于莉娜
- 作品数：7 被引量：12H指数：3
- 供职机构：南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 简易的单个肿瘤干细胞分离及其培养方法
- 2012年
- 目的建立一套简单有效的单个肿瘤干细胞分离及培养方法,提高研究的效率与质量。方法在火焰上轻烤拉伸后的毛细管,与无菌塑料管连接建立口控毛细管单细胞分离装置。分离单个SW480细胞无血清培养筛选出克隆球,CD133、CK7荧光标记鉴定;消化克隆球吸取单个肿瘤干细胞并移至石蜡油封闭的微滴及96孔板中培养对比观察。结果 SW480细胞克隆形成率约为1.04%,其CD133表达强CK7表达弱;口控毛细管单细胞分离装置分离单个肿瘤干细胞的有效率可高达98.99%;单个肿瘤干细胞在微滴中培养与在96孔板中培养的比较:在分裂时间点上,前两次分裂时间相差无几(P>0.05),在微滴中培养的细胞后续分裂需时较长;在持续扩增的数量上,微滴培养为11.5%(22/192)而96孔板为9.2%(17/184),两者差异无统计学意义(P>0.05)。结论单个SW480细胞无血清培养可形成肿瘤干细胞球,口控单细胞分离装置能够有效分离单个肿瘤干细胞,石蜡油封闭微滴培养法和96孔板培养法均能够有效扩增单个肿瘤干细胞。但石蜡油封闭微滴培养法操作灵活、观察便捷、环境稳定,可作为培养单个肿瘤干细胞的首选。
- 邓永键蒋强于莉娜于莉娜于莉娜王红霞丁彦青
- 关键词：肿瘤干细胞
- Tiam1持续过表达促进多脏器细胞增殖能力的体内研究被引量：2
- 2019年
- 目的以T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam1)转基因小鼠及裸鼠为实验载体,探讨Tiam1过表达在细胞增殖中的功能及作用。方法将Tiam1^+/+转基因小鼠及野生型ICR小鼠多器官组织取材、包埋、制片并进行病理形态学观察,免疫组织化学检测增殖标志物Ki-67的表达;利用裸鼠皮下成瘤实验观察Tiam1过表达对结直肠癌细胞株HT29的体内增殖能力的影响。结果Tiam1+/+转基因小鼠的结直肠、胃、肺、肾脏以及睾丸组织均较野生型小鼠表现出更为旺盛的增殖能力;Tiam1稳定过表达能够显著促进结直肠癌细胞株HT29裸鼠皮下肿瘤增殖能力,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论Tiam1持续过表达能够在体内水平促进小鼠多脏器细胞及结直肠癌细胞的增殖能力。
- 于莉娜于莉娜翁雅倩吴晶晶布威阿丽耶杨敏慧
- 关键词：T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1增殖转基因小鼠裸鼠
- GOLPH3在6种肿瘤中的表达特点被引量：3
- 2019年
- 目的:探讨反面高尔基网的癌基因GOLPH3在人胃腺癌(STAD)、肝细胞癌(HCC)、乳腺癌(BRCA)、子宫内膜癌(UCEC)、睾丸生殖细胞肿瘤(TGCT)及前列腺癌(SART)组织中的表达特点。方法:应用生物信息技术对GOLPH3的肿瘤组织分布情况进行分析,筛选出GOLPH3表达上调癌组织-STAD、BRCA、UCEC及TGCT;应用免疫组织化学SP法分别检测人STAD、HCC、BRCA、UCEC、TGCT及SART组织(n=30)及其癌旁组织(n=10)中GOLPH3蛋白的表达水平,采用逆转录定量PCR(qRT-PCR)技术检测人STAD细胞株、人HCC细胞株、人BRCA细胞株、人SART细胞株及其相对应的对照细胞株中GOLPH3mRNA表达水平,分析GOLPH3表达水平与恶性肿瘤的关系。结果:GOLPH3广泛表达于多个人体正常组织,在STAD、HCC、BRCA、UCEC、TGCT、SART肿瘤细胞中表达显著上调;免疫组织化学及qRT-PCR结果显示,GOLPH3的蛋白及mRNA在相应实体恶性肿瘤组织及细胞株中的表达水平较癌旁组织或对照细胞的表达水平显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:GOLPH3表达上调可能在STAD、BRCA、UCEC、TGCT、HCC及SART的发生发展过程中发挥重要促进作用。
- 于莉娜于莉娜赵佩佩翁雅倩刘桢华兴
- 关键词：肿瘤生物信息学免疫组织化学QRT-PCR分子标志物
- 1，2-二甲肼对小鼠结直肠与卵巢的影响被引量：1
- 2011年
- 目的探讨1,2-二甲肼（1,2-dimethylhydrazine,DMH）对小鼠结直肠与卵巢的影响。方法 60只雌性ICR小鼠随机平均分为A、B两组,A组给予腹腔注射DMH（20mg/kg,每周1次,连续24周）,B组注射生理盐水作为对照,首次注射后12、16、20、24、28和32周分批处死小鼠,观察其结直肠与卵巢病理形态学改变。结果 A组小鼠结直肠发生显著病理改变,DMH注射1216周后,小鼠结直肠上皮出现不同程度增生改变,20周后,2只小鼠发生结直肠肿瘤,并且随DMH作用时间的延长,肿瘤发生率逐渐增加,至32周共有7只小鼠发生结直肠腺瘤,5只结直肠腺癌,且肿瘤主要位于距肛门8cm内;值得注意的是,A组小鼠卵巢也发生明显病理改变,32周内共见21只A组小鼠发生卵巢血肿伴慢性炎症改变,而且,28和32周各发现1只A组小鼠卵巢出现绒毛膜癌病理学改变。实验过程中B组小鼠均未见异常。结论 DMH对小鼠结直肠与卵巢组织形态学变化具有显著影响。
- 李新于莉娜张庆玲齐鲁丁彦青
- 关键词：1,2-二甲肼结直肠卵巢
- 新抑癌基因WTX在肾肿瘤中的表达及意义被引量：3
- 2011年
- 目的探讨定位于X染色体的新抑癌基因WTX mRNA及其蛋白在肾肿瘤及对应正常肾组织中的表达及意义。方法采用地高辛标记cDNA探针原位杂交及免疫组织化学S-P法检测40例肾细胞癌、10例肾母细胞瘤以及对应正常肾组织中WTX mRNA及其蛋白的表达情况。结果 WTX mRNA及其蛋白在正常肾组织中普遍高表达,而在肾母细胞瘤中表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.001),在肾细胞癌中表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。WTX mRNA与蛋白表达具有较好的一致性。结论 WTX抗体的应用为WTX蛋白的生物学功能研究奠定了实验基础。WTX表达降低与肾肿瘤有关,可能在肾肿瘤的发生、发展中发挥重要作用。
- 张庆玲于莉娜丁彦青
- 关键词：肾肿瘤X染色体
- 慢病毒载体法在制备转基因小鼠模型中的应用
- 2009年
- 目的改进慢病毒载体法制备转基因小鼠的操作技术,分别从病毒浓缩、受精卵显微注射进针点和如何提高病毒注射效率等方面探讨慢病毒显微注射技术的最佳方案。方法超速离心获得浓缩慢病毒,通过卵周隙显微注射技术感染小鼠受精卵,比较不同注射点显微注射后受精卵存活率及发育情况。结果受精卵1点和5点作为注射点的卵周隙注射组可有效避免注射针与卵膜的直接碰触,减少对受精卵的损伤,胚胎存活率较常规中轴3点作为注射点组显著提高(P<0.01)。适当的病毒滴度和注入量、操作细节、注射针口径等均可影响注射后受精卵存活率和感染率。结论卵周隙显微注射过程中选择适当的注射点以及部分操作的改进,可显著提高受精卵的存活率,为提高转基因小鼠模型的制备效率提供参考。
- 于莉娜张庆玲丁彦青
- 关键词：慢病毒载体转基因鼠
- Tiam1基因慢病毒表达载体构建及其在HT29细胞中的表达被引量：3
- 2010年
- 目的:构建Tiam1与绿色荧光蛋白(GFP)融合基因慢病毒表达载体,观察其在人结直肠癌HT29细胞中的表达。方法:通过酶切Tiam1/C1199HA质粒获得Tiam1cDNA片段,并将其克隆到慢病毒载体表达质粒pCDF1-copGFP中,经酶切、测序鉴定。慢病毒表达质粒和包装质粒共转染293FT细胞,获得携带Tiam1和GFP融合基因的重组慢病毒。取病毒上清感染人结直肠HT29细胞株,荧光显微镜检测绿色荧光蛋白及免疫细胞化学检测Tiam1在靶细胞中的表达。结果:重组慢病毒质粒pCDF1-Tiam1-copGFP酶切鉴定结果与目的基因条带吻合,克隆测序结果与NCBI收录的Tiam1基因序列(NM_003253)完全一致。重组慢病毒质粒可高效转染293FT细胞,病毒包装效率为88.34%。收获慢病毒上清可高效感染HT29细胞,荧光显微镜下可观察到大量绿色荧光,感染效率为55.89%,感染后靶细胞中Tiam1稳定高表达。结论:成功构建了携带Tiam1与GFP融合基因的慢病毒表达载体pCDF1-Tiam1-copGFP,并使目的基因在靶细胞中得到稳定表达,为进一步研究Tiam1基因的相关功能提供了优质的稳定转染载体。
- 于莉娜张庆玲李新丁彦青
- 关键词：TIAM1基因慢病毒载体基因转染
