陈浙
- 作品数：12 被引量：19H指数：3
- 供职机构：浙江大学更多>>
- 发文基金：国家教育部“211”工程国家现代农业产业技术体系建设项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 分泌抗甘蔗花叶病毒单抗杂交瘤细胞株及其单抗应用
- 本发明公开了一种分泌抗甘蔗花叶病毒云南株系单抗的杂交瘤细胞株及其单抗的应用。以纯化的甘蔗花叶病毒(SCMV)粒子为抗原免疫BALB/c小鼠，经细胞融合、筛选、克隆，获得1株能稳定传代并分泌抗SCMV云南株系单克隆抗体的杂...
- 吴建祥周雪平陈浙
- 文献传递
- 侵染西瓜的黄瓜绿斑驳花叶病毒快速检测被引量：2
- 2016年
- 黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)是危害西瓜生产的重要病害,造成西瓜果实腐烂,失去商业价值。应用透射电子显微镜和单抗dot-ELISA技术对采自浙江温岭的西瓜病叶进行快速病原检测,电镜负染色观察到病株汁液中存在大量刚直杆状的病毒粒子,超薄切片观察到细胞质内存在整齐排列的杆状病毒聚集体,与烟草花叶病毒属(Tobamovirus)的形态特征相符;进一步采用dot-ELISA技术进行血清学检测,显示西瓜病叶与CGMMV特异性抗体呈阳性反应,检测结果表明感染西瓜的杆状病毒为CGMMV。从而为侵染西瓜的CGMMV提供快速检测途径。
- 宋西娇陈浙薛惠明王荣洲吴宏宇吴建祥洪健
- 关键词：西瓜黄瓜绿斑驳花叶病毒负染色超薄切片DOT-ELISA
- 分泌抗甘蔗花叶病毒单抗杂交瘤细胞株及其单抗应用
- 本发明公开了一种分泌抗甘蔗花叶病毒云南株系单抗的杂交瘤细胞株及其单抗的应用。以纯化的甘蔗花叶病毒(SCMV)粒子为抗原免疫BALB/c小鼠，经细胞融合、筛选、克隆，获得1株能稳定传代并分泌抗SCMV云南株系单克隆抗体的杂...
- 吴建祥周雪平陈浙
- 分泌抗小西葫芦黄化花叶病毒单抗杂交瘤细胞株及其单抗应用
- 本发明公开了一种分泌抗小西葫芦黄化花叶病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其单抗的应用。用纯化的小西葫芦黄化花叶病毒（ZYMV）的病毒粒子为抗原免疫BALB/c小鼠，经细胞融合、筛选、克隆，获得1株能稳定传代并分泌抗ZYMV单...
- 吴建祥周雪平陈浙宋革
- 文献传递
- 检测南方水稻黑条矮缩病毒胶体金免疫试纸条的建立被引量：4
- 2017年
- 由白背飞虱Sogatella furcifera(Horváth)传播的南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice blackstreaked dwarf virus,SRBSDV)是目前我国南方水稻上危害最严重的病毒,为开发简便、快速、准确的SRBSDV病毒检测技术和检测试剂,以感染SRBSDV的植物粗提液为免疫原,利用杂交瘤技术制备了2株抗SRBSDV的单抗(14A8和15G6),并利用制备的单抗建立了可快速、特异、灵敏地检测SRBSDV的胶体金免疫试纸条。结果表明,2株制备单抗的抗体类型及亚类均为Ig G1、kappa链,单抗腹水的间接ELISA效价均达到10^(-7);Western blot分析表明,2株单抗均与SRBSDV的外壳蛋白亚基有特异反应,而不与水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)反应。以制备14A8和15G6单抗分别为捕获抗体和胶体金标记抗体,开发成能在5 min内准确、特异地检测水稻植物和白背飞虱传毒介体体内SRBSDV的胶体金免疫试纸条;灵敏度分析表明,该检测试纸条的检测水稻病叶的灵敏度达到1∶6 400倍(g/m L),检测单头携毒白背飞虱的灵敏度达到1∶51 200倍(单头/μL)。田间样品检测结果表明,该试纸条的检测结果与RT-PCR的符合率达到100%。建立的SRBSDV胶体金免疫试纸条可对南方水稻黑条矮缩病毒进行快速、特异、灵敏的诊断和检测。
- 吴建祥饶黎霞陈浙傅帅周雪平
- 关键词：南方水稻黑条矮缩病毒单克隆抗体白背飞虱
- 分泌抗小西葫芦黄化花叶病毒单抗杂交瘤细胞株及其单抗应用
- 本发明公开了一种分泌抗小西葫芦黄化花叶病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其单抗的应用。用纯化的小西葫芦黄化花叶病毒（ZYMV）的病毒粒子为抗原免疫BALB/c小鼠，经细胞融合、筛选、克隆，获得1株能稳定传代并分泌抗ZYMV单...
- 吴建祥周雪平陈浙宋革
- 西瓜花叶病毒(WMV)单克隆抗体的制备及其应用被引量：3
- 2016年
- 【目的】制备抗西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus,WMV)的特异性单克隆抗体,并以其为核心建立能快速有效地检测WMV的血清学方法,从而为中国田间西瓜花叶病毒病的诊断和检测、预测预警及科学防控体系的建立提供物质和技术支撑。【方法】用提纯的WMV病毒粒子免疫BALB/c小鼠,经细胞融合和细胞培养、抗体筛选和细胞克隆等杂交瘤细胞技术,获得能稳定分泌抗WMV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,将杂交瘤细胞注射入BALB/c小鼠腹腔制备其单抗腹水,并以制备的单抗为核心建立能准确、特异、灵敏地检测田间植物中WMV的ACP-ELISA、DAS-ELISA、dot-ELISA、Tissue blot-ELISA和IC-RT-PCR方法,以及能检测单头传毒介体蚜虫体内WMV的dot-ELISA方法。【结果】3株能稳定分泌WMV单克隆抗体的杂交瘤细胞株(2C8、15A8和16C12)及其单抗腹水被制备,3株杂交瘤细胞分泌的单抗腹水的间接ELISA效价均达到了10^(-6)以上,抗体类型及亚类均为IgG1、kappa轻链。Western blot分析发现,这3个单抗均与WMV的外壳蛋白亚基有特异性反应。灵敏度分析结果表明,ACP-ELISA、DAS-ELISA、dot-ELISA和IC-RT-PCR方法检测WMV病叶的灵敏度分别达到1﹕163 840、1﹕327 680、1﹕5 120和1﹕1 310 720倍稀释(w/v,g/m L)。特异性分析结果表明,以这3个单抗为核心建立的ACP-ELISA、DAS-ELISA、dot-ELISA、Tissue blot-ELISA和IC-RT-PCR 5种血清学检测方法均能与感染WMV的病叶发生特异性免疫反应,而与感染小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)的植物样品、健康白南瓜、西瓜、葫芦和烟草的植物组织均呈阴性反应,且dot-ELISA方法还能特异性地检测单头蚜虫体内的WMV,而在检测无毒蚜虫时呈阴性反应。利用建立的血清学检测方法对采自浙江省、
- 陈浙宋革周雪平吴建祥
- 关键词：单克隆抗体DAS-ELISADOT-ELISAIC-RT-PCR
- 一种快速检测南方水稻黑条矮缩病毒的胶体金免疫试纸条及其制备方法
- 本发明公开了一种快速检测南方水稻黑条矮缩病毒的胶体金免疫试纸条及其制备方法。一株能分泌抗SRBSDV单抗的杂交瘤细胞株15G6，其保藏号为CGMCC No.12006，将其分泌的单抗经胶体金标记后为金标抗体，并包被在聚酯...
- 吴建祥周雪平陈浙
- 文献传递
- 一种快速检测南方水稻黑条矮缩病毒的胶体金免疫试纸条及其制备方法
- 本发明公开了一种快速检测南方水稻黑条矮缩病毒的胶体金免疫试纸条及其制备方法。一株能分泌抗SRBSDV单抗的杂交瘤细胞株15G6，其保藏号为CGMCC？No.12006，将其分泌的单抗经胶体金标记后为金标抗体，并包被在聚酯...
- 吴建祥周雪平陈浙
- 西瓜花叶病毒和小西葫芦黄花叶病毒复合侵染南瓜的透射电镜诊断被引量：10
- 2015年
- 应用透射电镜和RT？PCR技术对浙江龙游的南瓜黄化花叶病株进行病原诊断，电镜负染色观察到病株汁液中存在大量线状病毒粒子，超薄切片观察到病叶细胞质中存在III型、Ⅳ型两种类型的风轮状内含体，细胞质中膜结构增生形成许多小泡结构，叶绿体产生周边空泡。用西瓜花叶病毒（ WMV）和小西葫芦黄花叶病毒（ ZYMV）特异性引物扩增到622 bp和696 bp目的片段，序列测定发现与WMV和ZYMV 同源性分别为88％～95％、93％～99％。根据以上结果诊断南瓜病株为WMV和ZYMV复合侵染。
- 宋西娇陈浙何步远李艳敏王荣洲吴建祥洪健
- 关键词：南瓜西瓜花叶病毒小西葫芦黄花叶病毒透射电镜RT-PCR检测
