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吕英姿: 作品数：17 被引量：36H指数：4; 供职机构：广东出入境检验检疫局更多>>; 发文基金：广东出入境检验检疫局科技计划项目广东省科技计划工业攻关项目中央高校基本科研业务费专项资金更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生更多>>

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转基因苜蓿草J163品系特异性实时荧光PCR检测方法的建立被引量：4: 2015年; 目的建立针对我国农业部未颁发农业转基因生物安全证书的转基因苜蓿草品系J163品系特异性实时荧光(Polymerase Chain Reaction,PCR)检测方法。方法利用Taq Man实时荧光PCR(real-time PCR)技术,根据转基因苜蓿草品系J163 5’端外源插入片段P-e FMV与苜蓿草基因组DNA之间的邻接区序列设计引物和探针,建立了转基因苜蓿草J163品系特异性实时荧光PCR检测方法,并对本方法的特异性、灵敏度及可重复性进行了测定。结果建立的检测方法特异于转基因苜蓿草J163成分检测,检测最低DNA浓度为(1imit of detection,LOD)为15 pg,相当于9拷贝转基因苜蓿草J163基因组DNA,重复性试验显示,其标准偏差(Standard deviation,SD)和相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均在可接受范围内。结论本研究建立的转基因苜蓿草J163品系特异性实时荧光PCR检测方法特异性好,灵敏度高,能够快速、准确、稳定地对转基因苜蓿草J163成分进行检测分析。; 刘二龙卢丽吕英姿蒋湘张旺林惠娇郑高彬唐婕林学勤秦焯敏; 关键词：实时荧光PCR

转基因苜蓿草J101品系特异性定性PCR检测方法的建立被引量：1: 2015年; 目的建立转基因苜蓿草J101品系特异性定性PCR检测方法。方法根据转基因苜蓿草品系J101 5’端外源插入片段与苜蓿草基因组DNA之间的邻接区序列设计引物,建立了转基因苜蓿草J101品系特异性定性PCR检测方法,并对本方法的特异性、灵敏度进行了测定。结果建立的检测方法特异于转基因苜蓿草J101检测,检测最低DNA浓度为(1imit of detection,LOD)为80 pg,相当于50拷贝转基因苜蓿草J101基因组DNA。结论本研究建立的转基因苜蓿草J101品系特异性定性PCR检测方法特异性好,灵敏度高,能够快速、准确地对转基因苜蓿草J101进行检测分析。; 刘二龙卢丽吕英姿蒋湘张旺唐婕郑高彬林学勤符其姣

黑斑皮蠹与花斑皮蠹的鉴定方法及其专用引物: 本发明公开了一种黑斑皮蠹与花斑皮蠹的鉴定方法及其专用引物。本发明提供的引物对，由引物组1和引物2组成；上述引物对中，所述引物1和引物2的核苷酸序列分别为序列表中序列1和序列表中序列2。本发明的实验证明，本发明根据斑皮蠹属...; 班丽萍蒋湘刘聪樊武疆王新国林惠娇吕英姿刘二龙; 文献传递

转基因鲑鱼AquAdvantage品系特异性实时荧光聚合酶链式反应检测方法的建立被引量：1: 2017年; 目的实现转基因鲑鱼AquAdvantage的标识管理,建立其品系特异性实时荧光聚合酶链式反应(PCR)检测方法。方法针对转基因鲑鱼的品系特异性序列设计引物和TaqMan探针,建立转基因鲑鱼实时荧光PCR检测方法,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行检测。结果建立的转基因鲑鱼实时荧光PCR方法特异性强,在600 000~60拷贝范围内呈良好的线性关系,其线性回归方程为y=-3.2194x+40.805,R^2=0.997,检测限为60拷贝,检测重复性良好。结论建立的品系特异性实时荧光PCR方法可应用于转基因鲑鱼AquAdvantage的鉴定。; 刘二龙卢丽吕英姿蒋湘李立霞李嘉琪杜雅萍郑高彬

化脓隐秘杆菌TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：3: 2015年; 本试验旨在建立检测化脓隐秘杆菌(Arcanobacterium pyogenes,A.pyogenes)特异、灵敏的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。根据GenBank公布的化脓隐秘杆菌溶血素(pyolysin,PLO)基因高保守序列,设计特异性引物和探针建立检测体系,用于化脓隐秘杆菌的快速检测,并对该方法的特异性和灵敏度进行检测。结果显示,本试验建立的TaqMan实时荧光定量PCR方法仅对化脓隐秘杆菌的检测结果为阳性;该方法最低检测DNA浓度为77.6fg,最低检测细菌浓度为63CFU/mL。采用本研究建立的方法检测23份林麝临床病例样品,共鉴定出16株化脓隐秘杆菌,与API Coryne生化鉴定方法的结果相同。本研究为化脓隐秘杆菌的检测提供了一种灵敏、特异、快速的检测方法,其可用于化脓隐秘杆菌的诊断和流行病学调查。; 刘二龙卢丽唐婕吕英姿郑高彬蒋湘; 关键词：化脓隐秘杆菌

花斑皮蠹和黑斑皮蠹(鞘翅目:皮蠹科)的快速分子鉴定被引量：7: 2012年; 斑皮蠹属昆虫个体小,形态高度相似,仅依据外部形态难以鉴定。用线粒体细胞色素氧化酶亚基I(COI)基因的通用引物,分别以黑斑皮蠹(Trogoderma glabrum)、花斑皮蠹(Trogoderma variabile)的DNA为模板,进行PCR扩增、测序。比较二者COI的碱基序列,找出所有序列多态性位点及相应的限制性内切酶,最终选取限制性内切酶AflⅡ对二者进行酶切。结果表明,黑斑皮蠹的COI序列可被限制酶AflⅡ切开,形成535bp和347bp两部分,而花斑皮蠹COI片段中因不具有AflⅡ酶切位点而不能被切开,从而将二者成功区分,实现对黑斑皮蠹和花斑皮蠹的快速分子鉴定。; 刘聪蒋湘樊武疆王新国吕英姿林惠娇刘二龙夏来群班丽萍; 关键词：花斑皮蠹 COI基因酶切分子鉴定

转基因苜蓿草KK179-2品系特异性实时荧光PCR检测方法的建立: 2017年; 根据转基因低木质素苜蓿草品系KK179-2 5’端外源插入序列与苜蓿草基因组DNA之间的邻接区序列设计引物和探针,建立了KK179-2品系特异性实时荧光PCR检测方法,并对其特异性、灵敏度及可重复性进行了测定。结果表明:建立的定量实时荧光PCR检测方法特异性良好;标准曲线线性相关系数(R^2)为0.99,扩增效率E为105%;检测限为20拷贝,定量限为200拷贝。重复性实验显示本方法的标准偏差(SD)及相对标准偏差(RSD)都在可接受范围内。综上,建立的KK179-2品系特异性定量PCR检测方法适于快速、准确、稳定地对转基因苜蓿草KK179-2品系进行检测。; 刘二龙卢丽吕英姿蒋湘李嘉琪林学勤杜雅萍郑高彬

出入境动物源性食品中单增李斯特菌的多位点序列分型分析被引量：3: 2016年; 对出入境动物源性食品中分离的单增李斯特菌进行多位点序列分型（mutilocus sequence typing,MLST）分析,了解其序列型分布特点及不同菌株之间的亲缘关系。提取单增李斯特菌基因组DNA,选择其7个管家基因进行聚合酶链式反应扩增并测序。将测序结果截成标准序列的长度后上传到MLST数据库进行比对分析,获得7个管家基因的等位基因谱和序列分型编码,并将结果采用不加权算术平均组对（unweighted pair group method using arithmetic averages,UPGMA）法进行聚类分析。89株单增李斯特菌共获得51个STs,其中26个为新获得的STs（STnew1-STnew26）;数量最多的5个STs为ST8（9.0%）,ST121（9.0%）、ST7（5.6%）、ST87（5.6%）及新发现的STnew3（7.8%）;其中ST456、ST34、ST343、ST19、ST517、ST201、ST98、ST330和ST73为在国内首次获得。采用UPGMA算法得到的进化树可将89株菌株分为3大类群,分类的结果与单增李斯特菌血清学家系分类结果一致。MLST结果对了解出入境动物源性食品中分离的单增李斯特菌的亲缘关系及流行病学溯源有重要意义。; 刘二龙袁慕云邓建英幸芳吕英姿蒋原薛峰邵景东许龙岩; 关键词：单增李斯特菌多位点序列分型亲缘关系

黑斑皮蠹与花斑皮蠹的鉴定方法及其专用引物: 本发明公开了一种黑斑皮蠹与花斑皮蠹的鉴定方法及其专用引物。本发明提供的引物对，由引物组1和引物2组成；上述引物对中，所述引物1和引物2的核苷酸序列分别为序列表中序列1和序列表中序列2。本发明的实验证明，本发明根据斑皮蠹属...; 班丽萍蒋湘刘聪樊武疆王新国林惠娇吕英姿刘二龙

一种基于微滴数字PCR定量检测红薯成分的试剂盒及其应用: 本发明提供了一种基于微滴数字PCR定量检测红薯成分的试剂盒及其应用，属于分子生物学检测领域。基于微滴数字PCR定量检测红薯成分的试剂盒，包括BETA‑AMY基因的上游引物、β‑AMY基因的下游引物和β‑AMY基因的探针；...; 刘二龙李志勇吕英姿董旭婉刘婧文关丽军; 文献传递

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