李杨
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：吉林亚泰(集团)股份有限公司更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 流感病毒H5N1在Vero细胞上培养条件的优化被引量：2
- 2015年
- 目的优化流感病毒H5N1在Vero细胞上的培养条件。方法在Vero细胞上,用不同维持液[M199、M199+表皮细胞生长因子(epidermal growth factor,EGF)、MEM、MEM+EGF、无血清培养基(serum-free medium,SFM)]及含不同胰酶浓度(3、5、7μg/ml)的M199维持液培养流感病毒H5N1,收获培养上清,检测血凝滴度,确定最适维持液及胰酶浓度;用流感病毒H5N1感染细胞上清于冻融前后分别感染Vero细胞,连续传代,收获培养上清,检测血凝滴度,比较冻融对病毒增殖的影响。将流感病毒H5N1以0.01 MOI感染对数生长期Vero细胞,以优化后的培养条件培养,收获培养上清,检测血凝滴度及病毒感染性滴度,确定H5N1在Vero细胞上连续传代的稳定性。结果当维持液培养基为SFM、胰酶浓度为5μg/ml时,利用病毒收获液直接感染2代后,再将维持液培养基更换为M199时,血凝滴度最高。利用优化后的培养条件在Vero细胞上连续传代培养流感病毒H5N1,血凝滴度和感染性病毒滴度均较稳定。结论优化后的培养条件在Vero细胞上可连续稳定传代培养流感病毒H5N1,为建立工作种子批,用于大流感疫苗的制备奠定了基础。
- 谢英林周庆玲王文军岳振奇韩云飞汪一名李春艳李杨郑超李光谱
- 关键词：流感病毒VERO细胞
- 大流行流感疫苗稳定剂的筛选被引量：1
- 2015年
- 目的 筛选大流行流感疫苗的稳定剂。方法 将流感病毒株Influenza A/Vietnam/1194/2004（H5N1）接种Vero细胞制备5批疫苗原液,加入A（lOH）3吸附制备成品疫苗。取同一批疫苗原液,分成5份,分别加入吐温-80（20μg/ml）及0.5%、1%和2%人血白蛋白稳定剂,以不加入稳定剂的疫苗原液作为空白对照,于37℃放置4周,检测流感病毒的血凝滴度,筛选疫苗的稳定剂;将加入筛选出的稳定剂的5批疫苗原液及3批成品疫苗于37℃放置不同时间,检测血凝素（hemagglutinin,HA）含量。结果 不加入稳定剂的疫苗原液37℃放置1周后,血凝滴度明显下降;加入20μg/ml吐温-80和0.5%人血白蛋白的疫苗原液37℃放置1周后,血凝滴度亦明显下降;而加入1%和2%人血白蛋白的疫苗原液于37℃放置4周,血凝滴度仍未下降,后续试验选择1%人血白蛋白作为疫苗稳定剂。加入1%人血白蛋白的5批疫苗原液于37℃放置1-4周与放置前比较,HA含量差异均无统计学意义（P〉0-05）;加入1%人血白蛋白的3批成品疫苗37℃放置6周,疫苗HA含量有下降趋势,37℃放置1-5周,相邻两周间HA含量差异无统计学意义（P〉0-05）,放置5周,HA含量下降幅度臆1μg/ml。结论1%人血白蛋白对流感病毒具有良好的稳定作用。
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- 关键词：稳定剂血凝滴度
