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Sp1基因RNA干扰载体的构建及鉴定被引量：2: 2008年; 目的:构建干扰载体pSilencer3.1-Sp1,并初步研究其对Sp1基因的干扰作用。方法:根据Sp1cDNA编码序列,设计并合成针对Sp1基因的特异性RNA干扰片段,并将其克隆入pSilencer3.1-H1neo干扰载体中,构建Sp1基因小干扰RNA(siRNA)真核表达载体pSilencer3.1-Sp1;分别将阴性对照载体pSilencer3.1与重组载体pSilencer3.1-Sp1经脂质体LipofectAMINE2000介导转染HeLa细胞,采用RT-PCR、Western blot方法分别检测Sp1基因的转录与表达水平。结果:构建了Sp1基因siRNA真核表达载体pSilencer3.1-Sp1,经酶切、测序鉴定证实克隆正确,并在mRNA水平和蛋白水平证实了载体的干扰效果。结论:特异性siRNA能明显抑制Sp1基因在HeLa细胞中的表达,为进一步研究Sp1的生物学功能和作用机制奠定了实验基础。; 曲璇陈苏宁吴琳申亮亮林伟赵华栋刘新平张健; 关键词：RNA干扰小干扰RNA

糖代谢重编程在肿瘤上皮-间质转变过程中的生物学意义: 2018年; 上皮-间质转变(epithelial to mesenchymal transition,EMT)即成熟组织中的上皮细胞转变成具有迁移能力的间质细胞,该过程在恶性肿瘤的侵袭和转移过程中发挥重要作用。随着肿瘤的发生发展,细胞在恶性转变的同时往往会发生代谢方式的重编程,从依赖线粒体氧化磷酸化产生ATP的代谢方式转变为通过糖酵解途径吸收和利用葡萄糖。本文主要对肿瘤糖代谢重编程与细胞EMT转变关系的研究进展进行了综述。; 李明哲曲璇张芮茹懿申亮亮; 关键词：肿瘤糖代谢上皮-间质转变

Sirt3过表达载体的构建及表达: 2016年; 目的:在HEK293细胞中获得Sirt3全长基因,构建其高效真核表达载体。方法:提取人HEK293细胞总RNA,反转录合成c DNA,以特异性引物扩增Sirt3全长基因并克隆入pc DNA3.1载体,筛选阳性克隆进行序列测定后,鉴定其表达情况。结果:PCR扩增得到特异性的约1000 bp的片段,序列测定结果表明与国外已发表的序列完全一致;将构建的pc DNA3.1-Sirt3质粒转入AGS和SGC-7901细胞,检测到Sirt3的m RNA和蛋白表达水平均提高。结论:构建获得Sirt3基因高效真核表达载体,将用于Sirt3的功能研究。; 曲璇张芮李军左艳万文涛马晓军袁银娜韩洛川史海龙申亮亮; 关键词：基因扩增真核表达载体

Skp2过表达载体的构建及表达被引量：1: 2016年; 目的:在HEK293细胞中获得Skp2全长基因,构建其高效真核表达载体。方法:提取人HEK293细胞总RNA,反转录合成c DNA,以特异性引物扩增Skp2全长基因并克隆入p Babe载体,筛选阳性克隆进行序列测定后,鉴定其表达情况。结果:PCR扩增得到特异性的约1300 bp的片段,序列测定结果表明与国外已发表的序列完全一致;将构建的p Babe-Skp2质粒转入HEK293细胞,与空质粒对照相比,Skp2的m RNA和蛋白表达水平均提高,并且p27蛋白水平降低。结论:构建获得Skp2基因高效真核表达载体,将用于Skp2的功能研究。; 曲璇张芮李军左艳万文涛马晓军袁银娜韩洛川史海龙申亮亮; 关键词：SKP2 基因扩增真核表达载体

c-Myc在三阴性乳腺癌中的生物学意义被引量：2: 2017年; 三阴性乳腺癌(TNBC)恶性程度高,预后差,严重危害人类健康。癌基因c-Myc作为Myc家族的重要一员,在促进和维持肿瘤的发生发展、肿瘤细胞增殖分化与凋亡、肿瘤组织血管形成等方面发挥重要作用。为了深入理解TNBC的发生机制,我们分别从细胞增殖、周期、凋亡、代谢等方面总结并归纳了c-Myc在TNBC中的生物学意义。; 李明哲曲璇张芮申亮亮; 关键词：三阴性乳腺癌生物学意义

重组泛素连接酶PTB-U-box/RING的构建与表达: 2011年; 目的构建重组泛素连接酶PTB-U-box、PTB-RING,并克隆进入pFLAG-CMV4真核表达载体,为研究靶向降解受体型酪氨酸激酶IGF-IR,抑制肿瘤细胞生长提供基础.方法分别设计引物,扩增接头分子IRS-1的PTB结构域以及E3泛素连接酶CHIP的U-box、Cbl的RING结构域,再利用重组PCR,将PTB分别与U-box、RING进行融合,双酶切之后将其插入真核表达载体pFLAG-CMV4,经过酶切鉴定及测序后,转染HeLa细胞,Western 印迹验证重组质粒的表达.结果 PCR结果显示PTB-U-box条带大小840 bp,PTB-RING大小为620 bp,重组质粒经酶切鉴定和测序结果正确,转染后可见融合蛋白的表达.结论成功构建真核重组表达载体pFLAG-CMV4-PTB-U-box和 pFLAG-CMV4-PTB-RING,并且转染HeLa细胞后证实其能够正确表达.; 王秦豪茹懿申亮亮李霞药立波; 关键词：重组质粒

蛋白质乙酰化修饰在肿瘤发生、治疗中的作用研究进展被引量：3: 2014年; 蛋白质分子链在乙酰基转移酶的作用下嫁接一个乙酰基，此过程称为蛋白质的乙酰化修饰，是一种普遍存在的翻译后修饰现象。蛋白质（包括组蛋白和非组蛋白）的乙酰化修饰主要发生在赖氨酸上。随后的功能研究［1］显示，蛋白质乙酰化修饰对蛋白质的功能可以产生很大的影响，包括酶的活化与失活、蛋白质稳定性、亚细胞结构定位和特殊功能复合体的形成等。最近有研究发现，大部分组蛋白在肿瘤细胞呈低乙酰化状态，组蛋白乙酰化修饰能够调控基因的表达，并且其在肿瘤发生、发展中扮演重要角色。蛋白质乙酰化修饰在肿瘤发生中的作用逐渐成为研究热点，已有研究者将其应用于肿瘤的临床治疗中。现将蛋白质乙酰化修饰在肿瘤发生、治疗中的作用综述如下。; 李惠晨马勇政申亮亮张健; 关键词：乙酰化修饰组蛋白非组蛋白 P53蛋白

PBL教学法在研究生分子生物学实验课程中的应用分析被引量：10: 2016年; 研究生教育是我国培养高素质人才的重要环节。在医学院校,分子生物学实验课程作为衔接理论知识与实际应用的纽带,对研究生的临床实践、科学研究能力的培养具有重要意义。我们在多年教学经验的基础上,在研究生实验课程中引入了PBL(problem based learning)教学模式,以提出科学问题的方式,将实验中涉及到的质粒DNA提取、核酸电泳、蛋白印迹、细胞转染等分子生物学实验技术进行整合,增加了学生学习的热情,同时锻炼并培养了学生的提出问题、解决问题的科研思维能力。; 申亮亮曲璇张健药立波; 关键词：研究生教学 PBL教学法分子生物学实验

分枝杆菌计数方法的比较研究被引量：8: 2007年; 目的：建立牡牛分枝杆菌的快速检测方法．方法：采用紫外分光光度计法、测湿重法、平板菌落计数法测定细菌数，建立紫外分光光度计法、测湿重法对平板菌落计数法的标准曲线．结果：建立了紫外分光光度计法和湿重法相对于平板计数法的标准曲线，通过准确度分析表明在细菌含量在每毫升10^5～10^8之间时，两标准曲线线性关系良好．结论：该方法可用于牡牛分枝杆菌的快速计数．; 罗泰来申亮亮柏银兰薛莹

数字化三维正颌手术设计与模拟系统在本科生教学中的应用被引量：10: 2017年; 牙颌面畸形患者常需要采用正畸结合正颌手术治疗的方法进行矫正。由于正颌外科学手术设计灵活抽象,操作复杂,如何使本科生在短时间内理解并掌握正颌手术的相关知识一直是口腔颌面外科临床教学的难点。数字化三维手术设计与模拟系统应用于本科生教育,既形象直观又可进行模拟手术操作,可使本科生加深对牙颌面畸形和正颌外科手术的理解和知识点的掌握。与传统教学方法相比,数字化三维手术设计与模拟系统是一种更加科学有效的本科生教学方式。; 蔡卜磊任荣李岩申亮亮; 关键词：正颌外科学本科生教学

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申亮亮

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