林远洪
- 作品数:15 被引量:30H指数:4
- 供职机构:简阳市人民医院更多>>
- 发文基金:重庆市自然科学基金四川省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- RNAi抑制EGFR基因增强卵巢癌细胞对泰素敏感性的研究被引量:1
- 2009年
- 目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因在卵巢癌细胞对泰素敏感性的增强作用。方法构建针对EGFR基因序列特异性shRNA的表达载体,用脂质体转染卵巢癌SKOV3细胞及G418筛选阳性克隆。采用RT-PCR、Western blot检测EGFR基因的抑制情况,用MTT法检测卵巢癌细胞对泰素的敏感性。结果靶向EGFR的序列特异性shRNA可明显抑制EG-FR基因的表达,EGFR mRNA和蛋白的抑制率分别为77.5%和76.1%;序列特异性shRNA-EGFR可明显提高卵巢癌细胞对泰素的敏感性,差异有统计学意义(P<0.01)。结论体外实验证实抑制EGFR基因的表达可提高卵巢癌细胞的化疗敏感性。
- 林远洪吴永忠郭启帅罗茜黄环
- 关键词:EGFR基因泰素卵巢癌
- RNAi沉默EGFR基因对卵巢癌放疗敏感性的影响
- 2009年
- 目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因对卵巢癌放疗敏感性的增强作用。方法构建针对EGFR基因序列特异性短发夹状RNA(shRNA)表达载体,应用卵巢癌SKOV3细胞建立裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组、单纯放疗组、基因放疗组,采用6MVX线照射裸鼠瘤组织,监测瘤体积,测量瘤质量,取瘤组织行RT-PCR、Western印迹、免疫组化、电镜检测。结果治疗后三组瘤体积差异均显著(均P<0.01),单纯放疗组、基因放疗组的抑瘤率分别为28.1%、46.1%,基因放疗组EGFR基因的表达明显下调,透射电镜下瘤组织凋亡、坏死最明显。结论动物实验证实RNAi沉默EGFR基因明显提高卵巢癌的放疗敏感性。
- 林远洪吴永忠李少林郭启帅罗茜
- 关键词:EGFR基因RNA干扰放疗卵巢癌
- RNA干扰EGFR基因对卵巢癌细胞放疗敏感性影响的实验研究
- 2010年
- 目的:构建针对表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)基因的小于扰RNA(Small interference RNA,siRNA)质粒,转染人卵巢癌SKOV3细胞株后,检测RNA干扰(RNA interference,RNAi)对EGFR基因表达及评估细胞对放疗敏感性的影响。方法:体外构建EGFR小发卡状RNA(Short hairpin RNA,shRNA)的表达质粒,脂质体法转染入SKOV3细胞及G418筛选阳性克隆。实验随机分为阳性RNA干扰组(A组)、阴性RNA干扰组(B组)、空白对照组(C组)。采用RT-PCR、Western Blot技术检测EGFR mRNA及其蛋白质的表达情况。分别给予不同放射剂量(0、2、4、6、8Gy)照射,MTT法绘制细胞存活曲线。结果:靶向EGFR的序列特异性shRNA可明显抑制EGFR基因的表达,EGFR mRNA和蛋白的抑制率分别为77.5%和76.1%;序列特异性shRNA-EGFR可明显提高SKOV3细胞对放疗的敏感性,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:体外研究表明RNAi沉默EGFR基因可以提高卵巢癌SKOV3细胞对放疗的敏感性。
- 罗茜吴永忠林远洪郭启帅黄环
- 关键词:EGFR基因RNA干扰卵巢癌放疗敏感性
- RNA干扰EGFR基因家族真核表达载体的构建被引量:1
- 2008年
- 目的:构建针对表皮生长因子受体(Epidermal growth factor recepter,EGFR)家族的小分子发夹状RN(A Small hairpinRNA,shRNA)干扰质粒表达载体,为本课题下一步研究提供有力工具。方法:选择放疗不敏感的卵巢癌细胞SKOV3中高表达的EGFR家族同源性基因为靶基因,根据shRNA的设计原则,设计实验组及对照组shRNA。体外合成2段编码短发夹RNA序列的DNA单链,退火,克隆到相应载体pGensil-1的polⅢ启动子下游。结果:经酶切和DNA测序鉴定成功构建了EGFR家族同源性基因的RNA干扰表达载体,分别命名为pGensil-1-E及pGensil-1-C。为下一步体外、体内实验奠定了基础。
- 黄环吴永忠李少林郭启帅林远洪彭志平
- 关键词:RNA干扰真核细胞表达载体
- 子宫动脉栓塞术治疗前后宫颈癌患者血流动力学及微血管密度的变化研究被引量:4
- 2013年
- 目的:探讨子宫动脉栓塞术治疗前后宫颈癌患者血流动力学及微血管密度的变化情况。方法:采用子宫动脉栓塞术进行治疗的49例宫颈癌患者为观察组,同时期的49名健康妇女为对照组,将观察组治疗前、治疗后3d、7d与对照组的子宫动脉血流动力学指标及微血管密度进行比较。结果:观察组治疗后3d与7d的血流动力学及微血管密度指标均低于治疗前,治疗后7d均低于治疗后3d,且治疗前及治疗后3d均高于对照组,观察组中不同分期者的变化均较大,P均<0.05。结论:子宫动脉栓塞术治疗前后宫颈癌患者血流动力学及微血管密度的变化较为明显,对不同分期患者的干预效果均较好。
- 王文辉彭振宇雷小林林远洪
- 关键词:子宫动脉栓塞术宫颈癌血流动力学微血管密度
- EGFR shRNA表达载体的构建及对卵巢癌移植瘤放疗敏感性的影响
- 第一部分:EGFR shRNA表达载体的构建及鉴定
目的:构建针对EGFR基因家族序列特异性的shRNA表达载体,为本课题下一步研究提供有力工具。
方法:选择放疗不敏感的卵巢癌SKOV3细胞中高表...
- 林远洪
- 关键词:EGFR基因卵巢癌放疗卵巢癌
- 文献传递
- 吉西他滨联合高强度聚焦超声治疗中晚期胰腺癌的临床观察被引量:4
- 2011年
- 目的:探讨吉西他滨联合高强度聚焦超声(HIFU)治疗中晚期胰腺癌的疗效和安全性。方法:64例中晚期胰腺癌患者随机分为两组,A组:高强度聚焦超声治疗;B组:吉西他滨联合高强度聚焦超声治疗,比较两组的疗效、临床受益率和不良反应。结果:A组有效率43.8%、B组75.0%(P<0.05),A组临床受益率56.3%,B组84.4%(P<0.05);B组6个月、12个月生存率分别高于A组;两组不良反应差异无统计学意义(P>0.05)。结论:吉西他滨联合高强聚焦超声治疗中晚期胰腺癌具有更好的疗效。
- 雷小林林远洪段廷旺李铁莲
- 关键词:吉西他滨高强度聚焦超声胰腺癌
- RNAi沉默EGFR基因在卵巢癌裸鼠移植瘤的成瘤抑制作用被引量:1
- 2009年
- 目的:探讨应用RNA干扰技术沉默EGFR基因对卵巢癌SKOV3细胞成瘤力的抑制作用。方法:构建针对EGFR序列特异性dsRNA的表达载体,用脂质体转染SKOV3细胞及G418筛选阳性克隆。建立裸鼠移植瘤模型,分为阳性干扰组、阴性对照组、空白对照组。监测瘤体积,测量瘤质量,采用RT-PCR、Western Blot、免疫组化检测移植瘤EGFR基因的表达。结果:阳性干扰组成瘤力明显降低,EGFR mRNA和蛋白的抑制率分别为78.8%和76.4%。结论:动物实验证实RNAi沉默EGFR基因可明显抑制卵巢癌的成瘤力。
- 林远洪吴永忠黄环郭启帅罗茜
- 关键词:EGFR基因RNA干扰卵巢癌
- 靶向EGFR基因的shRNA抑制胰腺癌PANC-1细胞增殖的研究被引量:1
- 2011年
- 目的探讨EGFR基因对胰腺癌PANC-1细胞的增殖抑制作用。方法构建针对EGFR序列特异性shRNA的表达载体,用脂质体转染胰腺癌PANC-1细胞。采用RT-PCR、Western blot检测EGFR mRNA和蛋白的表达;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡;克隆形成实验检测细胞增殖。结果靶向EGFR的序列特异性shRNA明显抑制EGFR mRNA和蛋白的表达,EGFR mRNA和蛋白的抑制率分别为72.1%和67.6%;G1期细胞增多、S期细胞减少(P<0.05);细胞凋亡增加(P<0.05);克隆形成减少(P<0.05)。结论靶向EGFR的序列特异性shRNA能明显抑制胰腺癌细胞增殖、促进凋亡。
- 林远洪雷小林吴永忠高泽莉
- 关键词:RNAI表皮生长因子受体胰腺癌
- 靶向EGFR基因的shRNA对胰腺癌细胞放疗敏感性的增强作用被引量:3
- 2011年
- 目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因对胰腺癌细胞放疗敏感性的增强作用。方法构建针对EGFR基因序列特异性shRNA的表达载体,用脂质体转染胰腺癌PANC-1细胞,G418筛选建立稳定克隆,采用RT-PCR、Western印迹检测EGFR基因的抑制情况。采用不同剂量X线照射瘤细胞后,用MTT法检测细胞凋亡率,集落形成实验检测细胞集落形成能力,观察胰腺癌细胞对放疗的敏感性。结果靶向EGFR的序列特异性shRNA可明显抑制EGFR基因的表达,EGFR mRNA和蛋白的抑制率分别为76.3%和71.4%;细胞凋亡增加(P<0.01),克隆形成率减少(P<0.01)。结论体外实验证实靶向EGFR的序列特异性shRNA可明显提高胰腺癌的放疗敏感性。
- 林远洪雷小林吴永忠张敬卫
- 关键词:表皮生长因子受体放疗胰腺癌