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张行行: 作品数：11 被引量：43H指数：5; 供职机构：江苏大学附属医院更多>>; 发文基金：镇江市科技支撑计划江苏省卫生厅科研基金国家自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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MicroRNA-429对TGF-β1诱导的大鼠胰腺星状细胞活化和上皮-间质转化的调控作用: 2015年; 目的探讨miR-429对大鼠胰腺星状细胞（PSCs）活化和上皮-间质转化（EMT）的调控作用.方法用组织块法提取、培养和分离PSCs,通过免疫荧光染色法检测结蛋白（desmin）、神经胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达鉴定PSCs.取新鲜分离的第2代PSCs,采用脂质体法将miR-429的模拟物（miR-429 mimic）和无意义小分子阴性对照片段（miR-NC）分别转染大鼠PSCs,再用10 μg/L TGF-β1刺激PSCs.采用蛋白质印迹法检测细胞a-SMA、波形蛋白（vimemin）、E-钙黏蛋白（E-cad）及EMT相关蛋白TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3的表达量;实时荧光定量PCR法检测a-SMA、vimentin、E-cad mRNA和miR-429的表达量.结果培养后PSCs细胞体积变大,伪足发达,细胞间连接减少,脂滴消失,GFAP、desmin表达阳性,α-SMA表达阴性,符合星状细胞的生物学特征.TGF-β1刺激后,大鼠PSCs α-SMA、vimentin、E-cad蛋白的表达量分别为对照组的（1.369 ±0.878）、（1.518±0.041）、（0.549±0.076）倍,差异均有统计学意义（P值均＜0.05）.转染miR-429 mimic且经TGF-β1刺激后,PSCs的α-SMA、vimentin、E-cad mRNA表达量是转染miR-NC组的（0.423±0.038）、（0.652±0.043）、（2.235±0.045）倍,蛋白表达量是（0.683±0.053）、（0.548±0.049）、（1.548±0.038）倍,差异均有统计学意义（P＜0.05或＜0.01）;TGF-β/Smad通路的TGF-β1、p-Smad2/3的相对表达量是miR-NC组的（0.459±0.038）、（0.525±0.029）倍,差异均有统计学意义（P ＜0.05或＜0.01）.结论上调miR-429的表达可减弱TGF-β1对大鼠PSCs活化的影响及逆转EMT,其可能的机制是抑制TGF-β1介导的TGF-β/Smad信号转导通路。; 徐岷王国英赵义蔡菁倪鑫刘鑫张行行张尤历; 关键词：微RNAS 胰腺星形细胞上皮-间质转化

长链非编码RNA UCA1对胰腺癌PANC-1细胞系侵袭转移的影响被引量：9: 2015年; 目的:探讨尿路上皮癌抗原1(urothelial carcinoma antigen 1,UCA1)在胰腺癌细胞中的表达及其对胰腺癌PANC-1细胞系侵袭转移的影响。方法:用荧光定量PCR法检测4种胰腺癌细胞系中UCA1的表达水平,选取PANC-1细胞系,将其随机分为对照组和实验组,对照组细胞转染空载Vector,实验组细胞转染UCA1表达质粒,比较两组细胞UCA1表达水平;Transwell迁移实验和Transwell侵袭实验分别检测两组细胞迁移和侵袭能力;蛋白质印迹检测两组细胞MMP14、MMP2和MMP9蛋白表达。结果:UCA1差异性表达于4种胰腺癌细胞系中;与对照组相比,实验组细胞的迁移和侵袭能力明显增强(P<0.01),细胞中MMP14、MMP2和MMP9的蛋白表达水平均明显增加(P<0.01)。结论:上调UCA1促进胰腺癌PANC-1细胞的体外侵袭转移。; 赵义张尤历张行行王国英龚爱华刘鑫徐岷; 关键词：胰腺癌肿瘤转移长链非编码RNA

长非编码 RNA UCA1在肿瘤中的表达及作用被引量：2: 2015年; 尿路上皮癌相关抗原1（UCA1）是一种膀胱癌特异性长非编码 RNA，无编码蛋白质的功能。UCA1差异性表达于各种胎儿组织，而大多数成人组织不表达 UCA1，在肿瘤形成过程中 UCA1再次表达。研究表明 UCA1可调控膀胱癌、乳腺癌和肝癌等肿瘤的增殖、凋亡、转移和耐药性。; 赵义张行行徐岷; 关键词：肿瘤

长链非编码RNA H19对胰腺癌细胞增殖、侵袭及转移的影响被引量：1: 2016年; 目的:探讨下调长链非编码RNA H19的表达对胰腺癌SW1990细胞增殖、侵袭转移能力的影响。方法:从4种胰腺癌细胞Patu8988、SW1990、Bxpc3、Panc-1中筛选出H19高表达株与低表达株。对高表达H19的SW1990细胞株瞬时转染H19 siRNA(实验组),同时转染阴性siRNA作为对照组。采用qRT-PCR检测转染效率;CCK-8法检测细胞增殖活性;平板克隆法检测细胞克隆形成能力;Transwell试验检测细胞迁移和侵袭的变化;蛋白质印迹法检测细胞增殖和凋亡相关蛋白的表达。结果:与对照组相比,实验组H19 mRNA表达明显降低(P<0.05),细胞相对增殖率无变化(P>0.05),但细胞克隆形成数、细胞侵袭及转移能力明显提高,ZEB1 mRNA表达增加,但mir-200家族的表达无明显变化(P>0.05),ZEB1、Snail及PCNA蛋白表达增加,Bcl/Bax比值升高(P均<0.05)。结论:下调H19表达可提高细胞克隆形成能力,促进细胞侵袭转移。; 王珏张尤历徐岷张行行王文兵; 关键词：H19 细胞侵袭细胞转移

PRMT5对肝癌细胞增殖及凋亡的影响被引量：6: 2015年; 该文目的为探讨蛋白质精氨酸甲基转移酶5(protein arginine methyltranserase 5,PRMT5)对肝癌细胞增殖、凋亡的影响。设计PRMT5短发夹核糖核酸(sh RNA)序列,装入p LKO.1-TRC vector质粒,进行慢病毒包装,感染肝癌细胞SMMC-7721和BEL-7402,嘌呤霉素筛选并培养稳定低表达PRMT5细胞株。Western blot、q PCR检测sh RNA干扰效率;CCK-8检测细胞增殖活性;平板克隆法检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测细胞增殖、凋亡相关蛋白的影响。结果显示,成功构建慢病毒重组质粒sh-PRMT5并感染肝癌细胞。Western blot、q PCR结果表明,筛选出的稳转细胞株能低表达PRMT5;在肝癌细胞中下调PRMT5的表达,可抑制细胞增殖(P<0.05),降低cyclin B1、cyclin D1、cdc20和cdc25B蛋白质水平(P<0.05),降低细胞克隆形成能力(P<0.05),促进细胞凋亡(P<0.05),同时能诱导Caspase-3表达,降低Bcl-2/Bax的比值(P<0.05)。由此说明,下调PRMT5的表达能抑制肝癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,为进一步研究体内PRMT5的作用提供基础。; 张尤历葛璐陆瑛胡昌龙张行行彭琬昕何俊波龚爱华徐岷; 关键词：肝癌增殖凋亡

长链非编码核糖核酸UCA-1对胰腺癌细胞侵袭转移能力的影响被引量：2: 2015年; 目的探讨尿路上皮癌胚抗原1(UCA-1)在胰腺癌细胞侵袭转移中的作用。方法采用实时荧光定量PCR检测5株胰腺癌细胞长链非编码核糖核酸UCA-1的表达;采用UCA-1表达质粒提高PaTu8988细胞的UCA-1水平,小干扰RNA用于降低BxPC-3细胞的UCA-1表达。用Transwell侵袭实验和迁移实验观察转染后的PaTu8988细胞和BxPC-3细胞的侵袭和迁移能力变化,Western blot检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9的表达。结果 UCA-1差异性表达于5株胰腺癌细胞。过表达UCA-1后,PaTu8988细胞的MMP-2和MMP-9的蛋白水平均增加,侵袭和迁移能力增强(P<0.001);而干扰UCA-1后,BxPC-3细胞的MMP-2和MMP-9的蛋白表达均降低,侵袭和迁移能力减弱(P<0.001)。结论 UCA-1的高表达能增强胰腺癌细胞的体外侵袭转移能力。; 赵义张尤历王国英张行行龚爱华葛璐李杰倪鑫刘鑫徐岷; 关键词：胰腺癌

下调长链非编码RNA PVT1表达对胰腺癌BxPC-3细胞凋亡、侵袭及转移的影响被引量：4: 2016年; 目的研究下调长链非编码RNA PVT1的表达对胰腺癌细胞增殖、凋亡及侵袭转移能力的影响。方法体外转染PVT1干扰序列si PVT1-1和si PVT1-2降低胰腺癌细胞系Bx PC-3 PVT1表达,同时转染阴性对照si PVT1-NC作为对照组。CCK-8实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞侵袭转移;qRT-PCR检测E-cadherin、N-cadherin、β-catenin、vimentin和PVT1 mRNA表达;Western blot检测凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、caspase-3)和上皮间质转化相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、β-catenin、vimentin)表达。结果下调胰腺癌细胞Bx PC-3 PVT1表达能明显抑制细胞增殖、促进细胞凋亡和减少细胞侵袭转移数目(P<0.05);E-cadherin蛋白和分子水平升高,N-cadherin、β-catenin、vimentin蛋白和分子水平降低(P<0.05);Bax和caspase-3蛋白水平升高,而Bcl-2蛋白水平降低(P<0.05)。结论下调长链非编码RNA PVT1表达能抑制胰腺癌细胞增殖和侵袭转移能力,促进胰腺癌细胞凋亡,且能够逆转胰腺癌细胞上皮间质转化。; 张行行赵义王珏倪鑫刘鑫葛璐徐岷; 关键词：长链非编码RNA 胰腺癌上皮间质转化

长非编码RNA在肿瘤上皮-间质转化中的研究进展被引量：4: 2015年; 长非编码RNA（lncRNA）是一类长度大于200个核苷酸的RNA分子，本身不具有编码蛋白质的功能。越来越多的证据表明多种lncRNA如HOTAIR、MALAT-1、H19和BANCR等可通过诱导上皮-间质转化促进肿瘤的转移。; 赵义张行行徐岷; 关键词：肿瘤转移上皮-间质转化

长链非编码RNA aHIF和ANRIL在胃癌中的表达被引量：5: 2016年; 目的:探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)中的反义缺氧诱导因子(antisense hypoxia inducible factor,a HIF)和位于细胞周期激酶抑制因子4(INK4)基因座中反义非编码RNA(antisense noncoding RNA in the INK4 locus,ANRIL)在胃癌组织与血浆中的表达。方法:收集20例胃癌患者癌组织及对应的癌旁组织、33例胃癌患者和20例健康者血浆,采用实时荧光定量PCR测定胃癌组织和血浆中lncRNA a HIF和ANRIL的表达水平,分析lncRNA a HIF、ANRIL在血浆中的表达与胃癌组织表达的相关性。结果:胃癌组织中lncRNA a HIF和ANRIL的表达水平均明显高于癌旁组织(t分别为-4.463,-4.886,P均<0.01);胃癌患者血浆中lncRNA a HIF和ANRIL的表达水平均明显高于健康者(t分别为-4.232,-4.450,P<0.01),且与胃癌组织中的表达水平呈正相关(r分别为0.536,0.524,P<0.05)。结论:lncRNA a HIF和ANRIL在胃癌组织和患者血浆中均高表达,且血浆与组织中的表达水平呈正相关。; 刘鑫张尤历秦岩倪鑫龚爱华张行行徐岷; 关键词：胃癌长链非编码RNA

长链非编码RNA UCA1对胰腺癌细胞系侵袭转移的影响被引量：7: 2015年; 目的探讨尿路上皮癌相关1(UCA1)在胰腺癌中的表达及其对胰腺癌细胞侵袭转移的影响。方法用荧光定量PCR检测11例胰腺癌组织和配对的癌旁组织及5种胰腺癌细胞系中UCA1的表达,通过RNA干扰技术降低胰腺癌细胞系Bx PC-3的UCA1水平,用Transwell侵袭实验和划痕实验观察Bx PC-3细胞的侵袭和迁移能力,Western blot检测MMP-2和MMP-9的蛋白水平。结果胰腺癌组织的UCA1水平高于相应的癌旁组织(P<0.05),UCA1差异性表达于5种胰腺癌细胞系;干扰UCA1后,Bx PC-3细胞的MMP-2和MMP-9的蛋白水平均降低(P<0.01),侵袭能力和迁移能力明显减弱(P<0.01)。结论 UCA1在胰腺癌中高表达,下调UCA1通过降低MMP-2和MMP-9的表达减弱胰腺癌细胞系Bx PC-3的体外侵袭转移能力。; 张尤历赵义张行行王国英龚爱华倪鑫徐岷; 关键词：胰腺肿瘤肿瘤侵袭肿瘤转移长链非编码RNA

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