRMT5并感染肝癌细胞。Western blot、q PCR结果表明,筛选出的稳转细胞株能低表达PRMT5;在肝癌细胞中下调PRMT5的表达,可抑制细胞增殖(P<0.05),降低cyclin B1、cyclin D1、cdc20和cdc25B蛋白质水平(P<0.05),降低细胞克隆形成能力(P<0.05),促进细胞凋亡(P<0.05),同时能诱导Caspase-3表达,降低Bcl-2/Bax的比值(P<0.05)。由此说明,下调PRMT5的表达能抑制肝癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,为进一步研究体内PRMT5的作用提供基础。
- 张尤历葛璐陆瑛胡昌龙张行行彭琬昕何俊波龚爱华徐岷
- 关键词：肝癌增殖凋亡
- 长链非编码核糖核酸UCA-1对胰腺癌细胞侵袭转移能力的影响被引量：2
- 2015年
- 目的探讨尿路上皮癌胚抗原1(UCA-1)在胰腺癌细胞侵袭转移中的作用。方法采用实时荧光定量PCR检测5株胰腺癌细胞长链非编码核糖核酸UCA-1的表达;采用UCA-1表达质粒提高PaTu8988细胞的UCA-1水平,小干扰RNA用于降低BxPC-3细胞的UCA-1表达。用Transwell侵袭实验和迁移实验观察转染后的PaTu8988细胞和BxPC-3细胞的侵袭和迁移能力变化,Western blot检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9的表达。结果 UCA-1差异性表达于5株胰腺癌细胞。过表达UCA-1后,PaTu8988细胞的MMP-2和MMP-9的蛋白水平均增加,侵袭和迁移能力增强(P<0.001);而干扰UCA-1后,BxPC-3细胞的MMP-2和MMP-9的蛋白表达均降低,侵袭和迁移能力减弱(P<0.001)。结论 UCA-1的高表达能增强胰腺癌细胞的体外侵袭转移能力。
- 赵义张尤历王国英张行行龚爱华葛璐李杰倪鑫刘鑫徐岷
- 关键词：胰腺癌
- 超声引导下微波消融单次治疗多发甲状腺结节的疗效和安全性评估被引量：35
- 2018年
- 目的研究超声引导下经皮穿刺微波消融单次治疗双侧甲状腺多发良性结节的近期疗效,并评估其治疗的安全性。方法回顾性分析85例接受超声引导下单次微波消融治疗的甲状腺多发结节患者治疗及随访资料。结果消融前症状评分和美容评分随着消融结节数量增加而升高(P<0.001),手术和消融时间随着结节数量的增加而增加(P<0.001),而消融手术所需液体隔离带的量和术中疼痛评分在各组之间未见显著差异。所有患者未发生喉返神经损伤及颈部大出血等严重并发症,甲状腺功能在术前、术后1个月、3个月和6个月检查组间未见统计学差异。术后6个月,患者最大结节体积和消融结节总体积的减小率为分别为63.0%和69.5%。术后患者的症状评分从术前的(4.41±1.75)cm降到术后6个月的(1.00±0.76)cm,美容评分从术前的(2.27±0.81)降到术后6个月(1.25±0.43)。结论超声引导下经皮穿刺微波消融治疗甲状腺双侧多发结节,能够单次有效治疗多个甲状腺症状性结节,并且能够保护甲状腺的生理功能,值得临床进一步推广应用研究。
- 徐萍徐岷葛璐陈宝定
- 关键词：微波消融甲状腺结节
- 甲基化CpG结合域蛋白MBD2对胰腺癌细胞增殖和迁移的影响
- 2016年
- 该文探讨甲基化Cp G结合域蛋白2(methyl-Cp G-binding domain protein 2,MBD2)对人胰腺癌细胞增殖和迁移的影响。将干扰质粒MBD2 sh RNA转染入MBD2高表达的Pa Tu8988细胞和SW1990细胞中,运用CCK-8法检测细胞的增殖活性并绘制生长曲线,克隆形成实验检测细胞克隆形成率,Transwell检测细胞迁移率。结果显示,下调MBD2后,Pa Tu8988细胞中MBD2基因的表达量明显降低,细胞增殖减慢,克隆形成率降低,细胞迁移率减少;在SW1990细胞中下调MBD2基因后,得到类似结果。由此说明,沉默MBD2基因可以抑制胰腺癌细胞Pa Tu8988和SW1990的增殖和迁移,为进一步研究MBD2在胰腺癌细胞增殖与迁移中的作用机制奠定了基础。
- 张尤历王桢何俊波魏虹葛璐李杰龚爱华徐岷
- 关键词：胰腺癌克隆形成细胞增殖
- 长链非编码RNA PCGEM1促进胰腺癌细胞增殖和迁移被引量：7
- 2016年
- 该文的目的为探讨长链非编码RNA PCGEM1(long non-coding RNA PCGEM1,lnc RNAPCGEM1)对胰腺癌细胞增殖和迁移的影响。通过荧光定量PCR检测三种胰腺癌细胞以及人胰腺癌组织和癌旁组织中PCGEM1的表达水平,分别在Bx PC3和Pa Tu8988细胞中转染p CDH-PCGEM1及其空载质粒p CDH,在SW1990细胞中转染si RNA和其对照si RNA,分别上调或下调PCGEM1在不同胰腺癌细胞中的表达;细胞克隆形成、CCK-8实验检测细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞迁移能力;Western blot法检测MMP2、MMP9和E-钙黏着蛋白的蛋白表达以及荧光定量PCR检测MMP2和MMP9水平。结果表明,PCGEM1差异性表达于三种胰腺癌细胞中,其中SW1990表达水平相对较高,Bx PC3和Pa Tu8988表达水平相对较低。胰腺癌组织中PCGEM1水平高于癌旁组织。过表达PCGEM1后,细胞增殖和迁移能力增强,MMP2和MMP9的蛋白质水平增加,E-钙黏着蛋白的蛋白质水平降低;相反,降低PCGEM1表达,细胞增殖和迁移能力减弱,MMP2和MMP9的蛋白质水平降低,E-钙黏着蛋白的蛋白质水平升高。由此说明,lnc RNA PCGEM1可促进胰腺癌细胞的增殖和迁移。
- 徐岷倪鑫葛璐刘鑫周海浪黄红梅蒋小猛彭琬昕张尤历龚爱华
- 关键词：长链非编码RNA胰腺癌增殖迁移
- siRNA干扰即刻早期基因Egr-1对汉防己甲素诱导的胰腺癌细胞自噬、凋亡的作用研究被引量：1
- 2015年
- 本实验将胰腺癌细胞Pa Tu8988分别转染无关干扰对照组(si RNA-Scramble)和干扰即刻早期基因Egr-1组(si RNA-Egr-1),再用不同浓度的汉防己甲素处理24 h后,CCK-8法检测不同浓度的汉防己甲素对细胞活力的影响;Western blot检测细胞自噬和凋亡相关蛋白表达水平的改变.结果表明:(1)低浓度的汉防己甲素能显著激活Pa Tu8988细胞自噬,但对增殖和凋亡无明显影响;(2)与对照组相比,转染了si RNA-Egr-1组自噬相关蛋白Be-clin-1表达量显著下降,LC3II/LC3I比值下调;凋亡相关蛋白Bcl2/Bax的比值降低.上述结果表明,干扰即刻早期基因Egr-1的表达可以有效抑制低浓度汉防己甲素引起的胰腺癌细胞Pa Tu8988自噬,促进细胞凋亡.
- 彭琬昕万燕雅葛璐金洁龚爱华吴朝阳
- 关键词：胰腺癌汉防己甲素EGR-1细胞自噬
- Gadd45g基因对垂体瘤AtT-20细胞的增殖、凋亡和自噬的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨生长阻滞及DNA损伤诱导基因45g(Gadd45g)过表达及靶向沉默对垂体瘤AtT-20细胞及小鼠原代星型胶质细胞的增殖、凋亡及自噬等影响。方法构建Gadd45g基因的CDS区序列克隆至真核表达质粒p3XFLAG-Gadd45g及其shRNA真核表达质粒pLKO.1-sh-Gadd45g,将p3XFLAG-Gadd45g转染至小鼠垂体瘤AtT-20细胞中。其shRNA真核表达质粒pLKO.1-purosh-Gadd45g进行慢病毒包装,病毒感染小鼠星形胶质细胞;Western blot检测FLAG-Gadd45g融合蛋白的表达及RT-PCR检测shRNA沉默效率,CCK-8检测细胞增殖活力,Western blot检测其对凋亡蛋白、自噬蛋白的影响。结果 Gadd45g及其特异性shRNA真核表达质粒构建成功。构建的p3XFLAGGadd45g质粒在垂体瘤AtT-20细胞中能够表达;Gadd45g shRNA具有沉默效率。在垂体瘤AtT-20细胞中过表达Gadd45g,可明显抑制细胞增殖,并能诱导Caspase-3表达,降低Beclin 1表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ的比值(P<0.05)。与之相反,在原代培养的星形胶质细胞中,shRNA干扰Gadd45g表达,可促进细胞增殖,并降低Caspase-3表达,而增加Beclin 1表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ的比值(P<0.05)。结论垂体瘤中Gadd45g的表达缺失可能使得垂体瘤AtT-20细胞凋亡受阻及自噬作用增强,从而促进垂体瘤的发生、发展。恢复垂体瘤细胞中Gadd45g的表达及抑制垂体瘤细胞自噬作用有望成为垂体瘤治疗的新方法。
- 胡昌龙杨勇陈波王景文张锋胡维葛璐龚爱华王安利李巧玉
- 关键词：垂体瘤
